本文關(guān)鍵詞：水楊酸鈉誘導(dǎo)的慢性耳鳴模型中初級聽皮層活動增強的機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景：聽皮層作為高級聽覺中樞,對聲音的感知及信號的加工處理起著關(guān)鍵性的作用,并且與聽覺感覺失調(diào),例如耳鳴,發(fā)生相關(guān)的一個重要部位。耳鳴是一種在沒有外界聲源情況下,個體感知到的一種虛幻聽覺。臨床上的耳鳴癥狀具有多樣性及主觀性,使研究者難以直接對臨床耳鳴病例進行觀察及檢測。水楊酸鈉作為臨床上廣泛使用的抗炎止痛藥阿司匹林的有效成分,在高濃度使用條件下可使人及動物產(chǎn)生可逆性耳鳴。因此,水楊酸鈉常被用作誘導(dǎo)耳鳴動物模型,以進行耳鳴的生物學(xué)基礎(chǔ)研究。已有的研究發(fā)現(xiàn),水楊酸鈉誘導(dǎo)的耳鳴模型中,初級聽皮層的活動增強。水楊酸鈉能夠打破某些聽覺腦區(qū)興奮與抑制的平衡造成超興奮的狀態(tài),這被認(rèn)為是水楊酸鈉誘導(dǎo)耳鳴的一種可能機制。本文旨在探究水楊酸鈉誘導(dǎo)的耳鳴模型中,初級聽皮層神經(jīng)環(huán)路活動水平升高的神經(jīng)機制。方法：本研究首先建立了水楊酸鈉誘導(dǎo)的慢性耳鳴模型組(NaSal組),即連續(xù)七天向VGAT-ChR2-EYFP轉(zhuǎn)基因小鼠腹腔注射水楊酸鈉。生理鹽水組(saline組)動物注射相應(yīng)劑量的生理鹽水,其他條件同NaSal組。利用VGAT-ChR2-EYFP轉(zhuǎn)基因小鼠制備腦片標(biāo)本。該轉(zhuǎn)基因動物上,全腦GABA能神經(jīng)元上表達ChR2光敏感通道蛋白。通過形態(tài)學(xué)特征、電生理學(xué)特征和光遺傳學(xué)特征鑒別錐體神經(jīng)元和GAB A能神經(jīng)元的類型。利用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄初級聽皮層錐體神經(jīng)元及GABA能神經(jīng)元的內(nèi)在膜特性及突觸傳遞活動。具體內(nèi)容如下,記錄了神經(jīng)元靜息膜電位、膜輸入阻抗、電流或光刺激誘導(dǎo)的發(fā)放及自發(fā)和微小的興奮性突觸后電流(sEPSCs和mEPSCs)與抑制性突觸后電流(sIPSCs和mIPSCs)。結(jié)果：在VGAT-ChR2-EYFP轉(zhuǎn)基因小鼠聽皮層腦片的第2/3層上,(1)錐體神經(jīng)元和GABA能神經(jīng)元可通過兩者不同的形態(tài)特征、電生理學(xué)特性來鑒定和區(qū)分。(2)同生理鹽水組相比,在NaSal組動物中,錐體神經(jīng)元膜輸入阻抗升高,表明水楊酸鈉誘導(dǎo)的耳鳴動物中,聽皮層中錐體神經(jīng)元的內(nèi)在膜特性改變且膜興奮性升高。(3)NaSal組動物中,錐體神經(jīng)元電流誘發(fā)動作電位發(fā)放頻率升高,但GABA能神經(jīng)元電流誘發(fā)動作電位發(fā)放頻率降低。(4)NaSal組中,錐體神經(jīng)元谷氨酸能的sEPSCs的頻率跟幅度升高,mEPSCs的頻率增加。表明水楊酸鈉通過突觸前機制增加錐體神經(jīng)元上興奮性的突觸傳遞效能。(5)NaSal組中,錐體神經(jīng)元GAB A能的sIPSCs的頻率和幅度降低。結(jié)論：在本研究中,在水楊酸鈉誘導(dǎo)的耳鳴模型中,初級聽皮層的興奮性和突觸傳遞活動改變。支持該結(jié)論的證據(jù)包括：(1)NaSal組動物錐體神經(jīng)元興奮性增強,但GABA能神經(jīng)元興奮性降低；(2)NaSal組動物錐體神經(jīng)元上谷氨酸能興奮性突觸傳遞活動增強；(3)NaSal組動物錐體神經(jīng)元上GABA能抑制性突觸傳遞活動減弱。水楊酸鈉對初級聽皮層錐體神經(jīng)元與GABA神經(jīng)元影響的差異性,可能是其誘導(dǎo)耳鳴機制的一個神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：錐體神經(jīng)元 腦片 聽皮層 Channelrhodopsin-2 GABA能神經(jīng)元 耳鳴 突觸后電流 光遺傳 水楊酸鈉 全細(xì)胞膜片鉗 轉(zhuǎn)基因小鼠
【學(xué)位授予單位】：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R764.45
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-12
• 第一章 緒論12-30
• 1.1 耳鳴的研究進展12-16
• 1.1.1 耳鳴的流行病學(xué)研究12-13
• 1.1.2 耳鳴的臨床診斷及治療方法13-14
