ROS信號通路調(diào)控NLRP3炎癥小體在自身免疫性葡萄膜炎發(fā)生中的作用
發(fā)布時間:2024-01-26 20:59
目的探討活性氧簇(ROS)信號通路調(diào)控核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體(nucleotide binding and oligomerization domain-like receptor,NLRP3)炎癥小體的表達在自身免疫性葡萄膜炎(autoimmune uveitis,AU)發(fā)生中的作用。方法健康大鼠共40只,隨機分為空白對照組、模型組、空載體轉(zhuǎn)染組(空載體組)和NLRP3-shRNA沉默組(沉默組)各10只;沉默組構(gòu)建慢病毒載體pLenti6.3-EmGFP-NLRP3-shRNA,空載體轉(zhuǎn)染組注射等量空載體,感染時間72 h。結(jié)果 ELISA結(jié)果發(fā)現(xiàn),模型組和空載體組造模成功后10 d、13 d、16 d、19 d的NLRP3、IL-1β和IL-18水平顯著高于沉默組,沉默組高于空白對照組(P<0.05)。免疫組織化學結(jié)果發(fā)現(xiàn),模型組和空載體組12 d和20 d的NLRP3、凋亡相關(guān)斑點樣蛋白(ASC)、pro-Caspase-1、IL-1β和IL-18陽性表達率顯著高于沉默組,沉默組高于空白對照組(P<0.05)。PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn),模型組和空載體組造模成功后12 d...
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 構(gòu)建實驗性AU大鼠模型
1.3 NLRP3沉默技術(shù)
1.4 觀察指標
1.4.1 ELISA法測量所有大鼠房水中NLRP3、IL-1β和IL-18的表達
1.4.2 免疫組織化學法測量所有大鼠視網(wǎng)膜中NLRP3、ASC、pro-Caspase-1、IL-1β和IL-18表達
1.4.3 PCR法測量所有組別大鼠中NLRP3 mRNA水平
1.4.4 Western blot測量各組大鼠NLRP3、ASC、pro-Caspase-1、IL-1β、IL-18、TRX和TXNIP蛋白表達
1.5 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
2.1 模型鑒定
2.2 ELISA檢測結(jié)果
2.3 免疫組織化學檢測結(jié)果
2.4 各組PCR結(jié)果
2.5 Western blot檢測結(jié)果
3 討論
本文編號:3885681
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【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 構(gòu)建實驗性AU大鼠模型
1.3 NLRP3沉默技術(shù)
1.4 觀察指標
1.4.1 ELISA法測量所有大鼠房水中NLRP3、IL-1β和IL-18的表達
1.4.2 免疫組織化學法測量所有大鼠視網(wǎng)膜中NLRP3、ASC、pro-Caspase-1、IL-1β和IL-18表達
1.4.3 PCR法測量所有組別大鼠中NLRP3 mRNA水平
1.4.4 Western blot測量各組大鼠NLRP3、ASC、pro-Caspase-1、IL-1β、IL-18、TRX和TXNIP蛋白表達
1.5 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
2.1 模型鑒定
2.2 ELISA檢測結(jié)果
2.3 免疫組織化學檢測結(jié)果
2.4 各組PCR結(jié)果
2.5 Western blot檢測結(jié)果
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