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自身免疫性葡萄膜炎發(fā)病過程中Th17/Treg細胞及其相關(guān)炎性因子的動態(tài)表達研究

發(fā)布時間:2021-09-30 22:32
  目的:1.研究以Behcet病、VKH綜合征為代表的自身免疫性葡萄膜炎患者外周血中Th17細胞、Treg細胞及相關(guān)細胞因子的表達,及其在疾病的活動期、靜止期的表達特征;2.研究實驗性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)大鼠模型中Th17細胞、Treg細胞及相關(guān)細胞因子在不同病程中的動態(tài)表達,并分析Th17/Treg表達失衡與EAU發(fā)病的關(guān)系。方法:1.收集活動期和靜止期的Behcet病、VKH綜合征患者及健康人外周靜脈血4ml,采用流式細胞儀檢測Th17、Treg細胞的比例變化;ELISA檢測血清中IL-17、IL-6、IL-10、TGF-β細胞因子的濃度變化;2.在6-8周齡Lewis大鼠兩足底、腹壁兩側(cè)和脊背中央5點皮下注射用光感受器間維生素A類結(jié)合蛋白(IRBP1177-1191)、完全弗氏佐劑(CFA)和結(jié)合菌素(TB)充分混勻的乳糜液共300ul構(gòu)建EAU大鼠模型。免疫后每天用Genesis-D眼部照相機觀察大鼠眼部炎癥變化,并進行臨床評分;分別于免疫后9、13、18、23天摘取大鼠眼球做HE病理染色,比較大鼠眼組織病理學差異;分別于免疫后9、13、18、23、28、35、48天處死... 

【文章來源】:山東中醫(yī)藥大學山東省

【文章頁數(shù)】:81 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
提要
ABSTRACT
引言
第一部分 Th17/Treg細胞及相關(guān)炎性因子在葡萄膜炎患者發(fā)病過程中的動態(tài)表達
    引言
    1 實驗材料
        1.1 研究對象
        1.2 試劑
        1.3 主要實驗儀器
    2 方法
        2.1 樣本收集
        2.2 單核細胞(PBMC)的分離
        2.3 流式細胞儀檢測
        2.4 ELISA檢測
        2.5 統(tǒng)計學分析
    3 結(jié)果
        3.1 外周血Th17、Treg細胞表達
        3.2 血清中IL-17、IL-6、Foxp3和TGF-β的表達
    討論
    小結(jié)
第二部分 EAU大鼠模型建立及病程觀察
    引言
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 試劑
        1.3 主要實驗儀器
    2 方法
        2.1 EAU模型建立
        2.2 EAU大鼠眼部炎癥觀察
        2.3 組織病理學檢查
        2.4 統(tǒng)計學分析
    3 結(jié)果
        3.1 EAU大鼠眼部炎癥表現(xiàn)
        3.2 病理分析
    討論
    小結(jié)
第三部分 EAU大鼠淋巴結(jié)、脾臟Th17/Treg細胞及相關(guān)因子表達的動態(tài)研究
    引言
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 試劑
        1.3 主要實驗儀器
    2 方法
        2.1 EAU模型建立
        2.2 單細胞懸液制備
        2.3 分離純化T淋巴細胞
        2.4 流式細胞儀檢測
        2.5 ELISA檢測
        2.6 實時熒光定量PCR檢測
        2.7 統(tǒng)計學分析
    3 結(jié)果
        3.1 Th17、Treg細胞表達
        3.2 IL-17、IL-6、IL-10和TGF-β的表達
        3.3 IL-17、IL-6、Foxp3和TGF-β mRNA表達
    討論
    小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝
論文著作



本文編號:3416756

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