【摘要】：目的:探討甘露糖結(jié)合凝集素(mannose binding lectin,MBL)在煙曲霉菌感染的人角膜上皮細胞中的作用,及其與Dectin-1、TLR2的相互作用。方法:以體外培養(yǎng)的正常人永生化角膜上皮細胞為對照組,實驗組為煙曲霉菌菌絲抗原、重組人MBL(recombination human MBL,rh MBL)、MBL抗體、昆布多糖及TLR2抗體刺激的人永生化角膜上皮細胞,在4,8,12h時間點用Western blot法檢測MBL蛋白表達,在0.5,1,2,4h用real-time PCR法檢測MBL m RNA,在8h時間點real-time PCR法檢測Dectin-1、TLR2、IL-1β及TNF-αm RNA,在24h時間點用Western blot法檢測Dectin-1、TLR2蛋白表達,在24h時間點用Elisa法檢測IL-1β、TNF-α蛋白表達變化。結(jié)果:煙曲霉菌菌絲抗原刺激后可引起MBL基因及蛋白水平表達量相對增高,基因水平表達呈時間依賴性,1h時達到峰值。rh MBL可促進下游細胞因子IL-1β、TNF-α的基因及蛋白水平表達,并呈劑量依賴性,10ug/ml rh MBL增強作用最強,抑制MBL可減少IL-1β、TNF-α的基因及蛋白水平表達。rh MBL能增強煙曲霉菌菌絲刺激引起的Dectin-1、TLR2的產(chǎn)生,呈劑量依賴,10ug/ml為最佳刺激濃度,抑制MBL能明顯下調(diào)Dectin-1、TLR2表達。分別以昆布多糖及TLR2抗體抑制Dectin-1、TLR2,MBL表達均較單純真菌刺激組降低。其表達變化差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:MBL存在于正常角膜上皮細胞中,煙曲霉菌菌絲刺激引起其表達升高。MBL參與了人角膜上皮細胞對煙曲霉菌菌絲抗原的識別,介導(dǎo)下游炎癥因子釋放,在人角膜上皮細胞固有免疫早期階段發(fā)揮作用。MBL可增強真菌性角膜炎中模式識別受體Dectin-1、TLR2的表達,間接促進機體抗感染作用;MBL與Dectin-1、TLR2在人角膜上皮細胞抗真菌感染中發(fā)揮協(xié)同作用,介導(dǎo)角膜上皮炎癥反應(yīng)。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R772.21

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本文編號：2768678