目的 通過建立兔增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(proliferative vitreoretinopathy, PVR)動物模型,探討腺病毒介導p21WAF1/CIP1基因?qū)VR增生的抑制作用及機制,評價其治療PVR的效果。 方法 1.PVR動物模型的建立：青紫藍兔28只,隨機分成兩組,實驗組及對照組各14只。實驗組采用玻璃體腔注射人富含血小板血漿(Platelet-rich plasma,PRP)聯(lián)合鞏膜外冷凍建立PVR模型,對照組采用玻璃體腔注射兔PRP建立PVR模型。行間接眼底鏡、B型超聲及HE染色檢查,觀察PVR程度及視網(wǎng)膜脫離的發(fā)生情況。 2.p21WAF1/CIP1在PVR發(fā)病機制中的作用：青紫藍兔27只,隨機分成兩組,正常組3只,實驗組24只。正常組不做任何處理；實驗組每只兔隨機選取一只眼作為實驗眼,采用玻璃體腔注射人PRP聯(lián)合鞏膜外冷凍建立PVR模型。行蛋白免疫印跡(Western blot, WB)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR),檢測PVR模型建立后第7d、14d、21...

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【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、PVR動物模型的建立
    1.1 對象和方法
        1.1.1 對象
        1.1.2 方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 眼科檢查結(jié)果
        1.2.2 眼科B超結(jié)果
        1.2.3 PVR分級
        1.2.4 組織病理學檢查
    1.3 討論
        1.3.1 PVR的基本病理過程和分期
        1.3.2 常見PVR動物模型的建立方法
        1.3.3 玻璃體腔注射人PRP聯(lián)合鞏膜外冷凍建立兔PVR模型
    1.4 小結(jié)
二、p21^WAF1/CIP1在PVR發(fā)病中作用機制的研究
    2.1 對象和方法
        2.1.1 對象
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 WB方法檢測視網(wǎng)膜p21^WAF1/CIP1、CDK2、cyclin E蛋白表達
        2.2.2 RT-PCR法檢測視網(wǎng)膜p21^WAF1/CIP1、CDK₂、cyclin E mRNA的表達
    2.3 討論
        2.3.1 細胞因子在PVR發(fā)病中的作用
        2.3.2 細胞周期及其調(diào)控機制
        2.3.3 p21^WAF1/CIP1的生物學功能
        2.3.4 p21^WAF1/CIP1在PVR發(fā)病機制中的作用
    2.4 小結(jié)
三、腺病毒介導外源性p21^WAF1/CIP1基因抑制體外培養(yǎng)hRPE細胞增殖及遷移
    3.1 對象和方法
        3.1.1 對象
        3.1.2 方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 p21^WAF1/CIP1基因轉(zhuǎn)染人視網(wǎng)膜色素上皮細胞形態(tài)及數(shù)目的影響
        3.2.2 MTT法檢測細胞增殖
        3.2.3 Transwell檢測細胞遷移
        3.2.4 流式細胞儀檢測細胞周期
        3.2.5 WB法檢測p21^WAF1/CIP1、CDK₂、cyclin E蛋白的表達
        3.2.6 RT-PCR方法檢測p21^WAF1/CIP1、CDK₂、cyclin E mRNA的表達
    3.3 討論
        3.3.1 RPE細胞在PVR發(fā)病中的作用研究
        3.3.2 p21^WAF1/CIP1基因?qū)RPE細胞增殖及遷移能力的影響
        3.3.3 腺病毒轉(zhuǎn)染p21^WAF1/CIP1基因?qū)RPE細胞周期調(diào)控的機制
    3.4 小結(jié)
四、腺病毒介導p21^WAF1/CIP1基因抑制兔PVR的實驗研究
    4.1 對象和方法
        4.1.1 對象
        4.1.2 方法
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 臨床觀察結(jié)果及PVR分級
        4.2.2 標本大體觀察及病理結(jié)果
        4.2.3 WB及RT-PCR檢測視網(wǎng)膜p21^WAF1/CIP1、CDK₂、cyclin E表達
    4.3 討論
        4.3.1 腺病毒介導堆因轉(zhuǎn)染技術在眼部疾病中的應用
        4.3.2 增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變的治療現(xiàn)狀
        4.3.3 腺病毒介導p21^WAF1/CIP1基因?qū)VR的抑制作用
    4.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    綜述參考文獻
致謝



本文編號：3935351