C57BL/6J小鼠耳蝸內(nèi)外毛細(xì)胞胞吞功能的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2021-08-02 04:17
研究背景和目的:感音神經(jīng)性耳聾是臨床上導(dǎo)致言語(yǔ)交流障礙的一種常見(jiàn)疾病,嚴(yán)重了影響人們?nèi)粘I钯|(zhì)量,目前在臨床上治療感音神經(jīng)性耳聾的方法有很多,但是治療效果不盡人意,因此尋找耳蝸聽(tīng)力形成與維持的分子機(jī)制,成為未來(lái)感音神經(jīng)性耳聾治療新的方向。聽(tīng)覺(jué)的產(chǎn)生和維持依賴(lài)于耳蝸內(nèi)毛細(xì)胞(Inner hair cell,IHC)帶狀突觸部(Ribbon Synapse,RS)釋放神經(jīng)遞質(zhì),由此完成機(jī)械一電換能作用。作為聽(tīng)覺(jué)傳入神經(jīng)第一級(jí)神經(jīng)突觸,耳蝸感受器感受到的聲音信號(hào)是靠IHC及其突觸完成的,IHC突觸能夠精確快速地傳遞神經(jīng)遞質(zhì),需要正常有效的神經(jīng)遞質(zhì)循環(huán)機(jī)制,即囊泡的胞吐活動(dòng)和胞吞活動(dòng)。突觸囊泡循環(huán)是聽(tīng)覺(jué)神經(jīng)遞質(zhì)持續(xù)釋放的基礎(chǔ),而突觸囊泡精確快速的內(nèi)吞作用則是突觸囊泡信息持續(xù)傳遞不被耗竭的重要保障;本研究探討體外培養(yǎng)的乳鼠耳蝸IHC的有無(wú)胞吞功能。通過(guò)對(duì)成熟小鼠耳蝸IHC和外毛細(xì)胞(Outer hair cell,OHC)的胞吞進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察和比較,以探討成熟小鼠IHC和OHC胞吞功能與動(dòng)物聽(tīng)功能之間的關(guān)系,為以后深入探討耳蝸毛細(xì)胞在聽(tīng)力形成和維持的重要生理機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),為感音神經(jīng)性耳聾新的治...
【文章來(lái)源】:川北醫(yī)學(xué)院四川省
【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
小鼠耳蝸組織解剖取材過(guò)程
外培養(yǎng)5天后,在倒置顯微鏡下觀察培養(yǎng)BM組織與鼠尾膠原膠粒貼附良好,BM完整,形態(tài)結(jié)構(gòu)清晰,IHC生長(zhǎng)良好,OHC在體外培養(yǎng)過(guò)程中由于有BM外側(cè)的成纖維細(xì)胞生長(zhǎng),部分BM生長(zhǎng)稍松散,但生長(zhǎng)正常(圖2)。圖2 為倒置顯微鏡下觀察經(jīng)過(guò)5天培養(yǎng)的C57BL/6J小鼠耳蝸BM,組織貼附良好,形態(tài)結(jié)構(gòu)清晰,IHC和OHC細(xì)胞存活良好(Bar=30um)。3.2 不同時(shí)間點(diǎn)耳蝸BM體外培養(yǎng)情況觀測(cè)體外培養(yǎng)的BM組織經(jīng)TRITC-phalloidin染色纖毛后觀察耳蝸BM生長(zhǎng)情況,離體小鼠耳蝸BM培養(yǎng)第1天后生長(zhǎng)良好,毛細(xì)胞區(qū)域內(nèi)的細(xì)胞排列緊密,結(jié)構(gòu)清晰,IHC和OHC均存活良好,纖毛排列良好(圖3A)。離體小鼠耳蝸BM培養(yǎng)第3天后生長(zhǎng)良好,IHC和OHC結(jié)構(gòu)緊密,無(wú)松散,IHC和OHC未見(jiàn)纖毛倒伏(圖3B)。離體小鼠耳蝸BM培養(yǎng)第5天后生長(zhǎng)良好
11圖3 不同天數(shù)體外培養(yǎng)的毛細(xì)胞生長(zhǎng)情況注:圖A:離體培養(yǎng)1天的乳鼠BM,TRITC-phalloidin染色,IHC和OHC排列緊密,結(jié)構(gòu)清晰,無(wú)松散,纖毛排列規(guī)則(bar=20μm )。圖B:離體培養(yǎng)3天的乳鼠BM,TRITC-phalloidin染色,IHC和OHC排列仍緊密,結(jié)構(gòu)無(wú)松散,纖毛及表皮板結(jié)構(gòu)基本完整(bar=20μm )。圖C:離體培養(yǎng)5天的乳鼠BM
