目的感音神經(jīng)性聾是耳科學領(lǐng)域難點及熱點問題。內(nèi)耳螺旋神經(jīng)元（spiral ganglion neurons,SGNs）的凋亡是導致感音神經(jīng)性聾的主要因素之一,促紅細胞生成素（erythropoietin,EPO）被認為在腦、脊髓等中樞神經(jīng)系統(tǒng)廣泛表達并具有神經(jīng)保護作用,但在大鼠內(nèi)耳是否表達,以及對內(nèi)耳SGNs是否具有神經(jīng)保護作用則不清楚。探討EPO在大鼠內(nèi)耳螺旋神經(jīng)元興奮毒性損傷中的作用及相關(guān)機制,為SGNs的興奮毒性損傷保護提供新的理論。材料與方法1、通過免疫組織化學、熒光激光共聚焦掃描熒光顯微鏡技術(shù)明確EPO在內(nèi)耳中有無表達情況。2、分離大鼠耳蝸及體外培養(yǎng)SGNs并鑒定。3、采用不同濃度谷氨酸（0,10,25,50,75,100μmol/L）分別作用于培養(yǎng)48小時的螺旋神經(jīng)元,MTT、TUNEL法分別檢測SGNs的細胞活力、細胞凋亡。4.構(gòu)建重組腺病毒載體Ad-EPO并轉(zhuǎn)染到體外培養(yǎng)的SGNs,選擇0,20,50,100,150,250PFU的不同感染復數(shù)（MOI）及24h,48h和72h的不同感染時長,通過報告基因綠色熒光蛋白（GFP）表達檢測感染率,確定最佳感染倍數(shù)和病毒表達時... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學重慶市

【文章頁數(shù)】：168 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
英文摘要
中文摘要
第一章 前言
第二章 EPO與EPO-R在大鼠內(nèi)耳的表達
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗方法
    2.3 結(jié)果
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 螺旋神經(jīng)元培養(yǎng)及體外興奮毒性損傷模型構(gòu)建
    3.1 實驗材料
    3.2 實驗方法
    3.3 結(jié)果
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第四章 EPO對螺旋神經(jīng)元興奮毒性損傷影響的實驗研究
    4.1 EPO重組腺病毒載體對螺旋神經(jīng)元興奮毒性損傷作用的影響
        4.1.1 實驗材料
        4.1.2 實驗方法
        4.1.3 結(jié)果
        4.1.4 小結(jié)
    4.2 EPO特異性sh RNA對螺旋神經(jīng)元興奮毒性損傷作用的影響
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 實驗方法
        4.2.3 結(jié)果
        4.2.4 小結(jié)
    4.3 討論
    4.4 總結(jié)
第五章 EPO對螺旋神經(jīng)元興奮毒性損傷影響的分子機理初步研究
    5.1 實驗材料
    5.2 實驗方法
    5.3 結(jié)果
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻
文獻綜述 促紅細胞生成素在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)保護作用及分子機制
    參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元原代培養(yǎng)及其免疫細胞化學鑒定[J]. 孫建軍.  中華耳鼻咽喉科雜志. 1998(04)
[2]神經(jīng)組織的體外培養(yǎng)方法[J]. 薛慶善,馮武鳴.  解剖科學進展. 1996(04)



本文編號：3205939