發(fā)布時間：2024-11-26 22:34

　　研究背景:視網(wǎng)膜是人體中耗氧量最高的組織之一,視網(wǎng)膜氧平衡對視網(wǎng)膜穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要。近期研究發(fā)現(xiàn),視網(wǎng)膜內(nèi)的氧化平衡被破壞可能導(dǎo)致光感受器細(xì)胞損失的進(jìn)一步發(fā)展。硫化氫（H₂S）作為一種小氣體信號分子,可通過Nrf2途徑來調(diào)控機(jī)體的抗氧化能力和抗炎癥能力,而使用H₂S作為保護(hù)視網(wǎng)膜的研究尚少,并未見到使用H₂S通過Nrf2途徑來發(fā)揮保護(hù)作用及其具體機(jī)制的研究報道。研究目的:基于現(xiàn)有文獻(xiàn)和我們實(shí)驗室前期工作的發(fā)現(xiàn),以Nrf2途徑作為信號分子靶標(biāo),開展了使用H₂S是否能保護(hù)視網(wǎng)膜細(xì)胞免受氧化損傷的相關(guān)研究,并探究其作用機(jī)制。研究方法:1.體內(nèi)模型:選用Sprague-Dawley（SD）大鼠為研究對象,通過腹腔注射N-甲基-N-亞硝基脲（MNU）和硫氫化鈉（NaHS）對大鼠進(jìn)行處理,眼球、腎臟和肝臟用于HE染色并顯微鏡觀察損傷,構(gòu)建視網(wǎng)膜損傷的動物模型,考察H₂S在體內(nèi)對視網(wǎng)膜損傷的保護(hù)作用,并采用MDA和SOD檢測試劑盒檢測體內(nèi)MDA和SOD的變化,用ELISA方法檢測體內(nèi)IL-1α和T...

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮寫
第一章 前言
    1.1 視網(wǎng)膜及其相關(guān)疾病
        1.1.1 視網(wǎng)膜疾病簡介
        1.1.2 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞模型和MNU誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜色素變性(RP)模型
    1.2 視網(wǎng)膜疾病產(chǎn)生的相關(guān)因素以及治療手段
        1.2.1 氧化脅迫
        1.2.2 高糖環(huán)境(細(xì)胞)
        1.2.3 炎癥反應(yīng)
        1.2.4 藍(lán)光
        1.2.5 治療視網(wǎng)膜疾病的方式
    1.3 硫化氫(H₂S)與視網(wǎng)膜氧化損傷的保護(hù)作用
        1.3.1 硫化氫簡介
        1.3.2 視網(wǎng)膜組織中的硫化氫產(chǎn)生方式
        1.3.3 硫化氫供體
        1.3.4 硫化氫對視網(wǎng)膜的生理功能影響
        1.3.5 硫化氫對視網(wǎng)膜疾病的影響
        1.3.6 硫化氫的抗氧化途徑通過Nrf2來調(diào)控視網(wǎng)膜的抗氧化能力
    1.4 立題依據(jù)及研究意義
第二章 材料和方法
    2.1 實(shí)驗材料
        2.1.1 藥物和化合物
        2.1.2 主要實(shí)驗試劑
        2.1.3 主要實(shí)驗試劑配置
        2.1.4 主要實(shí)驗儀器
    2.2 實(shí)驗方法
        2.2.1 實(shí)驗動物飼養(yǎng)及分組
        2.2.2 MNU誘導(dǎo)的大鼠視網(wǎng)膜變性模型
        2.2.3 組織HE染色病理分析
        2.2.4 動物視網(wǎng)膜組織MDA檢測
        2.2.5 動物視網(wǎng)膜組織SOD檢測
        2.2.6 酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)檢測大鼠血清IL-1、TNF-α
        2.2.7 免疫組化
        2.2.8 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇
        2.2.9 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.10 實(shí)驗分組
        2.2.11 MTT檢測
        2.2.12 AnnexinⅤ-FITC/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡
        2.2.13 胞內(nèi)ROS檢測
        2.2.14 胞內(nèi)SOD檢測
        2.2.15 酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)檢測胞內(nèi)IL-1、TNF-α
        2.2.16 mRNA的表達(dá)(q-PCR)
        2.2.17 蛋白免疫印跡法(Western blot)
    2.3 技術(shù)路線
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 H₂S可減輕MNU誘導(dǎo)的大鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞損傷和使視網(wǎng)膜變薄
    3.2 H₂S可以減少M(fèi)NU誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜氧化損傷
    3.3 H₂S可以減少M(fèi)NU誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜炎癥
    3.4 H₂S可以增加MNU誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜Nrf2的蛋白表達(dá)
    3.5 H₂S可以保護(hù)ADR誘導(dǎo)產(chǎn)生的視網(wǎng)膜細(xì)胞損傷
    3.6 H₂S減少過氧化氫處理的人ARPE-19細(xì)胞凋亡
    3.7 H₂S可以降低過氧化氫處理的ARPE-19的氧化損傷
    3.8 H₂S可以降低過氧化氫處理的ARPE-19細(xì)胞的炎癥因子的釋放
    3.9 H₂S可以增加過氧化氫處理ARPE-19細(xì)胞Nrf2的mRNA和蛋白表達(dá)
    3.10 H₂S通過Nrf2途徑減少過氧化氫處理的ARPE-19的細(xì)胞損傷
    3.11 H₂S通過Nrf2途徑減少過氧化氫處理的ARPE-19的細(xì)胞凋亡
    3.12 H₂S通過Nrf2途徑可以降低過氧化氫處理的ARPE-19的氧化損傷
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)(Reference)
在學(xué)期間的研究成果
致謝



本文編號：4012694