【摘要】：慢性鼻-鼻竇炎是一種鼻黏膜慢行炎癥性疾病,發(fā)生在鼻腔和鼻竇。在急性病例中更為常見(jiàn),通常表現(xiàn)為多個(gè)鼻竇的同時(shí)受累。慢性鼻-鼻竇炎是一種嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量的疾病,病程的持續(xù)時(shí)間越長(zhǎng)會(huì)加重患者的呼吸道感染癥狀,嚴(yán)重者甚至引起顱、眼、肺等器官并發(fā)癥的發(fā)生。慢性鼻-鼻竇炎是耳鼻喉頭頸外科中最常見(jiàn)的疾病之一,近年來(lái),慢性鼻-鼻竇炎的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。在上呼吸道中,慢性鼻-鼻竇炎的主要臨床表現(xiàn)是反復(fù)、持續(xù)性鼻塞和長(zhǎng)期大量流涕(清涕或膿涕),具有“黏液素高分泌性疾病”的特點(diǎn)。目前,對(duì)慢性鼻-鼻竇炎發(fā)病機(jī)制的研究逐步深入,但慢性鼻-鼻竇炎的發(fā)病機(jī)制尚仍不十分明確,已有研究表明慢性鼻-鼻竇炎的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)復(fù)雜的生物學(xué)過(guò)程,是多方面因素共同作用的結(jié)果,根據(jù)浸潤(rùn)細(xì)胞的不同可分為不同的小類(lèi):例如嗜酸細(xì)胞浸潤(rùn)型慢性鼻竇炎等。慢性鼻-鼻竇炎的發(fā)病常常合并鼻息肉等常見(jiàn)鼻內(nèi)癥狀,這也增加了慢性鼻-鼻竇炎疾病發(fā)病的復(fù)雜性及多樣性。近年來(lái),在慢性鼻-鼻竇炎的基礎(chǔ)研究中,三葉因子、黏蛋白在慢性鼻-鼻竇炎發(fā)生、發(fā)展中的作用逐漸引起學(xué)者的關(guān)注。三葉因子3(TFF3)、黏蛋白MUC5AC(mucin5AC,MUC5AC)、黏蛋白MUC5B(mucin 5B,MUC5B)在慢性鼻-鼻竇炎(chronic rhinosinusitis)中各亞型:嗜酸粒細(xì)胞性慢性鼻-鼻竇炎伴鼻息肉(eosinophilic chronic rhinosnusitis with nasal polyps,EOS-CRSwNP);非嗜酸粒細(xì)胞性慢性鼻-鼻竇炎伴鼻息肉(non-eosinophilic chronic rhinosnusitis with nasal polyps,Non-EOS-CRSwNP);慢性鼻-鼻竇炎不伴鼻息肉(chronic rhinosnusitis without nasal polyps,CRSsNP)中的表達(dá)及其在慢性鼻-鼻竇炎中三者的相互作用關(guān)系尚未有相關(guān)報(bào)道,同時(shí)如何參與形成上皮的黏膜屏障尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究檢測(cè)了慢性鼻-鼻竇炎各亞型中TFF3、MUC5AC、MUC5B的表達(dá)及組織定位情況,驗(yàn)證了TFF3與MUC5AC、MUC5B之間表達(dá)的協(xié)同作用關(guān)系,結(jié)果表明各亞型之間表達(dá)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,初步探討慢性鼻-鼻竇炎中TFF3與黏液之間的作用關(guān)系及對(duì)黏膜屏障的作用。目的:1.明確慢性鼻-鼻竇炎各亞型中TFF3、MUC5AC、MUC5B的表達(dá)與分布;2.驗(yàn)證慢性鼻-鼻竇炎中TFF3與MUC5AC、MUC5B的協(xié)同作用;3.初步闡明慢性鼻-鼻竇炎中兩者對(duì)黏膜屏障的影響。方法:選取鼻中隔偏曲(Control)患者10例、慢性鼻-鼻竇炎不伴鼻息肉(CRSsNP)患者10例、嗜酸性慢性鼻-鼻竇炎伴鼻息肉(EOS-CRSwNP)和非嗜酸性慢性鼻-鼻竇炎伴鼻息肉(Non-EOS-CRSwNP)患者各10例的石蠟組織切片,利用免疫熒光雙染技術(shù)檢測(cè)各組TFF3、MUC5AC、MUC5B的表達(dá)及分布情況。選取相同患者的黏膜組織,通過(guò)蛋白印跡法(Western blot)檢測(cè)各組黏膜組織中TFF3、MUC5AC、MUC5B的蛋白表達(dá);利用免疫共沉淀技術(shù)(Co-Immunoprecipitation)檢測(cè)TFF3與MUC5AC、MUC5B的共結(jié)合情況,明確其協(xié)同作用關(guān)系。結(jié)果:1.免疫熒光雙染法檢測(cè)TFF3、MUC5AC主要共同表達(dá)在慢性鼻-鼻竇炎組織的黏膜上皮和杯狀細(xì)胞。MUC5B主要表達(dá)在慢性鼻-鼻竇炎組織的黏膜下腺體中;2.TFF3在CRSsNP中熒光表達(dá)最強(qiáng);MUC5AC、MUC5B在EOS-CRSwNP中熒光表達(dá)最強(qiáng);3.Western blot驗(yàn)證結(jié)果表明EOS-CRSwNP、Non-EOS-CRSwNP、CRSsNP中MUC5AC、MUC5B的表達(dá)較對(duì)照組中的明顯升高,且表達(dá)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;4.Western blot驗(yàn)證結(jié)果表明CRSsNP中TFF3的表達(dá)與Control組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,EOS-CRSwNP、Non-EOS-CRSwNP則無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;5.Co-Immunoprecipitation驗(yàn)證結(jié)果表明CRSsNP中TFF3可與MUC5AC、MUC5B共沉淀,結(jié)合形成蛋白復(fù)合物協(xié)同作用;6.CRSsNP中TFF3、MUC5AC、MUC5B均上調(diào),且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論:1.在慢性鼻-鼻竇炎不伴鼻息肉(CRSsNP)中MUC5AC、MUC5B高分泌與TFF3高表達(dá)密切相關(guān);考慮TFF3影響MUC5AC、MUC5B的分泌及表達(dá);2.在慢性鼻-鼻竇炎不伴鼻息肉(CRSsNP)中TFF3分別與MUC5AC、MUC5B共沉淀,兩兩連接形成蛋白復(fù)合物,表明兩兩間存在協(xié)同作用關(guān)系;3.在慢性鼻-鼻竇炎不伴鼻息肉(CRSsNP)中TFF3與黏蛋白協(xié)同作用,可能對(duì)上皮的黏膜屏障產(chǎn)生影響。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R765.9
【圖文】：

