背景:青光眼濾過(guò)性手術(shù)（Glaucoma filtration surgery,GFS）是目前臨床治療青光眼眼壓（intraocular pressure,IOP）控制不佳的有效方法,但術(shù)后結(jié)膜囊瘢痕的發(fā)生常導(dǎo)致手術(shù)失敗。盡管,臨床上5-氟脲嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）、絲裂霉素C（mitomycin C,MMC）能提高了濾過(guò)性手術(shù)的成功率,但仍存在一些嚴(yán)重并發(fā)癥,例如濾過(guò)泡的滲漏、術(shù)后淺前房以及角膜毒性等。因此,尋求一種有效且安全的抗瘢痕藥物仍是目前研究的重點(diǎn)。有文獻(xiàn)指出氧化與抗氧化平衡通過(guò)不同的途徑調(diào)節(jié)TGF-bs誘導(dǎo)的纖維化,并表明氧化應(yīng)激的增加對(duì)纖維化疾病的發(fā)展至關(guān)重要。因此,針對(duì)TGF-bs誘導(dǎo)的和ROS依賴(lài)的細(xì)胞氧化應(yīng)激反應(yīng),可能為纖維化疾病的治療提供新的方法。在前期研究中,本課題組利用指數(shù)式富集的配基系統(tǒng)進(jìn)化（Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment,SELEX）技術(shù),篩選并優(yōu)化出具有靶向TbR II、無(wú)毒性、易化學(xué)修飾的核酸適配子S58。S58阻抑TGF-b2與其受體結(jié)合是否能夠... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

核酸適配子S靶向R的驗(yàn)證

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文18與S之間的結(jié)合。C和DR和S交互區(qū)域，構(gòu)造疊加RGF和S晶體結(jié)構(gòu)。Figure1.DeterminationoftheinteractionbetweenTRIIandS58.A.HydrophobicsurfacepropertybetweenTRIIandS58.B.BindingsequencebetweenTRIIandS58.C,D.TheTRIIandS58interactionregions.1.3.2S58通過(guò)靶向R減少纖維化通過(guò)免疫熒光和流式細(xì)胞儀檢測(cè)技術(shù)發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)ITC-S58孵育后的HConFs比PBS處理的細(xì)胞有更強(qiáng)的綠色熒光信號(hào)，表明S58可以與HConFs表面的受體蛋白結(jié)合（圖2A，B）。此外，通過(guò)轉(zhuǎn)染有意或無(wú)意siRNA-TRII處理HConFs使用S58（20nm）和TGF-2（4ng/ml）72小時(shí)后。WB結(jié)果顯示siRNA-TRII預(yù)處理后，逆轉(zhuǎn)S58降低ɑ-SMA，TRII和p-samd2/3蛋白含量作用。因此,S58通過(guò)向TRII減少HConFs纖維化（如圖2C，D所示）。圖2.S58通過(guò)靶向TRII減少纖維化。A.流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測(cè)FITC-S58靶向TRII作用。B.免疫熒光染色S58靶向TRII受體（細(xì)胞核染色藍(lán)、FITC-S58染色綠）。C.HConFs

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文27表達(dá)在時(shí)間和劑量上呈依賴(lài)性（圖3D，G和I）。然而，MMP-2和MMP-9基因表達(dá)在1h-5h達(dá)到高峰后下降（圖3I）�？寡趸瘧�(yīng)激相關(guān)基因水平隨TGF-2-誘導(dǎo)HConFs的時(shí)間增加而不斷降低（圖3H）。圖3.TGF-2增加HConFs氧化應(yīng)激和誘導(dǎo)纖維化。A.線粒體ROS和B.表示TGF-2處理的細(xì)胞內(nèi)ROS變化。C.細(xì)胞內(nèi)抗氧化蛋白SOD1/2，CAT，γ-GCS和D.在不同TGF-2濃度預(yù)處理24小時(shí)后纖維蛋白α-SMA、纖連蛋白、波形蛋白和collagen-1表達(dá)變化。E.不同濃度TGF-2預(yù)處理HConFs24小時(shí)后，免疫熒光染色圖像顯示α-SMA水平（核=藍(lán)色，α-SMA=綠色）。F.SOD1/2，γ-GCS水平和抗氧化蛋白的水平。G.纖維蛋白質(zhì)α-SMA，纖連蛋白和

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[8]白藜蘆醇對(duì)人眼球筋膜囊成纖維細(xì)胞增殖的影響[D]. 金雋漪.華中科技大學(xué) 2013
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