Bevacizumab對人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞纖維化相關(guān)炎癥因子表達(dá)的影響
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【摘要】:目的:觀察抗新生血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)制劑在正常氧含量和低氧兩種不同條件下對體外培養(yǎng)的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞纖維化相關(guān)炎癥因子表達(dá)水平的影響,以探討抗VEGF治療后新生血管纖維化的發(fā)生機(jī)制。方法:分別在正常氧含量及低氧條件下培養(yǎng)ARPE-19細(xì)胞,采用化學(xué)誘導(dǎo)法(Co Cl2)模擬體內(nèi)低氧環(huán)境(終濃度200μmol/L)。將ARPE-19細(xì)胞分為4組:①正常對照組:細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)。②貝伐單抗組:培養(yǎng)基中加入貝伐單抗,終濃度為0.25 mg/ml。③低氧組:培養(yǎng)基中加入終濃度為200μmol/L的Co Cl2。④低氧+貝伐單抗組:用0.25mg/ml貝伐單抗及200μmol/L Co Cl2培養(yǎng)液,然后在不同時(shí)間點(diǎn)(6h、12h、24h、48h)收集細(xì)胞或上清,分別用RT-PCR法及ELISA方法檢測不同條件下、不同時(shí)間點(diǎn)纖維化相關(guān)炎癥因子白介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-8(interleukin-8,IL-8)以及腫瘤壞死因子-α(tumer necrosis factor-alpha,TNF-α)基因和蛋白的表達(dá)。結(jié)果:貝伐單抗組與正常對照組比較IL-1β、IL-6及IL-8基因和蛋白的表達(dá)在4個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)均明顯上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而TNF-α基因和蛋白的表達(dá)僅在24h及48h明顯上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);貝伐單抗+低氧組與低氧組比較IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α基因和蛋白的表達(dá)在4個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)均明顯上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。貝伐單抗作用后IL-1β、IL-8、TNF-α在24h時(shí)表達(dá)量最高,與其它各時(shí)間點(diǎn)比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。IL-6在12h時(shí)表達(dá)量最高,與其它各時(shí)間點(diǎn)比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:無論是正常氧含量還是低氧條件下貝伐單抗均上調(diào)了纖維化相關(guān)炎癥因子的表達(dá)水平,炎癥因子可能參與了抗VEGF治療后的新生血管纖維化過程,抗VEGF藥物引起的某些炎癥因子的表達(dá)上調(diào)可能促進(jìn)了纖維化的發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】:貝伐單抗 纖維化 ARPE-19細(xì)胞 炎癥因子
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R774.1
【目錄】:
- 摘要2-3
- Abstract3-5
- 引言5-7
- 第一章 實(shí)驗(yàn)材料和方法7-16
- 1.1 實(shí)驗(yàn)材料7-9
- 1.2 實(shí)驗(yàn)方法9-16
- 第二章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果16-23
- 2.1 細(xì)胞培養(yǎng)16
- 2.2 RealtimePCR檢測各炎癥因子mRNA的表達(dá)16-19
- 2.3 ELISA檢測各種炎癥因子蛋白的表達(dá)19-23
- 第三章 討論23-25
- 第四章 結(jié)論25-26
- 參考文獻(xiàn)26-29
- 綜述29-43
- 參考文獻(xiàn)36-43
- 攻讀學(xué)位期間的研究成果43-44
- 致謝44-45
【共引文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:Bevacizumab對人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞纖維化相關(guān)炎癥因子表達(dá)的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:327044
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