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]小鼠耳蝸神經(jīng)及其與內(nèi)毛細(xì)胞突觸后谷氨酸受體發(fā)育的特點(diǎn)[J]. 楊華,甘霖,陳曉巍,高志強(qiáng). 協(xié)和醫(yī)學(xué)雜志. 2012(02)
[2]應(yīng)用三維建模方法定量分析C57BL/6J小鼠耳蝸內(nèi)毛細(xì)胞帶狀突觸的數(shù)量[J]. 柳柯,李姝娜,姜學(xué)鈞. 中國(guó)科學(xué)(C輯:生命科學(xué)). 2009(02)
[3]小鼠耳蝸的形態(tài)學(xué)發(fā)育過(guò)程[J]. 李春暉,杜波,丁大連,杜寶東. 解剖科學(xué)進(jìn)展. 2008(02)
本文編號(hào):3316874
【文章來(lái)源】:川北醫(yī)學(xué)院四川省
【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
小鼠耳蝸組織解剖取材過(guò)程
外培養(yǎng)5天后,在倒置顯微鏡下觀察培養(yǎng)BM組織與鼠尾膠原膠粒貼附良好,BM完整,形態(tài)結(jié)構(gòu)清晰,IHC生長(zhǎng)良好,OHC在體外培養(yǎng)過(guò)程中由于有BM外側(cè)的成纖維細(xì)胞生長(zhǎng),部分BM生長(zhǎng)稍松散,但生長(zhǎng)正常(圖2)。圖2 為倒置顯微鏡下觀察經(jīng)過(guò)5天培養(yǎng)的C57BL/6J小鼠耳蝸BM,組織貼附良好,形態(tài)結(jié)構(gòu)清晰,IHC和OHC細(xì)胞存活良好(Bar=30um)。3.2 不同時(shí)間點(diǎn)耳蝸BM體外培養(yǎng)情況觀測(cè)體外培養(yǎng)的BM組織經(jīng)TRITC-phalloidin染色纖毛后觀察耳蝸BM生長(zhǎng)情況,離體小鼠耳蝸BM培養(yǎng)第1天后生長(zhǎng)良好,毛細(xì)胞區(qū)域內(nèi)的細(xì)胞排列緊密,結(jié)構(gòu)清晰,IHC和OHC均存活良好,纖毛排列良好(圖3A)。離體小鼠耳蝸BM培養(yǎng)第3天后生長(zhǎng)良好,IHC和OHC結(jié)構(gòu)緊密,無(wú)松散,IHC和OHC未見(jiàn)纖毛倒伏(圖3B)。離體小鼠耳蝸BM培養(yǎng)第5天后生長(zhǎng)良好
11圖3 不同天數(shù)體外培養(yǎng)的毛細(xì)胞生長(zhǎng)情況注:圖A:離體培養(yǎng)1天的乳鼠BM,TRITC-phalloidin染色,IHC和OHC排列緊密,結(jié)構(gòu)清晰,無(wú)松散,纖毛排列規(guī)則(bar=20μm )。圖B:離體培養(yǎng)3天的乳鼠BM,TRITC-phalloidin染色,IHC和OHC排列仍緊密,結(jié)構(gòu)無(wú)松散,纖毛及表皮板結(jié)構(gòu)基本完整(bar=20μm )。圖C:離體培養(yǎng)5天的乳鼠BM
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]小鼠耳蝸神經(jīng)及其與內(nèi)毛細(xì)胞突觸后谷氨酸受體發(fā)育的特點(diǎn)[J]. 楊華,甘霖,陳曉巍,高志強(qiáng). 協(xié)和醫(yī)學(xué)雜志. 2012(02)
[2]應(yīng)用三維建模方法定量分析C57BL/6J小鼠耳蝸內(nèi)毛細(xì)胞帶狀突觸的數(shù)量[J]. 柳柯,李姝娜,姜學(xué)鈞. 中國(guó)科學(xué)(C輯:生命科學(xué)). 2009(02)
[3]小鼠耳蝸的形態(tài)學(xué)發(fā)育過(guò)程[J]. 李春暉,杜波,丁大連,杜寶東. 解剖科學(xué)進(jìn)展. 2008(02)
本文編號(hào):3316874
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