• 1.1.3 耳鳴的發(fā)病機制14-15
• 1.1.4 耳鳴的動物模型建立方法15-16
• 1.1.4.1 噪聲暴露誘導(dǎo)的耳鳴模型15-16
• 1.1.4.2 水楊酸鈉誘導(dǎo)的耳鳴模型16
• 1.2 水楊酸誘導(dǎo)耳鳴的機制16-23
• 1.2.1 阿司匹林的基本特征及臨床應(yīng)用16-18
• 1.2.1.1 阿司匹林的研究背景16-17
• 1.2.1.2 阿司匹林的副作用17-18
• 1.2.2 水楊酸鈉的藥理學(xué)特性及其機制18-19
• 1.2.2.1 阿司匹林的代謝過程18
• 1.2.2.2 水楊酸鈉抗炎的機制18
• 1.2.2.3 水楊酸鈉的抗癌機制18-19
• 1.2.3 水楊酸鈉對聽覺系統(tǒng)的影響19-23
• 1.2.3.1 水楊酸鈉對聽覺外周系統(tǒng)的影響19-20
• 1.2.3.2 水楊酸鈉對聽覺中樞系統(tǒng)的影響20-23
• 1.3 聽皮層的結(jié)構(gòu)和功能23-26
• 1.3.1 聽皮層在聽覺通路中的作用23-25
• 1.3.1.1 聽皮層的神經(jīng)傳入23-24
• 1.3.1.2 聽皮層的神經(jīng)傳出24-25
• 1.3.2 初級聽皮層的內(nèi)部微環(huán)路25-26
• 1.4 光遺傳學(xué)技術(shù)在神經(jīng)環(huán)路研究中的應(yīng)用26-30
• 1.4.1 光遺傳技術(shù)原理26-27
• 1.4.2 光遺傳技術(shù)在神經(jīng)環(huán)路領(lǐng)域中的優(yōu)勢27-30
• 第二章 實驗材料和方法30-38
• 2.1 水楊酸鈉誘導(dǎo)的慢性耳鳴模型30
• 2.2 腦片的制備30-32
• 2.3 VGAT-ChR2-EYFP轉(zhuǎn)基因小鼠基因型鑒定32
• 2.4 光刺激VGAT-ChR2-EYFP轉(zhuǎn)基因小鼠腦片32-33
• 2.5 VGAT-ChR2-EYFP轉(zhuǎn)基因小鼠聽皮層冰凍切片33-34
• 2.6 溶液及藥品34-35
• 2.6.1 人工腦脊液34
• 2.6.2 電極內(nèi)液34-35
• 2.6.3 基因鑒定相關(guān)藥品35
• 2.7 數(shù)據(jù)分析35-38
• 2.7.1 數(shù)據(jù)分析35
• 2.7.2 統(tǒng)計學(xué)分析35-38
• 第三章 實驗結(jié)果38-52
• 3.1 VGAT-ChR2-EYFP轉(zhuǎn)基因小鼠基因型鑒定38-40
• 3.2 初級聽皮層錐體細(xì)胞和GABA能神經(jīng)元的鑒定40-44
• 3.2.1 形態(tài)學(xué)和電生理學(xué)特征鑒定40-42
• 3.2.2 光遺傳學(xué)鑒定42-44
• 3.3 水楊酸鈉誘導(dǎo)的耳鳴模型中,聽皮層錐體神經(jīng)元的膜特性的變化44-46
• 3.3.1 初級聽皮層錐體神經(jīng)元膜輸入阻抗(Rin)升高,靜息膜電位(RMP)不受影響44-45
• 3.3.2 初級聽皮層錐體神經(jīng)元上電流誘發(fā)動作電位發(fā)放頻率顯著增加45-46
• 3.4 水楊酸鈉誘導(dǎo)的耳鳴模型中,聽皮層錐體神經(jīng)元突觸傳遞的變化46-49
• 3.4.1 初級聽皮層錐體神經(jīng)元興奮性突觸傳遞水平顯著升高46-48
• 3.4.3 初級聽皮層錐體神經(jīng)元抑制性突觸傳遞效能降低48-49
• 3.5 水楊酸鈉誘導(dǎo)的耳鳴模型中,聽皮層GABA能神經(jīng)元膜特性的變化.49-52
• 3.5.1 初級聽皮層GABA能神經(jīng)元靜息膜電位(RMP)降低,膜輸入阻抗(R_(in))不受影響49-51
• 3.5.2 初級聽皮層GABA能神經(jīng)元上電流誘發(fā)動作電位發(fā)放頻率顯著降低51-52
• 第四章 討論52-56
• 4.1 實驗結(jié)論52
• 4.2 實驗結(jié)果分析52-54
• 4.3 本實驗的不足之處與展望54-56
• 參考文獻56-84
• 附錄1 縮略詞表84-86
• 附錄2 儀器設(shè)備86-87
• 附錄3 主要原始數(shù)據(jù)文件名稱87-89
• 附錄4 聽皮層腦片制備步驟89-90
• 附錄5 記錄電極的制備和參數(shù)90-91
• 附錄6 腦片膜片鉗系統(tǒng)組件圖91-93
• 附錄7 電極內(nèi)液、人工腦脊液的配置步驟93-98
• 致謝98-99

  本文關(guān)鍵詞：水楊酸鈉誘導(dǎo)的慢性耳鳴模型中初級聽皮層活動增強的機制，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：274493