發(fā)布時間：2020-03-18 13:20

【摘要】：目的:研究在煙曲霉菌性角膜炎中,Dectin-1通過MAPK信號通路調(diào)控巨噬細胞表型相關(guān)因子的表達變化。方法:1、用煙曲霉菌刺激SPF級C57BL/6小鼠后,建立真菌性角膜炎1天、3天、5天模型,采用PCR檢測M1型(TNF-ɑ、INOS、IL-6、IL-12)細胞因子和M2型(Arg-1、IL-10)細胞因子的表達變化。2、小鼠結(jié)膜下注射Dectin-1激動劑Curdlan和抑制劑laminaran,預處理1天,然后建立SPF級C57BL/6小鼠煙曲霉菌性角膜炎的動物模型,通過裂隙燈觀察小鼠角膜炎炎癥反應(yīng)情況,并且記錄其臨床評分結(jié)果,采用免疫熒光法觀察各組小鼠角膜中巨噬細胞數(shù)量變化;PCR檢測巨噬細胞M1型細胞因子和M2型細胞因子mRNA水平表達變化。3、MAPK通路抑制劑(P38、JNK、ERK抑制劑)預處理RAW264.7細胞2h后,用煙曲霉菌刺激12h,PCR檢測巨噬細胞M1型細胞因子和M2型細胞因子mRNA水平表達變化。結(jié)果:1、煙曲霉菌感染小鼠角膜1d、3d、5d后與對照組相比,M1型細胞因子和M2型細胞因子的mRNA水平表達明顯升高(p0.01);2、Dectin-1激動劑Curdlan預處理組與PBS對照組相比,真菌感染后3天的角膜潰瘍面積明顯增大,炎癥評分增高(p0.01),角膜組織中M1型細胞因子mRNA水平表達升高(p0.01),M2型細胞因子mRNA水平表達降低(p0.01);而Dectin-1抑制劑laminaran預處理組與PBS組相比,角膜潰瘍面積明顯減少,炎癥評分降低(p0.01),M1型細胞因子mRNA水平表達降低(p0.01),M2型細胞因子mRNA水平表達明顯升高(p0.01)。3、MAPK通路抑制劑預處理組RAW264.7細胞與對照組相比,M1型細胞因子mRNA水平表達降低(p0.01),M2型細胞因子mRNA水平表達升高(p0.01)。結(jié)論:在小鼠真菌性角膜炎中,Dectin-1可影響小鼠角膜巨噬細胞募集,通過MAPK信號通路調(diào)控巨噬細胞表型相關(guān)因子進而調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)。
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R772.21

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