FoxM1在慢性鼻—鼻竇炎中的表達(dá)及炎性因子等對其調(diào)節(jié)的研究
本文關(guān)鍵詞:FoxM1在慢性鼻—鼻竇炎中的表達(dá)及炎性因子等對其調(diào)節(jié)的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:檢測轉(zhuǎn)錄因子叉頭框M1(Forkhead box M1,Fox M1)在慢性鼻-鼻竇炎(Chronic rhinosinusitis,CRS)患者鼻黏膜組織表達(dá)情況及炎性細(xì)胞因子或細(xì)菌毒素對鼻黏膜細(xì)胞Fox M1表達(dá)的影響,以便了解Fox M1在CRS發(fā)病中的作用。方法:取20例不伴息肉CRS患者、20例伴息肉CRS患者和10例單純鼻中隔偏曲患者的鼻黏膜組織行蘇木精-伊紅染色(HE染色),查看各組織病理特點,并行免疫組化、實時熒光定量PCR檢測組織中Fox M1的水平,對所得數(shù)據(jù)之間關(guān)系進(jìn)行統(tǒng)計分析。體外培養(yǎng)人鼻黏膜上皮細(xì)胞,對所培養(yǎng)細(xì)胞運(yùn)用免疫熒光染色法進(jìn)行鑒定,穩(wěn)定傳代后設(shè)立實驗組及空白對照組,實驗組分別給予活化因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-4(IL-4)、白介素-5(IL-5)、白介素-17(IL-17)、干擾素-γ(IFN-γ)、葡萄球菌腸毒素B(SEB)后,應(yīng)用實時定量PCR法、Western Blot法檢測實驗組及空白對照組Fox M1的表達(dá)情況。結(jié)果:HE染色示CRS患者鼻黏膜上皮細(xì)胞及黏膜下腺體增生,黏膜下組織內(nèi)可見大量炎癥細(xì)胞浸潤。免疫組化結(jié)果示兩組CRS患者的鼻黏膜組織中Fox M1的表達(dá)均較對照組升高(P0.05)。兩組CRS患者之間Fox M1的表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。熒光定量PCR結(jié)果顯示兩組CRS患者的鼻黏膜組織中Fox M1 m RNA的表達(dá)均較對照組上調(diào)(P0.05),而兩組CRS之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。建立原代鼻黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)模型,經(jīng)細(xì)胞角蛋白AE1抗體免疫熒光染色證實為上皮源性后進(jìn)一步實驗。對穩(wěn)定傳代的細(xì)胞給予IL-1β、IL-4、IL-5、IL-17、IFN-γ、SEB刺激后,熒光定量PCR及蛋白免疫印跡實驗檢測示Fox M1的基因及蛋白表達(dá)水平均較空白對照組上調(diào),且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:在CRS中Fox M1的表達(dá)上調(diào),且多種細(xì)胞因子及細(xì)菌毒素可誘導(dǎo)鼻黏膜上皮細(xì)胞Fox M1表達(dá)的增多,Fox M1可能參與了CRS的發(fā)病過程,其具體的機(jī)制仍有待進(jìn)一步的研究。
【關(guān)鍵詞】:慢性鼻-鼻竇炎 叉頭框M1 白細(xì)胞介素 葡萄球菌腸毒素B 原代鼻黏膜上皮細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R765.21
【目錄】:
- 摘要3-4
- ABSTRACT4-9
- 第1章 前言9-11
- 第2章 FoxM1 在伴與不伴息肉CRS患者中的表達(dá)情況11-22
- 2.1 材料及方法11-18
- 2.1.1 標(biāo)本的來源與分組11
- 2.1.2 標(biāo)本的采集與處理11-12
- 2.1.3 實驗儀器12
- 2.1.4 實驗試劑12-13
- 2.1.5 溶液配制13-14
- 2.1.6 實驗步驟14-17
- 2.1.7 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析17-18
- 2.2 結(jié)果18-22
- 2.2.1 HE染色18-19
- 2.2.2 免疫組織化學(xué)染色19-20
- 2.2.3 實時熒光定量PCR20-22
- 第3章 原代鼻黏膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)及相關(guān)實驗22-50
- 3.1 材料及方法22-29
- 3.1.1 實驗材料22-25
- 3.1.2 實驗步驟25-29
- 3.1.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析29
- 3.2 結(jié)果29-50
- 3.2.1 原代鼻黏膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng)及鑒定29-30
- 3.2.2 不同活化因子對鼻黏膜上皮細(xì)胞FoxM1 mRNA表達(dá)的影響30-43
- 3.2.3 不同活化因子對鼻黏膜上皮細(xì)胞FoxM1 蛋白表達(dá)的影響43-50
- 第4章 討論50-55
- 4.1 FoxM1 在慢性呼吸道疾病中的相關(guān)研究50-51
- 4.2 炎性細(xì)胞因子、細(xì)菌毒素在CRS發(fā)病機(jī)制中的相關(guān)研究51-55
- 第5章 結(jié)論55-56
- 致謝56-57
- 參考文獻(xiàn)57-60
- 攻讀學(xué)位期間的研究成果60-61
- 綜述61-66
- 參考文獻(xiàn)65-66
【參考文獻(xiàn)】
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