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一種用于內耳siRNA轉染的新型蛋白載體

發(fā)布時間:2024-01-21 11:41
  目的通過體外實驗與脂質載體LipoFiterTM進行對比,驗證小干擾RNA(siRNA)蛋白載體TAT-DRBD載體在耳蝸的轉染效率及安全性。并在卡鉑南美栗鼠內耳損害實驗模型中,通過TAT-TRBD載體攜帶siRNA特異性下調銅轉運蛋白Slc31a1基因的表達,驗證對毛細胞的保護。方法離體條件下,應用TAT-DRBD攜帶Cy3標記的siRNA轉染新生SD大鼠耳蝸基底膜,12小時后激光共聚焦顯微鏡觀察; TAT-DRBD及LipoFiterTM載體轉染新生SD大鼠耳蝸基底膜48小時后計數(shù)毛細胞丟失及損傷情況。南美栗鼠在接受單次腹腔內卡鉑注射前24小時左耳通過TAT-DRBD載體行Slc31a1基因特異性siRNA轉染,右耳為對照,12天后處死并通過行全耳蝸基底膜鋪片計數(shù)毛細胞丟失比例。結果在離體耳蝸器官型培養(yǎng)中,TAT-DRBD可高效轉染Cy3標記的siRNA進入毛細胞,效率幾達100%。新生SD大鼠耳蝸基底膜中段在加入脂質體LipoFiterTM48小時后會導致嚴重的耳基底膜內、外毛細胞損害及纖毛排列紊亂;TAT-DRB...

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