發(fā)布時間：2020-03-09 09:07

【摘要】：目的研究微小核糖核酸(microRNA-5p,miR)-17-5p通過靶向調節(jié)細胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子1A(CDKN1A)對鼻咽癌細胞株CNE2增殖的影響。方法將miR-17-5p模擬物(mimics)轉染人鼻咽癌細胞系CNE2,使用定量逆轉錄-聚合酶鏈反應(qRT-PCR)和Western blot檢測miR-17-5p對CDKN1A的影響;生物信息學預測miR-17-5p是否有CDKN1A的結合位點;熒光素酶實驗檢測miR-17-5p是否可靶向調節(jié)CDKN1A;通過Western blot和克隆形成實驗驗證miR17-5p可否通過調節(jié)CDKN1A影響鼻咽癌細胞株CNE2的增殖。結果 Western blot和qRT-PCR實驗顯示,在蛋白水平和mRNA水平與對照組相比,過表達miR-17-5p可降低CDKN1A的表達(P0.01);Target scan靶基因預測軟件分析發(fā)現(xiàn),在CDKN1A的3'UTR有兩處miR-17-5p的結合位點;熒光素酶檢測結果證實miR-17-5p可特異性的作用于這兩個位點;克隆形成實驗顯示,Western blot和qRT-PCR實驗顯示,在蛋白水平和mRNA水平,過表達miR-17-5p可顯著提高CNE2細胞的克隆形成率(P0.05),同時過表達miR-17-5p和CDKN1A,則抵消了miR-17-5p對細胞增殖的影響(P0.05)。結論 CDKN1A是miR-17-5p的靶基因,miR-17-5p通過靶向性抑制CDKN1A的表達可促進鼻咽癌細胞的增殖。

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