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應(yīng)用基因芯片技術(shù)研究喉鱗狀細(xì)胞癌中circRNA的表達(dá)

發(fā)布時(shí)間:2020-05-26 21:02
【摘要】:目的:越來越多的證據(jù)表明環(huán)狀RNA(circular RNA,circRNA)在調(diào)節(jié)基因表達(dá)中發(fā)揮著重要作用,并且circRNA的異常表達(dá)已被證實(shí)與多種惡性腫瘤的發(fā)病存在相關(guān)性。然而circRNA在喉鱗狀細(xì)胞癌中的作用尚不明確。本研究應(yīng)用基因芯片技術(shù)檢測(cè)喉鱗狀細(xì)胞癌中circRNA的表達(dá)譜,以探尋在喉鱗狀細(xì)胞癌發(fā)病過程中發(fā)揮潛在作用的circRNA。方法:運(yùn)用芯片技術(shù)檢測(cè)5例喉鱗狀細(xì)胞癌組織與5例正常喉黏膜組織中circRNA的表達(dá)情況。使用標(biāo)準(zhǔn)富集分析方法對(duì)產(chǎn)生差異表達(dá)circRNA的基因進(jìn)行信號(hào)通路分析,以預(yù)測(cè)相關(guān)circRNA的生物學(xué)功能。通過即時(shí)定量聚合酶鏈鎖反應(yīng)(qRT-PCR)檢測(cè)候選circRNA及其預(yù)測(cè)miRNA的表達(dá)水平。運(yùn)用生物信息學(xué)方法構(gòu)建circRNA-miRNA交互網(wǎng)絡(luò)以預(yù)測(cè)circRNA與miRNA的結(jié)合情況。結(jié)果:通過芯片技術(shù)檢測(cè)到喉鱗狀細(xì)胞癌和正常喉黏膜組織中存在506個(gè)差異表達(dá)的circRNA。qRT-PCR 結(jié)果證實(shí) hsa circ 0044520 和 hsa circ 0044529 在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)存在顯著上調(diào)。hsa-miR-4726-5p和hsa-miR-4640-5p是hsa circ_0044520和hsa_circ_0044529的潛在靶miRNA。代謝/信號(hào)通路富集分析顯示hsa_circ_0044520和hsa_circ_0044529可能參與了膠原蛋白的合成過程。結(jié)論:競爭性內(nèi)源RNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)和生物信息學(xué)分析顯示:hsa circ_0044520和hsa_circ_0044529可能是通過 hsa-miR-4726-5p 和 hsa-miR-4640-5p 的“海綿作用”,在喉鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)病過程中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。
【圖文】:

序列,方式,內(nèi)源性,海綿


向剪接而形成的內(nèi)源性非編碼RNA邋(noncodingRNA,ncRNA),,在人類細(xì)胞中廣泛逡逑存在,在編碼基因的表達(dá)調(diào)控中發(fā)揮著重要作用[9,邋10]。目前的研究發(fā)現(xiàn),生物體逡逑中的circRNA主要通過三種方式發(fā)揮作用(圖1)邐[11]:邋(1)順式調(diào)控宿主基因的逡逑表達(dá):通過RNA-RNA相互作用,影響轉(zhuǎn)錄機(jī)結(jié)構(gòu)和組成,特異性調(diào)控其宿主基因逡逑的表達(dá)[12];(2)作為內(nèi)源性1^

本文編號(hào):2682405

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