目的探討STZ誘導產(chǎn)生的Ⅰ型糖尿病大鼠角膜上皮損傷修復延遲及其機制，并以此進一步了解糖尿病角膜炎的病理機制。方法通過腹腔注射STZ損傷胰腺復制I型糖尿病大鼠模型。造模8周后，與同齡正常SD大鼠同時測量體重、血糖、體長以及角膜大小。用共焦顯微鏡檢測大鼠角膜形態(tài)，用棉線測眼淚分泌度，用觸覺測量器測量角膜敏感性，采用Western blot和免疫熒光的方法分析大鼠角膜相關(guān)蛋白表達與分布。用角膜損傷模型來探討角膜損傷修復進程，并檢測損傷0hr、8hr、24hr、48hr、72hr后的角膜通透性的變化；間接免疫熒光分析損傷修復過程中角膜上皮細胞緊密連接蛋白occludin與ZO-1的重塑。結(jié)果STZ誘導產(chǎn)生的Ⅰ型糖尿病大鼠體重，體長都比正常要明顯減少（p<0.05），但角膜大小卻稍小于正常，眼角膜表面無明顯改變。與正常組相比，糖尿病大鼠角膜有明顯虎紅染色陽性（p<0.05），眼淚分泌減少（p<0.05）、角膜敏感性稍降低（p<0.05）、角膜神經(jīng)分布減少（p<0.05），角膜損傷修復延遲，并且角膜上皮細胞pEGFR明顯降低，緊密連接蛋白occludin and ZO... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

糖尿病大鼠高血糖以及生長抑制A．高糖與正常組血糖每周測量變化B.高糖組與正常組每周測量變化C.高糖組與正常組體長（除去尾巴）測量注射STZ后4周以及8周

3.1.2 淚膜保護的減弱以及淚液分泌的減少用虎紅染色（一種用來染角膜緣同時也用來提示淚膜缺陷的染色方法）染正常組和糖尿病組的角膜，糖尿病組較正常大鼠比較明顯出現(xiàn)陽性（圖2A），糖尿組染色定量分值為7.5±0.28，而正常組僅僅1.75±0.08，提示糖尿病組有明顯淚膜保護缺陷（圖2B）。淚液分泌用浸潤酚紅的棉線來測量（圖2D），與虎紅染色陽性相對照，糖尿病組（9.86±1.04mm）與正常組（18.82±2.12mm）相比有明顯淚液分泌降低（圖2C）。

15圖3 糖尿病大鼠的神經(jīng)分布減少A. 角膜敏感性經(jīng)觸覺測量器測量，**P < 0.05, n = 12. B. 經(jīng)共焦顯微鏡測量角膜神經(jīng)基質(zhì)纖維叢，代表圖如示. C. 神經(jīng)纖維長度經(jīng)imageJ 定量，**P < 0.05.Figure 3. Impaired innervation in DM rats.(A) Corneal sensitivity was measured with an esthesiometer, **P < 0.05, n = 12. (B) Subbasal plexuswas visualized with confocal microscopy (ConfoScan; Nidek Technologies) and representativeimages are shown. (C) Nerve fiber length was quantitated, **P < 0.05.3.1.4 糖尿病大鼠角膜損傷修復延遲直徑為5mm的標記環(huán)(MARK )置角膜正中壓痕，用眼科手術(shù)刀刮出標記內(nèi)部角膜上皮，保留角膜緣區(qū)完整未損。用熒光染色觀察角膜損傷修復過程并且拍照（圖4A）。修復愈合率如圖4B計算。正常老鼠在24，32，40和48小時時分別愈合了66%

【參考文獻】：
期刊論文
[1]大鼠角膜損傷修復過程中上皮細胞通透性的改變與緊密連接的重塑有關(guān)[J]. 汪楓,廖榮豐,左莉,周青,汪淵.  安徽醫(yī)科大學學報. 2010(06)
[2]準分子激光角膜上皮瓣下磨鑲術(shù)對兔角膜基質(zhì)細胞凋亡的影響[J]. 朱潔,廖榮豐,劉賀婷,王道斌,胡向陽.  安徽醫(yī)科大學學報. 2009(01)



本文編號：3011020