【摘要】：目的通過(guò)模擬OSAHS-慢性間歇性低氧(CIH)這一病理生理改變,建立SD大鼠模型,進(jìn)一步闡明CIH對(duì)頦舌肌內(nèi)IL-6和TNF-α表達(dá)的影響,并探討其與頦舌肌損傷的相關(guān)關(guān)系,并在CIH基礎(chǔ)上,通過(guò)不同濃度的氧療干預(yù),探究氧療對(duì)大鼠頦舌肌內(nèi)IL-6及TNF-α表達(dá)的影響,探索氧療能否在一定程度上修復(fù)或逆轉(zhuǎn)CIH所致頦舌肌損傷。方法采用自行研制的有機(jī)玻璃低氧裝置制備CIH大鼠模型。將40只健康雄性SD大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法,隨機(jī)等量地分為正常對(duì)照組、CIH組、O1組(氧療組1)、O2組(氧療組2),每組各10只。CIH模型的制備:將SD大鼠置于低氧室內(nèi),將氮?dú)夂脱鯕庋h(huán)充入玻璃倉(cāng)中,調(diào)節(jié)氣體流量,使缺氧艙內(nèi)的氧濃度最低達(dá)10%左右,持續(xù)45s,再調(diào)整氧濃度逐漸恢復(fù)至21%,維持45s,120s設(shè)定為一個(gè)周期,連接YS-1型數(shù)字化測(cè)氧儀觀測(cè)艙內(nèi)氧氣濃度,每天干預(yù)8小時(shí)(9:00-17:00),共飼養(yǎng)4周。正常對(duì)照組大鼠喂養(yǎng)于動(dòng)物房的一般環(huán)境中,所有大鼠正常飲食水,飼養(yǎng)4周。O1組大鼠:在4周的CIH基礎(chǔ)上繼續(xù)將大鼠置于低氧艙中,調(diào)整艙內(nèi)氧濃度至40%左右,每天干預(yù)4小時(shí)(9:00-13:00),剩余時(shí)間段將大鼠置于一般環(huán)境中飼養(yǎng),飼養(yǎng)至第6周。O2組:在4周CIH基礎(chǔ)上繼續(xù)將大鼠置于低氧艙中,氧濃度控制于50%左右,每天干預(yù)4小時(shí)(9:00-13:00),余時(shí)間段將大鼠喂養(yǎng)在一般的環(huán)境中,飼養(yǎng)到第6周。所有大鼠按計(jì)劃飼養(yǎng)完成后,通過(guò)腹腔注射麻藥,麻醉大鼠,充分暴露頦舌肌,取出適當(dāng)大小頦舌肌組織放進(jìn)凍存管中,然后迅速放入液氮罐中,液氮速凍后,轉(zhuǎn)至-80℃冰箱凍存。采用透射電鏡觀察對(duì)照組及CIH組頦舌肌超微結(jié)構(gòu)變化。經(jīng)HE染色對(duì)比研究CIH環(huán)境下大鼠頦舌肌的組織病理學(xué)改變,最后通過(guò)Western blot法檢測(cè)各組大鼠頦舌肌組織中IL-6,TNF-α的相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果1實(shí)驗(yàn)前后大鼠體重變化:實(shí)驗(yàn)前4組大鼠質(zhì)量無(wú)顯著性差異(P0.05),實(shí)驗(yàn)后各組大鼠質(zhì)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2透射電鏡下大鼠頦舌肌形態(tài)觀察:CIH組大鼠頦舌肌肌纖維排列混亂,纖維間距大小不一,纖維形態(tài)不規(guī)則。頦舌肌肌細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)線(xiàn)粒體肥大腫脹,內(nèi)部呈氣球樣變,內(nèi)嵴不規(guī)則,部分可見(jiàn)斷裂、消失,邊界不清。3頦舌肌組織HE染色:對(duì)照組大鼠頦舌肌纖維的形態(tài)規(guī)則,排列整齊,肌纖維之間界限清晰,間距大致均等。CIH組大鼠頦舌肌纖維排列紊亂,纖維間距大小不一,纖維形態(tài)不規(guī)則。4頦舌肌組織中IL-6的表達(dá):與對(duì)照組相比較,CIH組大鼠頦舌肌中IL-6表達(dá)顯著升高(P0.05)。IL-6在O1、O2組頦舌肌中表達(dá)明顯低于CIH組(P0.05)。O1、O2組大鼠頦舌肌IL-6表達(dá)均高于正常對(duì)照組(P0.05)。O1組與O2組大鼠頦舌肌中IL-6表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5頦舌肌組織中TNF-α的表達(dá):與對(duì)照組相比較,CIH組大鼠頦舌肌中TNF-α表達(dá)顯著升高(P0.05)。O1、O2組大鼠頦舌肌中TNF-α表達(dá)較CIH組明顯降低(P0.05)。O1、O2組大鼠頦舌肌中TNF-α表達(dá)較正常對(duì)照組偏高(P0.05)。O1組與O2組大鼠頦舌肌中TNF-α表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1 CIH可引起頦舌肌組織中IL-6、TNF-α異常表達(dá)。2頦舌肌中異常表達(dá)的IL-6、TNF-α可造成頦舌肌損傷。3氧療可在一定程度上降低頦舌肌中IL-6、TNF-α的表達(dá)。4不同濃度的氧療對(duì)頦舌肌的影響不同。圖12幅;表6個(gè);參154篇。
【圖文】：

第 1 章 實(shí)驗(yàn)研究 SD 雄性大鼠隨機(jī)等量地分為正常對(duì)照組、CIH飼養(yǎng)于 SPF 級(jí)動(dòng)物房（北大第一醫(yī)院動(dòng)物中心對(duì)濕度為 50-70％。大鼠可以自由進(jìn)食，自由飲實(shí)驗(yàn)倫理審查要求。備如圖 1 所示有機(jī)玻璃裝置內(nèi)，連接氮?dú)夂脱鯕舛?120 s 為一個(gè)循環(huán)，調(diào)節(jié)氣體流量，使低氧艙環(huán)在 10％及 21％氧濃度時(shí)各維持 45 s，YS-1 （如圖 2），每天干預(yù) 8 小時(shí)（9:00-17:00），飼

如圖 1 所示有機(jī)玻璃裝置內(nèi)，連接氮?dú)夂脱鯕舛?120 s 為一個(gè)循環(huán)，，調(diào)節(jié)氣體流量，使低氧艙環(huán)在 10％及 21％氧濃度時(shí)各維持 45 s，YS-1 如圖 2），每天干預(yù) 8 小時(shí)（9:00-17:00），飼圖 1 間歇性低氧艙設(shè)計(jì)圖Fig. 1 Intermittent hypoxia chamber design diagram
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R766

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2693326