【摘要】：目的研究微小核糖核酸(microRNA-5p,miR)-17-5p通過(guò)靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶抑制因子1A(CDKN1A)對(duì)鼻咽癌細(xì)胞株CNE2增殖的影響。方法將miR-17-5p模擬物(mimics)轉(zhuǎn)染人鼻咽癌細(xì)胞系CNE2,使用定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)和Western blot檢測(cè)miR-17-5p對(duì)CDKN1A的影響;生物信息學(xué)預(yù)測(cè)miR-17-5p是否有CDKN1A的結(jié)合位點(diǎn);熒光素酶實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-17-5p是否可靶向調(diào)節(jié)CDKN1A;通過(guò)Western blot和克隆形成實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR17-5p可否通過(guò)調(diào)節(jié)CDKN1A影響鼻咽癌細(xì)胞株CNE2的增殖。結(jié)果 Western blot和qRT-PCR實(shí)驗(yàn)顯示,在蛋白水平和mRNA水平與對(duì)照組相比,過(guò)表達(dá)miR-17-5p可降低CDKN1A的表達(dá)(P0.01);Target scan靶基因預(yù)測(cè)軟件分析發(fā)現(xiàn),在CDKN1A的3'UTR有兩處miR-17-5p的結(jié)合位點(diǎn);熒光素酶檢測(cè)結(jié)果證實(shí)miR-17-5p可特異性的作用于這兩個(gè)位點(diǎn);克隆形成實(shí)驗(yàn)顯示,Western blot和qRT-PCR實(shí)驗(yàn)顯示,在蛋白水平和mRNA水平,過(guò)表達(dá)miR-17-5p可顯著提高CNE2細(xì)胞的克隆形成率(P0.05),同時(shí)過(guò)表達(dá)miR-17-5p和CDKN1A,則抵消了miR-17-5p對(duì)細(xì)胞增殖的影響(P0.05)。結(jié)論 CDKN1A是miR-17-5p的靶基因,miR-17-5p通過(guò)靶向性抑制CDKN1A的表達(dá)可促進(jìn)鼻咽癌細(xì)胞的增殖。

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