發(fā)布時間：2017-04-06 21:23

  本文關(guān)鍵詞：遠隔缺血預(yù)適應(yīng)對糖尿病大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的保護作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:通過1型糖尿病大鼠模型,研究遠隔缺血預(yù)適應(yīng)(remote ischemicpreconditioning,RIPC)對糖尿病大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(retinal ganglion cell,RGC)的保護作用,并初步探討RIPC的保護機制。方法:納入45只健康雄性SD大鼠隨機分為正常對照組(n=20)、糖尿病模型組(n=25)2個組。正常對照組隨機分為正常組(n=10)、正常+RIPC組(n=10)。一次性腹腔注射0.1mol/L鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ,60mg/kg)的檸檬酸鈉溶液誘導(dǎo)1型糖尿病大鼠模型。正常對照組大鼠腹腔注射相同體積的檸檬酸鈉緩沖液。STZ注射72h后尾靜脈采血測血糖,高于16.7mmol/L為造模成功,高于16.7mmol/L有20只,再隨機分為糖尿病組(n=10)和糖尿病+RIPC組(n=10)。正常+RIPC組和糖尿病+RIPC組大鼠每天進行RIPC干預(yù),每循環(huán)缺血(10min)/再灌注(10min),共3個循環(huán)。實驗期間每周監(jiān)測大鼠血糖、體重。RIPC干預(yù)12周,留取大鼠眼球,進行免疫組織化學(xué)染色,觀察Brn3a陽性標記的RGC的分布及數(shù)量;觀察比較各組大鼠視網(wǎng)膜GFAP的表達;免疫熒光染色觀察Nrf2在RGC細胞內(nèi)的表達情況。結(jié)果:12周末正常組、正常+RIPC組、糖尿病組和糖尿病+RIPC組大鼠分別為10、8、9和8只。實驗期間,正常組和正常+RIPC組大鼠血糖始終保持在6-8mmol/L,體重逐漸增加。注射STZ誘導(dǎo)糖尿病大鼠在造模成功后出現(xiàn)多飲、多食、多尿癥狀,體型消瘦,毛發(fā)枯黃,實驗期間體重未增加。免疫組化結(jié)果顯示,Brn3a陽性細胞只存在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞層,在細胞核著色。正常組、正常+RIPC組、糖尿病組和糖尿病+RIPC組Brn3a陽性RGC數(shù)量分別為18.45±3.97個、17.18±3.37個、15.41±3.07個和20.18±1.64個。與正常組相比較,糖尿病組RGC數(shù)量顯著減少(p=0.0406);糖尿病+RIPC組Brn3a陽性RGC顯著多于與糖尿病對照組(p=0.004)。在正常組和正常+RIPC組大鼠,GFAP僅表達于視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層和神經(jīng)節(jié)細胞層。糖尿病組GFAP陽性染色貫穿視網(wǎng)膜內(nèi)外界膜之間,較正常組顯著增強(p=0.001)。糖尿病+RIPC治療組大鼠視網(wǎng)膜GFAP陽性表達顯著低于糖尿病組(p=0.035)。Nrf2表達于視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞層、內(nèi)核層和外核層的細胞漿中。結(jié)論:遠隔缺血預(yù)適應(yīng)對糖尿病視網(wǎng)膜病變神經(jīng)節(jié)細胞有一定保護作用,并且能減輕膠質(zhì)細胞反應(yīng)性增生。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 遠隔缺血預(yù)適應(yīng) 膠質(zhì)酸性蛋白 轉(zhuǎn)錄因子NF-E2相關(guān)因子
【學(xué)位授予單位】：首都醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R587.2;R774.1
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-16
• 1. 動物與分組11
• 2. 主要儀器與試劑11
• 3. 動物模型的制作與體征的監(jiān)測11-12
• 4. 遠隔缺血預(yù)適應(yīng)方法12
• 5. 標本的取材與固定12-13
• 6. 病理學(xué)觀察13
• 7. 免疫組織化學(xué)染色13-14
• 8. 免疫熒光染色14-15
• 9 .統(tǒng)計學(xué)分析15-16
• 結(jié)果16-22
• 1. 糖尿病大鼠模型的建立及體征監(jiān)測16-17
• 2. RIPC能減少糖尿病大鼠Brn3a陽性RGC的丟失17-19
• 3. RIPC能減輕糖尿病大鼠視網(wǎng)膜GFAP表達19-21
• 4. RIPC對Nrf2表達、分布的影響21-22
• 討論22-27
• 1. 糖尿病視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞病變模型的選擇22-23
• 2. 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的標記物的選擇23
• 3. RIPC對GFAP表達的影響23-24
• 4. RIPC對RGC的保護作用及可能的保護機制24-27
• 展望27-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻29-35
• 文獻綜述35-44
• 參考文獻40-44
• 英文縮略詞44-45
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況45-46
• 致謝46-47
• 個人簡歷47

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本文編號：289719