目的建立ARPE-19細胞缺氧模型,探討缺氧條件下視網(wǎng)膜色素上皮細胞（retina pigment epithelium, RPE） MEK/ERK信號傳導通路與細胞問緊密連接蛋白的改變,以及影響緊密連接的血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）的變化。方法ARPE-19細胞復蘇后取對數(shù)生長期細胞,利用化學制劑二氯化鈷（CoCl2）誘導其缺氧模型。將細胞培養(yǎng)于60×15mm細胞培養(yǎng)皿中,取6份細胞隨機均分為缺氧組和正常對照組,缺氧組培養(yǎng)基中加入濃度為200μM的二氯化鉆（CoCl2）,而正常對照組中加入等量的二甲基亞砜（DMSO）。3小時后利用Western Blot檢測各組細胞中缺氧誘導因子（hypoxia-inducible factor-1a, HIF-1α）以明確細胞缺氧情況,之后以Western Blot檢測在缺氧環(huán)境下ARPE細胞中p-ERK/t-ERK的隨時間變化曲線（每間隔0.5小時檢測一次,共3小時）,24小時檢測細胞間緊密連接蛋白之一的密封蛋白（occludin）的變化,并于3,6,12,24小時利用ELI... 

【文章來源】：中南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文對照
前言
第一章 缺氧條件下ARPE-19細胞中MEK/ERK信號傳導通路與細胞間緊密連接蛋白的變化
    1.1 材料與方法
    1.2 結(jié)果
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
第二章 阻斷MEK/ERK信號傳導通路對缺氧條件下ARPE-19細胞間緊密連接的保護作用
    2.1 材料與方法
    2.2 結(jié)果
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 阻斷MEK/ERK信號傳導通路對OIR小鼠模型中外層血-視網(wǎng)膜屏障的保護作用
    3.1 材料與方法
    3.2 結(jié)果
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
攻讀學位期間的主要研究成果


【參考文獻】：
期刊論文
[1]p38MAPKs在細胞周期調(diào)控中的作用[J]. 陳奕,繆澤鴻,丁健.  生理科學進展. 2004(04)



本文編號：3355956