目的 對6個先天性眼球震顫家系,包括4個X連鎖先天性特發(fā)性眼球震顫(X-linked congenital idiopathic nystagmus, XL-CIN)和2個伴有無虹膜的先天性感覺缺陷性眼球震顫(sensory defect nystagmus, SDN)家系進行分子遺傳學研究,探討其致病的分子基礎。 方法 1、X連鎖先天性特發(fā)性眼球震顫：收集4個XL-CIN家系的臨床資料及采集家系成員外周靜脈血各5m1,提取基因組DNA；以先證者基因組DNA為模板,PCR擴增XL-CIN候選致病基因FRMD7的全部外顯子及其外顯子-內含子拼接部的序列,DNA直接測序篩查突變位點；一旦發(fā)現致病性突變位點,則采用DNA直接測序方法在其家系成員進行疾病與致病突變共分離分析,進一步確認致病性突變位點。 2、先天性感覺缺陷性眼球震顫：對2個伴有無虹膜的SDN家系成員進行全面的眼部檢查,采集這2個家系共6例患者和5名健康成員外周靜脈血各5ml,提取基因組DNA；以先證者基因組DNA為模板,PCR擴增候選致病基因PAX6的14個外顯子及其外顯子-內含子拼接部的序列,DNA直接測序篩查突變位點；一旦發(fā)現可疑致病性突變位點,則采用DNA測序方法在其家系成員進行疾病與致病突變共分離分析及單核苷酸多態(tài)性(SNP)排除分析,進一步確認致病性突變位點。 結果 1、4個先天性特發(fā)性眼球震顫家系的遺傳模式符合X-連鎖顯性遺傳伴外顯不全,FRMD7基因突變篩查發(fā)現其中2個家系攜帶已知致病性突變位點,即XL-CIN02家系患者在FRMD7基因外顯子8存在c.G886C錯義突變(GGTCGT),導致FRMD7蛋白第296位的甘氨酸被精氨酸代替(p.G296R)；XL-CINO3家系患者在FRMD7基因外顯子10存在c.C910T無義突變(CGATGA),導致該基因編碼蛋白在304位的精氨酸提前終止(p.R304X),產生一個截短形式的變異多肽。 2、2個先天性感覺缺陷性眼球震顫家系皆伴有先天性無虹膜,呈常染色體顯性遺傳。SDN-01家系患者還合并雙眼黃斑中心凹發(fā)育不良和早發(fā)性白內障(presenile cataract),PAX6基因突變篩查發(fā)現患者在該基因第5外顯子存在一個雜合性復制突變(c.95_105dupll),該突變?yōu)橐粋�de novo新突變,導致該基因編碼蛋白在第36位甘氨酸提前終止(p.G36X),產生一個截短的多肽；SDN-02家系表現單純性無虹膜,突變篩查發(fā)現患者在PAX6基因第8外顯子存在一個c.C607T雜合性無義突變,導致編碼蛋白在第203位精氨酸提前終止(p.R203X),產生一個截短的多肽。 結論 1、FRMD7G296R和R304X突變分別是導致XL-CIN02和XL-CIN03家系患者致病的分子基礎。 2、在一個伴有雙眼先天性無虹膜、黃斑中心凹發(fā)育不良和早發(fā)性白內障的先天性感覺缺陷性眼球震顫家系(SDN-01)中發(fā)現了一個de novo PAX6基因c.95_105dup11(p.G36X)新突變；在一個伴有單純雙眼先天性無虹膜的先天性感覺缺陷性眼球震顫家系(SDN-02)中發(fā)現了一個PAX6基因c.C607T(p.R203X)熱點突變。
【學位單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位年份】：2012
【中圖分類】：R777.46
【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
    研究現狀、成果
    研究目的、方法
一、四個X連鎖先天性特發(fā)性眼球震顫家系的致病基因突變研究
    1.1 對象和方法
        1.1.1 四個X連鎖先天性特發(fā)性眼球震顫家系的收集及臨床檢查
        1.1.2 儀器設備及試劑耗材
        1.1.3 基因組DNA提取及定性/定量分析
        1.1.4 已知致病基因FRMD7突變篩查
        1.1.5 DNA測序分析
    1.2 結果
        1.2.1 PCR擴增FRMD7基因的12個外顯子
        1.2.2 四個X連鎖先天性特發(fā)性眼球震顫的臨床表型及篩查結果
    1.3 討論
    1.4 小結
二、兩個先天性感覺缺陷性眼球震顫家系的致病基因突變研究
    2.1 對象和方法
        2.1.1 兩個先天性感覺缺陷性眼球震顫家系的收集及臨床檢查
        2.1.2 儀器設備及試劑耗材
        2.1.3 基因組DNA的提取
        2.1.4 PAX6基因的突變篩查
        2.1.5 DNA測序分析
    2.2 結果
        2.2.1 SDN-01家系的臨床表型
        2.2.2 SDN-01家系的突變篩查
        2.2.3 SDN-02家系的臨床表型
        2.2.4 SDN-02家系的突變篩查
    2.3 討論
    2.4 小結
全文結論
論文創(chuàng)新點
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
綜述
    綜述參考文獻
致謝

【參考文獻】

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1 夏朝霞,劉奕志,劉欣華;同源盒基因Pax-6在晶狀體發(fā)育過程中的表達分析[J];眼科研究;2003年01期

本文編號：2841954