目的:1.研究以Behcet病、VKH綜合征為代表的自身免疫性葡萄膜炎患者外周血中Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá),及其在疾病的活動(dòng)期、靜止期的表達(dá)特征;2.研究實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）大鼠模型中Th17細(xì)胞、Treg細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子在不同病程中的動(dòng)態(tài)表達(dá),并分析Th17/Treg表達(dá)失衡與EAU發(fā)病的關(guān)系。方法:1.收集活動(dòng)期和靜止期的Behcet病、VKH綜合征患者及健康人外周靜脈血4ml,采用流式細(xì)胞儀檢測Th17、Treg細(xì)胞的比例變化;ELISA檢測血清中IL-17、IL-6、IL-10、TGF-β細(xì)胞因子的濃度變化;2.在6-8周齡Lewis大鼠兩足底、腹壁兩側(cè)和脊背中央5點(diǎn)皮下注射用光感受器間維生素A類結(jié)合蛋白（IRBP1177-1191）、完全弗氏佐劑（CFA）和結(jié)合菌素（TB）充分混勻的乳糜液共300ul構(gòu)建EAU大鼠模型。免疫后每天用Genesis-D眼部照相機(jī)觀察大鼠眼部炎癥變化,并進(jìn)行臨床評分;分別于免疫后9、13、18、23天摘取大鼠眼球做HE病理染色,比較大鼠眼組織病理學(xué)差異;分別于免疫后9、13、18、23、28、35、48天處死... 

【文章來源】：山東中醫(yī)藥大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
提要
ABSTRACT
引言
第一部分 Th17/Treg細(xì)胞及相關(guān)炎性因子在葡萄膜炎患者發(fā)病過程中的動(dòng)態(tài)表達(dá)
    引言
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 研究對象
        1.2 試劑
        1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2 方法
        2.1 樣本收集
        2.2 單核細(xì)胞（PBMC）的分離
        2.3 流式細(xì)胞儀檢測
        2.4 ELISA檢測
        2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 外周血Th17、Treg細(xì)胞表達(dá)
        3.2 血清中IL-17、IL-6、Foxp3和TGF-β的表達(dá)
    討論
    小結(jié)
第二部分 EAU大鼠模型建立及病程觀察
    引言
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 試劑
        1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2 方法
        2.1 EAU模型建立
        2.2 EAU大鼠眼部炎癥觀察
        2.3 組織病理學(xué)檢查
        2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 EAU大鼠眼部炎癥表現(xiàn)
        3.2 病理分析
    討論
    小結(jié)
第三部分 EAU大鼠淋巴結(jié)、脾臟Th17/Treg細(xì)胞及相關(guān)因子表達(dá)的動(dòng)態(tài)研究
    引言
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 試劑
        1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2 方法
        2.1 EAU模型建立
        2.2 單細(xì)胞懸液制備
        2.3 分離純化T淋巴細(xì)胞
        2.4 流式細(xì)胞儀檢測
        2.5 ELISA檢測
        2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測
        2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 Th17、Treg細(xì)胞表達(dá)
        3.2 IL-17、IL-6、IL-10和TGF-β的表達(dá)
        3.3 IL-17、IL-6、Foxp3和TGF-β mRNA表達(dá)
    討論
    小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
論文著作



本文編號：3416756