背景:喉鱗狀細(xì)胞癌(Laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)是目前常見的頭頸部惡性腫瘤之一,中晚期患者的生存率不高與化療藥物的耐藥有關(guān)。順鉑廣泛應(yīng)用于喉癌的臨床治療,但因其敏感性不高而削弱了治療效果。Yes相關(guān)蛋白(Yes-associated protein,YAP)是Hippo通路中的關(guān)鍵蛋白,參與調(diào)節(jié)組織和器官的生長、分化、代謝和凋亡。近期的研究顯示YAP高表達(dá)見于多種腫瘤,調(diào)控著腫瘤的進(jìn)展,YAP表達(dá)水平與腫瘤化療敏感性的相關(guān)性研究也成為當(dāng)下熱點(diǎn)之一。本課題組先前研究發(fā)現(xiàn)YAP在喉癌組織和細(xì)胞核中高表達(dá)并與其惡性進(jìn)展相關(guān),但目前關(guān)于喉癌化療敏感性與YAP表達(dá)的相關(guān)性尚不清楚。目的:通過慢病毒轉(zhuǎn)染上調(diào)、下調(diào)YAP表達(dá)水平,探討YAP對喉鱗狀細(xì)胞癌順鉑敏感性的影響及可能的機(jī)制。方法:慢病毒轉(zhuǎn)染喉癌細(xì)胞系Hep-2、TU686,構(gòu)建YAP上調(diào)、下調(diào)及空載體對照組,同時設(shè)置未轉(zhuǎn)染空白對照組。利用實(shí)時熒光定量PCR(q RT-PCR)、Western Blot(WB)驗(yàn)證處理后各組細(xì)胞YAPm RNA和蛋白的表達(dá)水平;CCK-8法和克隆平板實(shí)驗(yàn)檢測順鉑...

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2CCK-8檢測YAP表達(dá)水平對喉癌細(xì)胞增殖和順鉑敏感性影響

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文26圖2CCK-8檢測YAP表達(dá)水平對喉癌細(xì)胞增殖和順鉑敏感性影響A：不同時間各組喉癌細(xì)胞CCK-8的OD值B：不同順鉑濃度作用24h各組喉癌細(xì)胞抑制率Figure2EffectsofYAPknockdownoroverexpressiononprolif....

圖3克隆平板實(shí)驗(yàn)檢測YAP表達(dá)水平聯(lián)合順鉑對喉癌細(xì)胞克隆能力的影響

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文27較其他組，上調(diào)組克隆數(shù)明顯增多，而下調(diào)組明顯較少（**P<0.01）。說明YAP下調(diào)可以增強(qiáng)順鉑對喉癌細(xì)胞克隆的抑制作用。圖3克隆平板實(shí)驗(yàn)檢測YAP表達(dá)水平聯(lián)合順鉑對喉癌細(xì)胞克隆能力的影響。各組喉癌細(xì)胞孵育14天后集落形成結(jié)果（A）;與對照組和空載體組....

圖4劃痕實(shí)驗(yàn)檢測YAP表達(dá)水平聯(lián)合順鉑對喉癌細(xì)胞愈合能力的影響

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文28并計算愈合效果。喉癌細(xì)胞Hep-2各組48h愈合百分比（%）為上調(diào)組（80.41±0.67）、對照組（62.52±1.06）、空載體組（60.77±1.78）、下調(diào)組（36.78±1.10），TU686各組為上調(diào)組（77.73±1.39）、對照組（58....

圖5Transwell實(shí)驗(yàn)檢測YAP表達(dá)水平聯(lián)合順鉑對喉癌細(xì)胞遷移侵襲能力的影響

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文293.5Transwell實(shí)驗(yàn)觀察YAP下調(diào)聯(lián)合順鉑對喉癌細(xì)胞遷移侵襲的影響（1）顯微鏡下觀察并記錄各組喉癌細(xì)胞遷移個數(shù)（圖5，AB），喉癌細(xì)胞Hep-2各組細(xì)胞數(shù)為上調(diào)組（345.20±18.71）、對照組（238.20±23.28）、空載體組（228....

本文編號：4030195