目的:探討miR-19b-3p是否通過靶向調(diào)控富含亮氨酸重復(fù)和免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域（LRIG1）表達(dá)從而對喉癌細(xì)胞凋亡及放射敏感性的影響。方法:喉癌Hep2細(xì)胞分為anti-miR-19b-3p組、anti-miR-NC組、pcDNA-LRIG1組、pcDNA組、anti-miR-19b-3p+si-LRIG1組、anti-miR-19b-3p+si-NC組、miR-19b-3p組、miR-NC組。實時熒光定量PCR（qRT-PCR）與蛋白免疫印跡（Western blot）分別檢測miR-19b-3p、LRIG1表達(dá)水平;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞凋亡率。采用克隆形成實驗檢測各組細(xì)胞的放射敏感性。雙熒光素酶報告基因?qū)嶒烌炞CLRIG1是否為miR-19b-3p的靶基因;Western blot檢測細(xì)胞中Bcl-2、Bax、cleaved-caspase3的表達(dá)。結(jié)果:miR-19b-3p在喉癌組織及細(xì)胞系中表達(dá)水平顯著升高,而LRIG1表達(dá)水平顯著降低;轉(zhuǎn)染anti-miR-19b-3p或pcDNA-LRIG1后可顯著增強(qiáng)喉癌細(xì)胞凋亡能力并降低細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)從而增強(qiáng)細(xì)胞的放射敏感性,促進(jìn)B... 

【文章來源】：中國免疫學(xué)雜志. 2020,36(12)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

miR-19b-3p和LRIG1在喉癌組織中的表達(dá)

Western blot實驗檢測LRIG1過表達(dá)轉(zhuǎn)染效果,如圖4A所示,pcDNA-LRIG1組喉癌Hep2細(xì)胞中LRIG1的蛋白表達(dá)水平較pcDNA組顯著升高(P<0.05),提示轉(zhuǎn)染成功。pcDNA-LRIG1組喉癌Hep2細(xì)胞凋亡率相較于pcDNA組顯著升高(P<0.05),明顯促進(jìn)Bax表達(dá)(P<0.05),而抑制Bcl-2表達(dá)(P<0.05),進(jìn)一步用不同劑量X線照射結(jié)果顯示,與pcDNA組相比,pcDNA-LRIG1組喉癌Hep2細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)明顯降低(P<0.05),細(xì)胞增敏比(SER)為1.788,見圖4、表2。表明LRIG1過表達(dá)可能通過促進(jìn)喉癌Hep2細(xì)胞凋亡進(jìn)而增強(qiáng)放射敏感性。圖3 抑制miR-19b-3p表達(dá)對喉癌Hep2細(xì)胞放射敏感性的影響

抑制miR-19b-3p表達(dá)對喉癌Hep2細(xì)胞放射敏感性的影響


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