研究目的探究miRNA-451對(duì)RF/6A視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移及管腔形成能力等生物學(xué)特征的影響及其可能的機(jī)制,為增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變的治療提供理論基礎(chǔ)。方法1.利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將miRNA-451的類似物（mimic）和抑制劑（inhibitor）轉(zhuǎn)染進(jìn)RF/6A細(xì)胞中,測(cè)定轉(zhuǎn)染效率。2.將RF/6A細(xì)胞分為四個(gè)組:miRNA-451 mimic組、miRNA-451 mimic control（類似物對(duì)照）組、miRNA-451 inhibitor組、miRNA-451 inhibitor control（抑制劑對(duì)照）組,利用CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖能力,細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力,Matrigel管腔形成實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞形成管腔的能力。RT-PCR檢測(cè)與生物學(xué)行為相關(guān)基因的表達(dá)情況。3.以miRNA-451為研究對(duì)象,利用mi RBase、mi Randa、Target Scan、Pic Tar等數(shù)據(jù)庫對(duì)miRNA-451的作用靶點(diǎn)進(jìn)行生物信息學(xué)分析,為實(shí)驗(yàn)提供理論指導(dǎo)和依據(jù)。4.利用SPSS 19.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。組間的兩兩比較... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

RF/6A細(xì)胞正常形態(tài)（標(biāo)尺200um）

圖 1. RF/6A 細(xì)胞正常形態(tài) （標(biāo)尺 200um）1.2.2 轉(zhuǎn)染效率檢測(cè)結(jié)果6h 后觀察，各個(gè)濃度的 miRNA 均可將在藍(lán)光的激發(fā)下發(fā)出綠色熒光，且轉(zhuǎn)染效率較高。比較各個(gè)濃度的熒光結(jié)果發(fā)現(xiàn)，miRNA-451 mimic 組在 20uM 時(shí)即有較高的轉(zhuǎn)染效率，inhibitor 組在 80uM 的轉(zhuǎn)染效率較高（圖 2）。

1.2.3 CCK-8 細(xì)胞增殖結(jié)果結(jié)果發(fā)現(xiàn)，利用 CCK-8 檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力，mimic 組與 mimic control 組相比較，24h 時(shí)，mimic 組（1.049±0.020）較 mimic control 組（1.258±0.034）低，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（F=0.413，P=0.000）。48h 時(shí) mimic 組（1.223±0.077）較 mimiccontrol 組（1.400±0.037）低，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（F=2.401，P=0.002）。inhibitor組與 inhibitor control 組相比較，24h 時(shí)，兩組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），48h時(shí)，inhibitor 組（1.748±0.023）較 inhibitor control 組（1.689±0.421）高，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（F=1.407，P=0.000）。（圖 3）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]MicroRNA: a new and promising potential biomarker for diagnosis and prognosis of ovarian cancer[J]. Manish K.Pal,Shyam P.Jaiswar,Vinaya N.Dwivedi,Amit K.Tripathi,Ashish Dwivedi,Pushplata Sankhwar.  Cancer Biology & Medicine. 2015(04)
[2]Implication of platelet-derived growth factor receptor alpha in prostate cancer skeletal metastasis[J]. Danielle Jernigan,Alessandro Fatatis.  癌癥. 2011(09)



本文編號(hào)：3073968