第一部分時(shí)間依賴性Gjb2基因敲除模式誘導(dǎo)小鼠聽力損傷的機(jī)制研究目的:研究在發(fā)育不同階段敲除耳蝸Connexin26對(duì)小鼠聽力及耳蝸支持細(xì)胞發(fā)育的影響。方法:將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為早期敲除組（P0 KD）、晚期敲除組（P8 KD）和對(duì)應(yīng)的早期對(duì)照組（P0 Control）、晚期對(duì)照組（P8 Control）。運(yùn)用Cx26^flox/flox小鼠與Rosa26-CreER小鼠雜交,構(gòu)建TMX誘導(dǎo)敲除Gjb2基因的Cx26^flox/flox;Rosa26-CreER小鼠。分別在小鼠Corti隧道開放前（P0-P1）及Corti隧道開放后（P8-P9）連續(xù)兩日給予小鼠他莫昔芬（Tamoxifen,TMX）皮下注射,Cx26^flox/flox;Rosa26-CreER作為敲除組,同窩 Cx26^flox/flox小鼠作為對(duì)照組�；啄や伷庖邿晒馊旧癢estern Blot檢測(cè)Cx26敲除情況;在TMX注射后18天ABR檢測(cè)聽閾;樹脂切片檢測(cè)Corti器形態(tài);掃描電鏡檢測(cè)Corti器空間結(jié)構(gòu);透射電鏡檢測(cè)Corti器... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1.時(shí)間特異性Cx26敲除小鼠中耳蝸Cx26敲除情況及Cre陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)

圖 2. ABR 檢測(cè)各組小鼠聽力情況。P0 敲除組出現(xiàn)明顯的全頻聽力損失。在 TMX 注射 18 天后，對(duì)各組小鼠行 ABR 檢測(cè)其聽閾，P0 敲除組表現(xiàn)為明顯的全頻聽力損失。

35圖 3. 僅在 Cx26 早期敲除組小鼠中出現(xiàn)明顯的 Corti 器發(fā)育停滯。（A,B）分別顯示 P0 及 P8 敲除組耳蝸切片的大體情況。（C-E）分別顯示對(duì)照組小鼠頂中底回 Corti 器形態(tài)，圖 D 中紅線指示柱細(xì)胞連接頭板與基底膜間的長(zhǎng)度，藍(lán)線指示第三排外毛細(xì)胞頂部至基底膜的長(zhǎng)度。（F-H）分別顯示 P0 敲除組頂中底回 Corti器形態(tài)，黑色箭頭指示未開放的 Corti 隧道。（I-K）分別顯示 P8 敲除組頂中底回 Corti器形態(tài)。（L-N）分別顯示 P8 對(duì)照組頂中底回 Corti 器形態(tài)。（O）基底膜鋪片測(cè)量各組柱細(xì)胞核間距離。（P）顯示各組中柱細(xì)胞頭板及第三排毛細(xì)胞頂部至基底膜的相對(duì)距離。（Q）顯示各組中內(nèi)外柱細(xì)胞細(xì)胞核之間的相對(duì)距離。


本文編號(hào)：3449078