【摘要】：目的探討大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)移植對氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變(OIR)新生大鼠視網(wǎng)膜新生血管的影響,并觀察視網(wǎng)膜缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)表達(dá)的變化,為BMSC臨床治療OIR提供可靠的理論依據(jù)。方法將72只7日齡Sprague-Dawley新生大鼠隨機(jī)分為正常對照組、模型組(OIR組)與BMSC移植組(BMSC組)。體外培養(yǎng)BMSC,采用氧誘導(dǎo)法制成OIR模型,持續(xù)高氧5 d后,BMSC組行玻璃體內(nèi)注射大鼠BMSC。移植后7 d,采用視網(wǎng)膜鋪片法、蘇木精-伊紅染色(HE)法檢測BMSC移植對OIR新生大鼠視網(wǎng)膜新生血管的影響;免疫組化法結(jié)合Western blot法觀察BMSC對OIR新生大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α及VEGF蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果視網(wǎng)膜鋪片結(jié)果示正常對照組視網(wǎng)膜血管排列整齊,而OIR組血管排列紊亂,可見大片無灌注區(qū),BMSC組僅可見大血管稍迂曲,血管排列較規(guī)整,無灌注區(qū)明顯減少;HE染色發(fā)現(xiàn)OIR組視網(wǎng)膜內(nèi)界膜可見大量新生血管及視網(wǎng)膜前新生血管細(xì)胞(Pre-RNC),BMSC組視網(wǎng)膜內(nèi)界膜新生血管明顯減少,且pre-RNC數(shù)顯著少于OIR組(P0.01);免疫組織化學(xué)結(jié)果示OIR組HIF-1α陽性與VEGF陽性細(xì)胞數(shù)顯著多于正常對照組,而BMSC組HIF-1α陽性與VEGF陽性細(xì)胞數(shù)均顯著少于OIR組(P0.05)。Western blot結(jié)果示OIR組HIF-1α與VEGF蛋白表達(dá)顯著高于正常對照組,而BMSC組HIF-1α與VEGF蛋白表達(dá)顯著低于OIR組(P0.01)。結(jié)論 BMSC玻璃體內(nèi)移植可減輕OIR新生大鼠視網(wǎng)膜新生血管的形成,其機(jī)制可能與其抑制HIF-1α及VEGF蛋白的表達(dá)有關(guān)。
【圖文】：

α陽性細(xì)胞，且顯著多于正常對照組（P<0.05）；BMSC組HIF-1α陽性細(xì)胞數(shù)明顯少于OIR組（P<0.05），但仍多于正常對照組（P<0.05）。見表1，圖2。表1各組大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α陽性與VEGF陽性細(xì)胞數(shù)比較（x±s，個/mm2）組別nHIF-1α陽性細(xì)胞數(shù)VEGF陽性細(xì)胞數(shù)正常對照組89.0±1.325.0±3.2OIR組856.0±2.9a81.0±4.8aBMSC組839.0±2.4a,b53.0±3.9a,bF值858.4388.0P值<0.001<0.001注：a示與正常對照組比較，P<0.05；b示與OIR組比較，P<0.05。視網(wǎng)膜鋪片正常對照組OIR組BMSC組蘇木精-伊紅染色圖1各組大鼠視網(wǎng)膜新生血管形成情況比較各組視網(wǎng)膜鋪片結(jié)果示（×200）：正常對照組可見血管密集，分布均勻；OIR組可見毛細(xì)血管閉塞，大片無灌注區(qū)，血管較雜亂，分布不均勻；BMSC組血管稍迂曲，無灌注區(qū)少于OIR組，新生血管數(shù)少于OIR組，血管排列較OIR組整齊。各組蘇木精-伊紅染色結(jié)果示（×400）：正常對照組可見極少量新生血管；OIR組可見較多雜亂的新生血管；BMSC組亦可見新生血管，分布較不均勻，新生血管數(shù)較OIR組明顯減少，分布較OIR組均勻。箭頭所示為新生血管。圖2各組大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α及VEGF表達(dá)結(jié)果（免疫組化，×400）HIF-1α陽性細(xì)胞核呈棕黃色，VEGF陽性細(xì)胞呈棕黃色。正常對照組視網(wǎng)膜偶見極少量HIF-1α陽性及VEGF陽性細(xì)胞，OIR組視網(wǎng)膜可見較多的HIF-1α陽性及VEGF陽性細(xì)胞，BMSC組視網(wǎng)膜可見HIF-1α陽性及VEGF陽性細(xì)胞，，但明顯少于OIR組。HIF-1αVEGF正常對照組OIR組BMSC組

第19卷第11期2017年11月中國當(dāng)代兒科雜志ChinJContempPediatrVol.19No.11Nov.2017·1205·2.3各組大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α、VEGF免疫組織化學(xué)結(jié)果免疫組織化學(xué)結(jié)果示HIF-1α陽性細(xì)胞核染為棕黃色，正常對照組視網(wǎng)膜僅見少量HIF-1α陽性細(xì)胞；OIR組可見大量HIF-1α陽性細(xì)胞，且顯著多于正常對照組（P<0.05）；BMSC組HIF-1α陽性細(xì)胞數(shù)明顯少于OIR組（P<0.05），但仍多于正常對照組（P<0.05）。見表1，圖2。表1各組大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α陽性與VEGF陽性細(xì)胞數(shù)比較（x±s，個/mm2）組別nHIF-1α陽性細(xì)胞數(shù)VEGF陽性細(xì)胞數(shù)正常對照組89.0±1.325.0±3.2OIR組856.0±2.9a81.0±4.8aBMSC組839.0±2.4a,b53.0±3.9a,bF值858.4388.0P值<0.001<0.001注：a示與正常對照組比較，P<0.05；b示與OIR組比較，P<0.05。視網(wǎng)膜鋪片正常對照組OIR組BMSC組蘇木精-伊紅染色圖1各組大鼠視網(wǎng)膜新生血管形成情況比較各組視網(wǎng)膜鋪片結(jié)果示（×200）：正常對照組可見血管密集，分布均勻；OIR組可見毛細(xì)血管閉塞，大片無灌注區(qū)，血管較雜亂，分布不均勻；BMSC組血管稍迂曲，無灌注區(qū)少于OIR組，新生血管數(shù)少于OIR組，血管排列較OIR組整齊。各組蘇木精-伊紅染色結(jié)果示（×400）：正常對照組可見極少量新生血管；OIR組可見較多雜亂的新生血管；BMSC組亦可見新生血管，分布較不均勻，新生血管數(shù)較OIR組明顯減少，分布較OIR組均勻。箭頭所示為新生血管。圖2各組大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α及VEGF表達(dá)結(jié)果（免疫組化，×400）HIF-1α陽性細(xì)胞核呈棕黃色，VEGF陽性細(xì)胞呈棕黃色。正常對照組視網(wǎng)膜偶見極少量HIF-1α陽性及VEGF陽性細(xì)胞，OIR組視網(wǎng)膜可見較多的HIF-1α陽性及VEGF陽性細(xì)胞，BMSC組視網(wǎng)膜可見HIF-1α陽性及VEGF陽性細(xì)胞，但明顯少于OIR組。HI

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本文編號：2562618