目的 通過建立兔增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(proliferative vitreoretinopathy, PVR)動(dòng)物模型,探討腺病毒介導(dǎo)p21WAF1/CIP1基因?qū)VR增生的抑制作用及機(jī)制,評(píng)價(jià)其治療PVR的效果。 方法 1.PVR動(dòng)物模型的建立：青紫藍(lán)兔28只,隨機(jī)分成兩組,實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組各14只。實(shí)驗(yàn)組采用玻璃體腔注射人富含血小板血漿(Platelet-rich plasma,PRP)聯(lián)合鞏膜外冷凍建立PVR模型,對(duì)照組采用玻璃體腔注射兔PRP建立PVR模型。行間接眼底鏡、B型超聲及HE染色檢查,觀察PVR程度及視網(wǎng)膜脫離的發(fā)生情況。 2.p21WAF1/CIP1在PVR發(fā)病機(jī)制中的作用：青紫藍(lán)兔27只,隨機(jī)分成兩組,正常組3只,實(shí)驗(yàn)組24只。正常組不做任何處理；實(shí)驗(yàn)組每只兔隨機(jī)選取一只眼作為實(shí)驗(yàn)眼,采用玻璃體腔注射人PRP聯(lián)合鞏膜外冷凍建立PVR模型。行蛋白免疫印跡(Western blot, WB)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR),檢測(cè)PVR模型建立后第7d、14d、21...

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、PVR動(dòng)物模型的建立
    1.1 對(duì)象和方法
        1.1.1 對(duì)象
        1.1.2 方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 眼科檢查結(jié)果
        1.2.2 眼科B超結(jié)果
        1.2.3 PVR分級(jí)
        1.2.4 組織病理學(xué)檢查
    1.3 討論
        1.3.1 PVR的基本病理過程和分期
        1.3.2 常見PVR動(dòng)物模型的建立方法
        1.3.3 玻璃體腔注射人PRP聯(lián)合鞏膜外冷凍建立兔PVR模型
    1.4 小結(jié)
二、p21^WAF1/CIP1在PVR發(fā)病中作用機(jī)制的研究
    2.1 對(duì)象和方法
        2.1.1 對(duì)象
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 WB方法檢測(cè)視網(wǎng)膜p21^WAF1/CIP1、CDK2、cyclin E蛋白表達(dá)
        2.2.2 RT-PCR法檢測(cè)視網(wǎng)膜p21^WAF1/CIP1、CDK₂、cyclin E mRNA的表達(dá)
    2.3 討論
        2.3.1 細(xì)胞因子在PVR發(fā)病中的作用
        2.3.2 細(xì)胞周期及其調(diào)控機(jī)制
        2.3.3 p21^WAF1/CIP1的生物學(xué)功能
        2.3.4 p21^WAF1/CIP1在PVR發(fā)病機(jī)制中的作用
    2.4 小結(jié)
三、腺病毒介導(dǎo)外源性p21^WAF1/CIP1基因抑制體外培養(yǎng)hRPE細(xì)胞增殖及遷移
    3.1 對(duì)象和方法
        3.1.1 對(duì)象
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 p21^WAF1/CIP1基因轉(zhuǎn)染人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞形態(tài)及數(shù)目的影響
        3.2.2 MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖
        3.2.3 Transwell檢測(cè)細(xì)胞遷移
        3.2.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期
        3.2.5 WB法檢測(cè)p21^WAF1/CIP1、CDK₂、cyclin E蛋白的表達(dá)
        3.2.6 RT-PCR方法檢測(cè)p21^WAF1/CIP1、CDK₂、cyclin E mRNA的表達(dá)
    3.3 討論
        3.3.1 RPE細(xì)胞在PVR發(fā)病中的作用研究
        3.3.2 p21^WAF1/CIP1基因?qū)RPE細(xì)胞增殖及遷移能力的影響
        3.3.3 腺病毒轉(zhuǎn)染p21^WAF1/CIP1基因?qū)RPE細(xì)胞周期調(diào)控的機(jī)制
    3.4 小結(jié)
四、腺病毒介導(dǎo)p21^WAF1/CIP1基因抑制兔PVR的實(shí)驗(yàn)研究
    4.1 對(duì)象和方法
        4.1.1 對(duì)象
        4.1.2 方法
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 臨床觀察結(jié)果及PVR分級(jí)
        4.2.2 標(biāo)本大體觀察及病理結(jié)果
        4.2.3 WB及RT-PCR檢測(cè)視網(wǎng)膜p21^WAF1/CIP1、CDK₂、cyclin E表達(dá)
    4.3 討論
        4.3.1 腺病毒介導(dǎo)堆因轉(zhuǎn)染技術(shù)在眼部疾病中的應(yīng)用
        4.3.2 增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變的治療現(xiàn)狀
        4.3.3 腺病毒介導(dǎo)p21^WAF1/CIP1基因?qū)VR的抑制作用
    4.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3935351