目的探討活性氧簇(ROS)信號(hào)通路調(diào)控核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體(nucleotide binding and oligomerization domain-like receptor,NLRP3)炎癥小體的表達(dá)在自身免疫性葡萄膜炎(autoimmune uveitis,AU)發(fā)生中的作用。方法健康大鼠共40只,隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、空載體轉(zhuǎn)染組(空載體組)和NLRP3-shRNA沉默組(沉默組)各10只;沉默組構(gòu)建慢病毒載體pLenti6.3-EmGFP-NLRP3-shRNA,空載體轉(zhuǎn)染組注射等量空載體,感染時(shí)間72 h。結(jié)果 ELISA結(jié)果發(fā)現(xiàn),模型組和空載體組造模成功后10 d、13 d、16 d、19 d的NLRP3、IL-1β和IL-18水平顯著高于沉默組,沉默組高于空白對(duì)照組(P<0.05)。免疫組織化學(xué)結(jié)果發(fā)現(xiàn),模型組和空載體組12 d和20 d的NLRP3、凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白(ASC)、pro-Caspase-1、IL-1β和IL-18陽性表達(dá)率顯著高于沉默組,沉默組高于空白對(duì)照組(P<0.05)。PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn),模型組和空載體組造模成功后12 d...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 構(gòu)建實(shí)驗(yàn)性AU大鼠模型
    1.3 NLRP3沉默技術(shù)
    1.4 觀察指標(biāo)
        1.4.1 ELISA法測(cè)量所有大鼠房水中NLRP3、IL-1β和IL-18的表達(dá)
        1.4.2 免疫組織化學(xué)法測(cè)量所有大鼠視網(wǎng)膜中NLRP3、ASC、pro-Caspase-1、IL-1β和IL-18表達(dá)
        1.4.3 PCR法測(cè)量所有組別大鼠中NLRP3 mRNA水平
        1.4.4 Western blot測(cè)量各組大鼠NLRP3、ASC、pro-Caspase-1、IL-1β、IL-18、TRX和TXNIP蛋白表達(dá)
    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 模型鑒定
    2.2 ELISA檢測(cè)結(jié)果
    2.3 免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果
    2.4 各組PCR結(jié)果
    2.5 Western blot檢測(cè)結(jié)果
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