.05）（圖 2）。::MUC5ACGAPDHU n p a ir e d t te s t d a t aUC5AC/GAPDH0 .20 .30 .40 .5******************

、D 為 EOS-CRSwNP 組）tern blot 經(jīng)灰度值分析發(fā)現(xiàn)，TFF3 蛋白在 Non-E的表達(dá)水平與 Control 組無(wú)明顯差異，即無(wú)明顯統(tǒng)rol 組相比較 TFF3 蛋白水平升高顯著，差異具有統(tǒng)TFF3GAPDH

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文 9：免疫熒光雙染法檢測(cè) MUC5AC、TFF3 蛋白的表達(dá)（A 為 Control 組、B 為 CRSsNP 組on-EOS-CRSwNP 組、D 為 EOS-CRSwNP 組）五：MUC5B、TFF3 免疫熒光雙染在鼻黏膜組織中的表達(dá)結(jié)果顯示：CRSsNP（圖 10B）組、Non-EOS-CRSwNP（圖 10C）組、EOS-CR（圖 10D）組中蛋白表達(dá)顯著高于 Control 組，其中 CRSsNP 組中熒光強(qiáng)度表達(dá)強(qiáng)，那么 MUC5B、TFF3 表達(dá)部位可能一致，可見(jiàn)表達(dá)于黏膜下腺體。而 Non-ECRSwNP 組、EOS-CRSwNP 組中兩者表達(dá)部位不同，則兩者尚不存在相互作用關(guān)（圖 10）。
【相似文獻(xiàn)】

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2 鄒曉雪;周婷;李妍;李周洲;付國(guó)慶;劉躍偉;葉方立;張志兵;;石英粉塵對(duì)小鼠氣道結(jié)構(gòu)及黏蛋白Muc5b表達(dá)的影響[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2016年06期

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5 王金昌;基于NF-kB信號(hào)通路探討小青龍湯合玉屏風(fēng)散對(duì)變應(yīng)性鼻炎大鼠MUC5AC和MUC5B表達(dá)的影響[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2017年

本文編號(hào)：2875177