發(fā)布時間：2020-06-29 07:04

【摘要】：目的:(1)探討枸杞多糖對大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷是否有保護作用(2)枸杞多糖對大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷保護作用可能的機制,為缺血再灌注損傷視網(wǎng)膜的治療提供理論依據(jù)和新的診治途徑。方法:(1)把健康成年雄性SD大鼠55只作為實驗對象,體重范圍在200-300g,購自南昌大學動物科學研究所,數(shù)字表法隨機分成空白對照組簡稱假手術(shù)組、缺血再灌注組簡稱模型組、缺血再灌注模型+枸杞多糖組簡稱LBP藥物組,假手術(shù)組5只,其他兩組每組25只,每組分總共5個時間點(6h、12h、24h、48h、72h、),各時間點5只,在室溫,給予充足食物與水,12h光照,12h黑夜下適應性生活7天。(2)LBP藥物組SD雄性大鼠給與4ml/100g的枸杞多糖溶液灌胃處理(每天一次,連續(xù)一周),模型組SD雄性大鼠和假手術(shù)組給與4ml/100g的0.9%氯化鈉溶液處理(每天一次,連續(xù)一周)。(3)采取動脈夾夾閉大鼠右側(cè)頸總動脈的方式制作視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷模型。用動脈夾夾閉模型組、LBP藥物組右側(cè)頸總動脈(夾閉1小時),假手術(shù)組只進行手術(shù)操作暴露右頸總動脈不夾閉1小時。1小時后逐層縫合切口。(4)分別在缺血再灌注后6h、12h、24h、48h、72h后處理各組SD大鼠,在腹腔注射10%水合氯醛溶液行深度麻醉下處死SD大鼠,制作眼球標本行HE染色,在顯微鏡下觀察視網(wǎng)膜各層形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化,用免疫組織化學染色的方法檢測各組大鼠視網(wǎng)膜活性Caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白表達。結(jié)果:(1)HE染色結(jié)果:視網(wǎng)膜缺血再灌注后6小時,輕度視網(wǎng)膜水腫,視網(wǎng)膜厚度略有增加,神經(jīng)纖維層和內(nèi)叢狀層水腫淡染,視網(wǎng)膜缺血再灌注后12,24小時,視網(wǎng)膜嚴重水腫,神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)減少,內(nèi)核層較薄,細胞排列松散無序;48小時水腫消失,主要表現(xiàn)為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)繼續(xù)減少,內(nèi)核層進一步變薄,可見空泡化;72小時視網(wǎng)膜變薄,視網(wǎng)膜細胞數(shù)量減少。與模型組(RIRI組)相比,藥物組(LBP組)在6h和12h,24h時視網(wǎng)膜組織水腫緩解;24h,48h和72h較模型組神經(jīng)節(jié)細胞減少較少,視網(wǎng)膜厚度無明顯變化。藥物組的視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)基本上是排列有序的。(2)免疫組化結(jié)果:假手術(shù)組視網(wǎng)膜活性Caspase-3陽性細胞數(shù)為(103.12±12.97個)mm~(-2),模型組視網(wǎng)膜活性Caspase-3陽性細胞數(shù)在灌注后6h開始表達增多,陽性細胞數(shù)為(559.03?38.25)個·mm~(-2),24 h達到較高水平,陽性細胞數(shù)為(1528.12?52.74)個mm~(-2),隨后逐漸下降,LBP藥物組視網(wǎng)膜各時間點活性Caspase-3陽性細胞數(shù)均顯著少于缺血再灌注組,差異均有統(tǒng)計學意義(均為P0.05)。假手術(shù)組視網(wǎng)膜可見大量Bcl-2陽性細胞,Bcl-2陽性細胞在缺血再灌注組RIRI后6h開始下降,12h后持續(xù)下降,24h下降至較低水平。在每個時間點,藥物組中Bcl-2陽性細胞的數(shù)量顯著高于缺血再灌注視網(wǎng)膜,差異均有統(tǒng)計學意義(均為P0.05)。Bax陽性細胞在假手術(shù)組大鼠表達較少;在缺血再灌注組中,在RIRI后6小時在神經(jīng)節(jié)細胞層和內(nèi)核層中觀察到Bax陽性細胞,并且在24小時達到更高水平,并且在48小時開始減少。在每個時間點,藥物組中的Bax陽性細胞顯著少于缺血再灌注組,差異均有統(tǒng)計學意義(均為P0.05)結(jié)論:(1)枸杞多糖對視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷引起的視網(wǎng)膜損傷有保護作用。(2)其保護是抑制視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷中的細胞凋亡,其機制是通過上調(diào)Bcl-2、下調(diào)Bax與Caspase-3表達有關(guān)。
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R774.1
【圖文】：

（RIRI組24hHE染色×400)

8 假手術(shù)組大鼠視網(wǎng)膜活性 Caspase-3 陽性細胞表達×2及 LBP 治療組 Caspase-3 蛋白表達，缺血再灌注組視網(wǎng)膜活性 Caspase-3 陽性細胞數(shù)高水平，然后逐漸下降。在每個時間點，藥物組細胞數(shù)明顯少于缺血再灌注組，差異有統(tǒng)計學意義表 1)。組 Caspase-3 蛋白表達×200 圖 10LBP 治療組 Caspase-

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王雪維;李燕;;Bcl-2、Bax在青光眼神經(jīng)節(jié)細胞凋亡中的研究進展[J];醫(yī)學綜述;2015年22期

2 王t

本文編號：2733575