急性高眼壓對大鼠角膜內(nèi)皮細胞屏障功能及泵功能的影響
本文關鍵詞:急性高眼壓對大鼠角膜內(nèi)皮細胞屏障功能及泵功能的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:角膜內(nèi)皮細胞對于維持角膜的相對脫水狀態(tài)起著非常重要的作用,急性閉角型青光眼患者角膜水腫明顯,本研究主要探討急性高眼壓(acute ocular hypertension,AOH)對大鼠角膜內(nèi)皮細胞的影響。方法:將Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機分為四組,穿刺對照組、AOH后即刻組、AOH后2天組、AOH后7天組。SD大鼠右眼前房灌注平衡鹽液(balance salt solution,BSS)2小時建立急性高眼壓模型,左眼作為正常對照。在前房灌注期間和灌注后,用手持式非接觸眼壓計測量大鼠眼壓,裂隙燈顯微鏡觀察各組角膜水腫情況。茜素紅染色觀察角膜內(nèi)皮細胞形態(tài)并進行細胞計數(shù),Ki67染色觀察角膜內(nèi)皮細胞的增殖情況,通過檢測FITC-dextran在角膜基質(zhì)中的累積量來評價角膜內(nèi)皮細胞的滲透。通過免疫熒光染色法和Westernblot檢測角膜內(nèi)皮細胞頂端連接復合體(ZO-1、F-actin)和Na,KATPase的改變,評價角膜內(nèi)皮細胞的屏障功能和泵功能。結果:前房灌注期間眼壓為82.6±2.3mmHg(正常大鼠眼壓范圍為:10.2±0.4 mmHg)。與對照組相比,AOH后即刻組角膜出現(xiàn)明顯水腫,熒光滲透明顯增加,周邊角膜內(nèi)皮細胞數(shù)量明顯減少且細胞形態(tài)不規(guī)則,緊密連接蛋白(ZO-1)和細胞骨架(F-actin)均被明顯破壞。Na,K-ATPase也被破壞,但表達輕微增加,沒有統(tǒng)計學意義。AOH后2天組角膜內(nèi)皮細胞增殖明顯,角膜內(nèi)皮細胞密度恢復至正常,F-actin被破壞得更明顯,角膜水腫、周邊角膜內(nèi)皮細胞數(shù)量、熒光滲透,ZO-1和Na,K-ATPase均恢復正常。AOH后7天組除了F-actin尚未完全修復外角膜內(nèi)皮細胞的其余各項指標均恢復正常。結論:AOH 2小時可以破壞大鼠角膜內(nèi)皮細胞的屏障功能及泵功能,是急性閉角型青光眼引起角膜水腫的原因。
【關鍵詞】:急性高眼壓 角膜內(nèi)皮細胞 屏障功能 泵功能
【學位授予單位】:南華大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R775
【目錄】:
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-10
- 第1章 緒論10-14
- 第2章 材料與方法14-22
- 2.1 材料與設備14-16
- 2.2 構建大鼠急性高眼壓模型16-17
- 2.3 實驗方法17-20
- 2.4 統(tǒng)計學分析20-22
- 第3章 實驗結果22-30
- 3.1 大鼠急性高眼壓模型眼壓變化曲線22
- 3.2 裂隙燈顯微鏡檢查22-23
- 3.3 角膜內(nèi)皮細胞計數(shù)及茜素紅染色23-24
- 3.4 急性高眼壓損傷誘導大鼠角膜內(nèi)皮細胞增殖24-25
- 3.5 AOH破壞角膜內(nèi)皮細胞緊密連接蛋白(ZO-1)的完整性25-26
- 3.6 AOH破壞角膜內(nèi)皮細胞的細胞骨架蛋白(F-actin)26-27
- 3.7 AOH破壞角膜內(nèi)皮細胞的泵結構蛋白(Na,K-ATPase)27-28
- 3.8 AOH導致角膜內(nèi)皮細胞的滲透性增加28-30
- 第4章 討論30-34
- 第5章 結論34-36
- 參考文獻36-42
- 附錄 1. 縮略詞索引42-44
- 附錄 2. 綜述44-54
- 參考文獻50-54
- 附錄 3. 碩士期間相關成果目錄54-56
- 一、碩士期間文章發(fā)表情況54
- 二、碩士期間參加的重要學術會議54-56
- 致謝56-57
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