發(fā)布時(shí)間：2024-10-03 00:40

　　 目的研究雷帕霉素在兔眼濾過(guò)性手術(shù)后抗瘢痕形成的作用及其產(chǎn)生作用可能的原因。方法取健康成年的青紫蘭兔96只,取每只兔左眼行小梁切除術(shù),術(shù)后隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組,24只/組。術(shù)后將配制好的不同濃度雷帕霉素滴眼劑(1%、3%、5%)用于實(shí)驗(yàn)組,將藥用蓖麻油滴眼劑用于實(shí)驗(yàn)對(duì)照組。4次/d。術(shù)后分別于第7、14、21、28天依照Krofeld分型法比較濾過(guò)泡的形態(tài)和功能。在術(shù)后第1、2、3、4周分別隨機(jī)處死6只青紫藍(lán)兔后,采用免疫組化法檢測(cè)兔眼行小梁切除術(shù)區(qū)域的組織中增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)和α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)因子局部表達(dá)情況,觀察結(jié)果。體外原代培養(yǎng)兔眼結(jié)膜下成纖維細(xì)胞(RTFs),采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)經(jīng)不同濃度雷帕霉素溶液(0、0.06、0.25、1、4 mg/L)作用后細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果在術(shù)后第1、2、3周可見(jiàn)各實(shí)驗(yàn)組功能性濾過(guò)泡形成率比對(duì)照組高(P<0.05),且功能性濾過(guò)泡的形成率呈雷帕霉素藥物濃度依賴性增長(zhǎng);免疫組化法可見(jiàn)實(shí)驗(yàn)組PCNA標(biāo)記陽(yáng)性成纖維細(xì)胞數(shù)表達(dá)量比相應(yīng)的對(duì)照組高,各實(shí)驗(yàn)組數(shù)目比相應(yīng)的對(duì)照組少(P<0.05),且α-SMA陽(yáng)性成纖維細(xì)胞的表...

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【部分圖文】：

圖1PCNA免疫組化結(jié)果

無(wú)菌條件下在完全培養(yǎng)基中加入組織，組織塊在48h后就會(huì)出現(xiàn)貼壁，培養(yǎng)至4～7d時(shí)，在離組織不遠(yuǎn)的地方出現(xiàn)不規(guī)則生長(zhǎng)的細(xì)胞。生長(zhǎng)空間充足的情況下，細(xì)胞呈放射狀生長(zhǎng)，符合成纖維細(xì)胞形態(tài)表現(xiàn)。圖2α-SMA免疫組化結(jié)果

圖3RTFs的原代培養(yǎng)圖

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期RTFs，用不同濃度的雷帕霉素溶液（0、0.06、0.25、1、4mg/L）作用相同時(shí)間后，采用流式細(xì)胞技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)各濃度下細(xì)胞均出現(xiàn)不同程度的凋亡，而且當(dāng)濃度為0.25mg/L時(shí)細(xì)胞凋亡數(shù)目明顯的增加，隨著雷帕霉素的濃度增加，細(xì)胞凋亡數(shù)目增多，且具有濃度依....

圖2α-SMA免疫組化結(jié)果

圖1PCNA免疫組化結(jié)果2.3.1.2RTFs的免疫熒光鑒定

圖4免疫熒光鑒定結(jié)果

本實(shí)驗(yàn)得出以下結(jié)論：（1）雷帕霉素可以抑制兔抗青光眼術(shù)后濾過(guò)區(qū)組織過(guò)度增生，保留功能性濾過(guò)泡，并延長(zhǎng)其壽命；（2）雷帕霉素可以有效的誘導(dǎo)RTFs凋亡的發(fā)生，從而產(chǎn)生抑制青光眼術(shù)后濾過(guò)區(qū)成纖維細(xì)胞過(guò)度增殖的作用。目前，小梁切除術(shù)依然是在青光眼患者中實(shí)現(xiàn)目標(biāo)眼壓的最有效方式[30-3....

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