雌二醇通過激活SIRT1/P53通路對人晶狀體上皮細胞抗凋亡作用研究
發(fā)布時間：2021-02-27 00:37
目的探究雌二醇（estradiol,E2）對H2O2誘導的人晶狀體上皮細胞（HLE-B3細胞）氧化損傷的保護作用及抗凋亡機制。方法不同濃度H2O2作用于HLE-B3細胞,探索最佳濃度。將HLE-B3細胞隨機分成5組:空白對照組,模型組(100μmol·L-1 H2O2),低、中、高濃度E2組(100μmol·L-1 H2O2+0.01μmol·L-1、0.10μmol·L-1、1.00μmol·L-1 E2),觀察各組細胞形態(tài)變化。采用CCK-8和流式細胞學檢測細胞的增殖與凋亡,觀察不同濃度的E2對HLE-B3細胞的影響。RT-qPCR檢測沉默信息調(diào)節(jié)因子1（silent information ...
【文章來源】：眼科新進展. 2020,40(05)北大核心
【文章頁數(shù)】：5 頁
【部分圖文】：
光學顯微鏡觀察各組HLE-B3細胞形態(tài)的變化
P53(灰度比)在空白對照組(0.394)表達低于模型組(0.705)和其他各組(均為P<0.05),組間P53表達兩兩比較結(jié)果顯示,模型組與各濃度E2組(低濃度E2組灰度比0.718,中濃度E2組灰度比0.710,高濃度E2組灰度比0.705)差異均無統(tǒng)計學意義(均為P>0.05)。見圖2。2.6 免疫熒光染色檢測SIRT1表達與定位
共聚焦顯微鏡下觀察E2對HLE-B3細胞中SIRT1免疫熒光的影響,特異性抗體與SIRT1結(jié)合后,在熒光顯微鏡下觀察可呈現(xiàn)綠色熒光(見圖3),熒光染色著染細胞核,SIRT1分布于HLE-B3細胞的細胞核上,空白對照組(429.30±80.66)熒光強度較模型組(1776.53±285.48)弱(P<0.05);組間兩兩比較,模型組<低濃度E2組(2541.10±489.43)<中濃度E2組(3400.25±645.86)<高濃度E2組(8442.82±1059.35)(均為P<0.05)。3 討論
本文編號：3053411
【文章來源】：眼科新進展. 2020,40(05)北大核心
【文章頁數(shù)】：5 頁
【部分圖文】：
光學顯微鏡觀察各組HLE-B3細胞形態(tài)的變化
P53(灰度比)在空白對照組(0.394)表達低于模型組(0.705)和其他各組(均為P<0.05),組間P53表達兩兩比較結(jié)果顯示,模型組與各濃度E2組(低濃度E2組灰度比0.718,中濃度E2組灰度比0.710,高濃度E2組灰度比0.705)差異均無統(tǒng)計學意義(均為P>0.05)。見圖2。2.6 免疫熒光染色檢測SIRT1表達與定位
共聚焦顯微鏡下觀察E2對HLE-B3細胞中SIRT1免疫熒光的影響,特異性抗體與SIRT1結(jié)合后,在熒光顯微鏡下觀察可呈現(xiàn)綠色熒光(見圖3),熒光染色著染細胞核,SIRT1分布于HLE-B3細胞的細胞核上,空白對照組(429.30±80.66)熒光強度較模型組(1776.53±285.48)弱(P<0.05);組間兩兩比較,模型組<低濃度E2組(2541.10±489.43)<中濃度E2組(3400.25±645.86)<高濃度E2組(8442.82±1059.35)(均為P<0.05)。3 討論
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