目的：觀察體外培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜Muller細胞在高糖條件下的凋亡情況及NF-κB的表達變化,研究chEPO作用下上述指標(biāo)的變化,探索rhEPO的對Muller細胞的保護作用及其可能機制。 方法：提取大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞及膠質(zhì)細胞進行混合培養(yǎng),反復(fù)胰酶消化法提純Muller細胞,隨機分為空白組,高糖組及不同濃度rhEPO干預(yù)組,培養(yǎng)48h后應(yīng)用TUNEL法檢測細胞凋亡情況,SP免疫細胞化學(xué)法測定NF-κB蛋白的表達變化。 結(jié)果：TUNEL法檢測顯示空白組見少量凋亡陽性細胞,高糖組陽性細胞明顯增多(P<0.01),各rhEPO干預(yù)組同高糖組相比凋亡細胞明顯減少(P<0.01),且呈一定程度劑量依賴性；SP法見NF-kB在空白組僅有極少量表達,在高糖組呈弱陽性表達,而各rhEPO干預(yù)組較高糖組表達明顯增強(P<0.01),且呈劑量依賴性。 結(jié)論：高糖能夠引發(fā)大鼠視網(wǎng)膜Muller細胞發(fā)生凋亡,而rhEPO能呈劑量依賴地抑制高糖引發(fā)的凋亡,其可能是通過上調(diào)大鼠視網(wǎng)膜Muller細胞NF-κB的表達來發(fā)揮保護作用。

【文章頁數(shù)】：34 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第一章 材料與方法
    1.1 實驗動物
    1.2 主要試劑
    1.3 主要儀器
    1.4 主要指標(biāo)及實驗方法
        1.4.1 SD大鼠視網(wǎng)膜混合細胞的原代培養(yǎng)及Muller細胞的提純
        1.4.2 高糖模型的建立和實驗分組
        1.4.3 TUNEL法檢測細胞凋亡
        1.4.4 免疫細胞化學(xué)方法檢測各實驗組NF-κB蛋白表達的變化
    1.5 統(tǒng)計分析
第二章 結(jié)果
    2.1 原代培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜混合細胞的形態(tài)學(xué)觀察
    2.2 Muller細胞的純化培養(yǎng)觀察
    2.3 免疫細胞化學(xué)法鑒定培養(yǎng)細胞
    2.4 高濃度葡萄糖及rhEPO處理對Muller細胞凋亡的影響
    2.5 細胞免疫化學(xué)測定各實驗組NF-κ B蛋白的表達
第三章 討論
    3.1 高糖在DR發(fā)病中的作用
    3.2 rhEPO對視網(wǎng)膜Muller細胞的保護作用
    3.3 NF-κ B在rhEPO抗凋亡中發(fā)揮的作用
    3.4 展望
結(jié)論
參考文獻
附圖
綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
致謝



本文編號：3898056