目的:探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞玻璃體腔移植對大鼠青光眼模型的神經(jīng)保護(hù)作用。方法:提取大鼠原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞并進(jìn)行鑒定;Lewis大鼠分別隨機(jī)分為3組:對照組、青光眼模型組和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組,并制作青光眼大鼠模型:左眼為實(shí)驗(yàn)眼（青光眼）,右眼為對照眼,并進(jìn)行鑒定;然后進(jìn)行骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞玻璃體腔移植;HE染色觀察視網(wǎng)膜組織形態(tài);免疫熒光法檢測視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)量;TUNEL染色觀察視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡情況;Western blot檢測視網(wǎng)膜組織中IGF1和BDNF蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:大鼠實(shí)驗(yàn)眼的眼內(nèi)壓均明顯高于對照眼（P<0.01）,表明青光眼大鼠模型均建造成功;青光眼模型組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維排列不整齊,視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)量和視網(wǎng)膜厚度顯著低于對照組（P<0.01）,視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡數(shù)量顯著高于對照組（P<0.001）;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維細(xì)胞排列較整齊,視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)量和視網(wǎng)膜厚度明顯高于青光眼模型組（P<0.05）,視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡數(shù)量明顯低于青光眼模型組（P<0.05）;青光眼模型組大鼠視網(wǎng)膜中IGF1和BDNF蛋白表達(dá)量明... 

【文章來源】：國際眼科雜志. 2020,20(11)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

Western blot檢測各組大鼠視網(wǎng)膜中IGF1和BDNF蛋白變化

視網(wǎng)膜組織經(jīng)固定、OCT包埋,并制作成6μm厚的冰凍切片。切片滴加蛋白酶K工作液(20μg/mL),37℃溫育10～30min,PBS清洗3次。接著切片在4%的多聚甲醛溶液中室溫固定5min,PBS清洗3次。然后切片上滴加DNse I反應(yīng)液,37℃溫育30min,PBS清洗3次。用吸水紙小心吸去樣本區(qū)域周圍的多余液體,滴加TdT酶反應(yīng)液于樣本區(qū)域上,于37℃濕盒中孵育60min(避光),PBS清洗3次。用吸水紙小心吸去樣本周圍的液體,每個(gè)樣本上滴加Streptavidin-Fluorescein標(biāo)記液,放入溫盒中,37℃反應(yīng)30min(避光),PBS清洗3次。最后DAPI染色液復(fù)染細(xì)胞核,室溫避光反應(yīng)10min,PBS洗滌,加適量封片劑,熒光顯微鏡觀察并拍照。圖2 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外分化

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外分化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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