目的觀察高濃度葡萄糖對人晶狀體上皮細(xì)胞（SRA01/04）活性及沉默信號調(diào)節(jié)蛋白6（SIRT6）表達(dá)的影響。方法將SRA01/04細(xì)胞在不同葡萄糖濃度(5.5 mmol·L^-1、15.5 mmol·L^-1、25.5 mmol·L^-1、35.5 mmol·L^-1、45.5 mmol·L^-1、55.5 mmol·L^-1、75.5 mmol·L^-1)培養(yǎng)基中培養(yǎng)48 h后,用光鏡觀察SRA01/04細(xì)胞形態(tài);CCK-8試劑盒檢測各組細(xì)胞的活性;Western blot檢測各組細(xì)胞SIRT6蛋白的表達(dá)水平。然后將SRA01/04細(xì)胞用55.5mmol·L^-1葡萄糖干預(yù),培養(yǎng)不同時間（0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h）后,Western blot檢測不同時間SRA01/04細(xì)胞SIRT6蛋白表達(dá)水平。免疫熒光技術(shù)檢測對照組(5.5 mmol·L^-1葡萄糖)和高糖組(55.5 mm... 

【文章來源】：眼科新進(jìn)展. 2020年10期 北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

不同濃度葡萄糖干預(yù)48 h后晶狀體上皮細(xì)胞(SRA01/04)的增殖活性(×200)

將SRA01/04細(xì)胞隨機(jī)分為6組,用含55.5 mmol·L-1葡萄糖的培養(yǎng)基分別干預(yù)0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h后,Western blot檢測結(jié)果表明,在同樣的高濃度葡萄糖干預(yù)下,隨著時間延長,SRA01/04細(xì)胞中SIRT6蛋白的表達(dá)量逐漸下降,呈時間依賴性,與0 h組SIRT6蛋白表達(dá)量比較,6 h組和12 h組與其差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均為P>0.05);24 h組、48 h組及72 h組與其差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均為P<0.05)(見圖3)。提示高糖干預(yù)時間越久,SRA01/04細(xì)胞中SIRT6蛋白表達(dá)量越低,因為高糖干預(yù)SRA01/04細(xì)胞48 h后,SIRT6蛋白的下降有顯著差異,所以把48 h作為后期的高糖干預(yù)時間。2.4 高糖對晶狀體上皮細(xì)胞SIRT6蛋白定位和表達(dá)的影響

免疫熒光結(jié)果顯示,SIRT6蛋白主要在細(xì)胞核表達(dá)(見圖4),相比對照組,高糖組細(xì)胞SIRT6蛋白表達(dá)量明顯下降,且高糖組細(xì)胞出現(xiàn)明顯的核固縮、核碎裂現(xiàn)象。圖4 對照組和高糖組SRA01/04細(xì)胞中SIRT6蛋白定位和表達(dá)情況(×200)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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