發(fā)布時(shí)間：2017-06-07 15:16

  本文關(guān)鍵詞：NADPH氧化酶在角膜堿燒傷中作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討NADPH氧化酶(NOXs)在小鼠堿燒傷模型中的作用。方法:將6-8周的C57小鼠右眼建立堿燒傷模型。免疫熒光用于觀察NOXs在人堿燒傷角膜以及小鼠堿燒傷角膜的表達(dá)情況。免疫印跡和實(shí)時(shí)熒光PCR法用于檢測(cè)NOXs在小鼠堿燒傷模型中的表達(dá)情況。小鼠動(dòng)物模型分為4組:左眼作為正常對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)對(duì)照組(PBS組)、DPI給藥組、APO給藥組。裂隙燈下觀察3天、7天、14天各組小鼠堿燒傷后角膜的新生血管生長(zhǎng)情況。堿燒傷后7天應(yīng)用免疫熒光法檢測(cè)各組3-NT(3-硝基絡(luò)氨酸)、CD11b的蛋白表達(dá)情況,免疫印跡法檢測(cè)各組3-NT的蛋白表達(dá)情況,實(shí)時(shí)熒光PCR法檢測(cè)各組炎癥因子(TNF-α,IL-1β,IL-6),血管生長(zhǎng)因子(VEGF,VEGFR1,VEGFR2)表達(dá)情況。CellROX試劑用于ROS的含量檢測(cè)。堿燒傷后14天應(yīng)用熒光素鈉造影觀察新生管的變化情況。結(jié)果:免疫熒光結(jié)果顯示在角膜堿燒傷中NOX2和NOX4表達(dá)量明顯升高。免疫印跡法以及熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,與正常組相比,堿燒傷組Nox2、Nox4蛋白以及mRNA水平明顯增加。NADPH氧化酶抑制劑應(yīng)用后,免疫熒光染色檢測(cè)顯示:DPI以及Apo可以顯著減少堿燒傷后CD11b的表達(dá)升高。熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,炎癥因子IL-1β和IL-6的mRNA表達(dá)水平在堿燒傷中顯著高于正常角膜中,DPI以及APO可以顯著地降低IL-1β和IL-6的mRNA表達(dá)水平;然而TNF-α的mRNA表達(dá)水平在各組間沒有顯著差異;VEGF、VEGFR1、VEGFR2的mRNA表達(dá)水平在堿燒傷中顯著高于正常角膜中,在DPI組以及APO組中可以顯著地降低。ROS的含量檢測(cè)顯示,堿燒傷后ROS的含量顯著增加,DPI以及Apo可以顯著地減少ROS的含量。心臟灌注熒光素鈉角膜鋪片結(jié)果顯示:堿燒傷后角膜新生血管的面積顯著高于正常組,DPI以及Apo可以顯著減少角膜新生血管的面積。結(jié)論:在角膜堿燒傷中NADPH氧化酶明顯升高。抑制NADPH氧化酶可以減緩堿燒傷對(duì)角膜的傷害,這可能為治療角膜堿燒傷提供一個(gè)新的靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：角膜堿燒傷 NADPH氧化酶 氧化應(yīng)激 炎癥
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R779.1
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 中英文縮略詞表8-9
• 第1章 引言9-11
• 第2章 材料與方法11-19
• 2.1 材料11-15
• 2.1.1 人體組織材料11
• 2.1.2 動(dòng)物11
• 2.1.3 主要試劑11
• 2.1.4 抗體11-12
• 2.1.5 主要儀器12
• 2.1.6 溶液配制12-15
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法15-18
• 2.2.1 堿燒傷動(dòng)物模型的制作以及NOX抑制劑的治療15
• 2.2.2 免疫熒光染色15
• 2.2.3 實(shí)時(shí)定量（real-time）PCR15-17
• 2.2.4. 蛋白免疫印跡法17-18
• 2.2.5. ROS含量的檢測(cè)18
• 2.2.6. 角膜新生血管的檢測(cè)18
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法18-19
• 第3章 結(jié)果19-28
• 3.1 NADPH氧化酶在人和小鼠堿燒傷后角膜中的表達(dá)情況19-20
• 3.2 NADPH氧化酶抑制劑降低堿燒傷后角膜組織中的氧化應(yīng)激水平20-22
• 3.3 NADPH氧化酶抑制劑降低堿燒傷后角膜組織中的炎癥水平22-24
• 3.4 NADPH氧化酶抑制劑降低角膜堿燒傷后的角膜新生血管24-25
• 3.5 NADPH氧化酶抑制劑降低角膜堿燒傷后角膜組織中的VEGF及其受體，MMP的mRNA水平25-28
• 第4章 討論28-31
• 第5章 結(jié)論31-32
• 致謝32-33
• 參考文獻(xiàn)33-36
• 綜述36-45
• 參考文獻(xiàn)42-45

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

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本文編號(hào)：429471