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骨髓間充質(zhì)干細胞移植對氧誘導視網(wǎng)膜病變新生大鼠視網(wǎng)膜新生血管的影響

發(fā)布時間:2019-11-18 14:02
【摘要】:目的探討大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSC)移植對氧誘導視網(wǎng)膜病變(OIR)新生大鼠視網(wǎng)膜新生血管的影響,并觀察視網(wǎng)膜缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)表達的變化,為BMSC臨床治療OIR提供可靠的理論依據(jù)。方法將72只7日齡Sprague-Dawley新生大鼠隨機分為正常對照組、模型組(OIR組)與BMSC移植組(BMSC組)。體外培養(yǎng)BMSC,采用氧誘導法制成OIR模型,持續(xù)高氧5 d后,BMSC組行玻璃體內(nèi)注射大鼠BMSC。移植后7 d,采用視網(wǎng)膜鋪片法、蘇木精-伊紅染色(HE)法檢測BMSC移植對OIR新生大鼠視網(wǎng)膜新生血管的影響;免疫組化法結(jié)合Western blot法觀察BMSC對OIR新生大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α及VEGF蛋白表達的影響。結(jié)果視網(wǎng)膜鋪片結(jié)果示正常對照組視網(wǎng)膜血管排列整齊,而OIR組血管排列紊亂,可見大片無灌注區(qū),BMSC組僅可見大血管稍迂曲,血管排列較規(guī)整,無灌注區(qū)明顯減少;HE染色發(fā)現(xiàn)OIR組視網(wǎng)膜內(nèi)界膜可見大量新生血管及視網(wǎng)膜前新生血管細胞(Pre-RNC),BMSC組視網(wǎng)膜內(nèi)界膜新生血管明顯減少,且pre-RNC數(shù)顯著少于OIR組(P0.01);免疫組織化學結(jié)果示OIR組HIF-1α陽性與VEGF陽性細胞數(shù)顯著多于正常對照組,而BMSC組HIF-1α陽性與VEGF陽性細胞數(shù)均顯著少于OIR組(P0.05)。Western blot結(jié)果示OIR組HIF-1α與VEGF蛋白表達顯著高于正常對照組,而BMSC組HIF-1α與VEGF蛋白表達顯著低于OIR組(P0.01)。結(jié)論 BMSC玻璃體內(nèi)移植可減輕OIR新生大鼠視網(wǎng)膜新生血管的形成,其機制可能與其抑制HIF-1α及VEGF蛋白的表達有關(guān)。
【圖文】:

血管,視網(wǎng)膜,鋪片,新生血管形成


α陽性細胞,且顯著多于正常對照組(P<0.05);BMSC組HIF-1α陽性細胞數(shù)明顯少于OIR組(P<0.05),但仍多于正常對照組(P<0.05)。見表1,圖2。表1各組大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α陽性與VEGF陽性細胞數(shù)比較(x±s,個/mm2)組別nHIF-1α陽性細胞數(shù)VEGF陽性細胞數(shù)正常對照組89.0±1.325.0±3.2OIR組856.0±2.9a81.0±4.8aBMSC組839.0±2.4a,b53.0±3.9a,bF值858.4388.0P值<0.001<0.001注:a示與正常對照組比較,P<0.05;b示與OIR組比較,P<0.05。視網(wǎng)膜鋪片正常對照組OIR組BMSC組蘇木精-伊紅染色圖1各組大鼠視網(wǎng)膜新生血管形成情況比較各組視網(wǎng)膜鋪片結(jié)果示(×200):正常對照組可見血管密集,分布均勻;OIR組可見毛細血管閉塞,大片無灌注區(qū),血管較雜亂,分布不均勻;BMSC組血管稍迂曲,無灌注區(qū)少于OIR組,新生血管數(shù)少于OIR組,血管排列較OIR組整齊。各組蘇木精-伊紅染色結(jié)果示(×400):正常對照組可見極少量新生血管;OIR組可見較多雜亂的新生血管;BMSC組亦可見新生血管,分布較不均勻,新生血管數(shù)較OIR組明顯減少,分布較OIR組均勻。箭頭所示為新生血管。圖2各組大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α及VEGF表達結(jié)果(免疫組化,×400)HIF-1α陽性細胞核呈棕黃色,VEGF陽性細胞呈棕黃色。正常對照組視網(wǎng)膜偶見極少量HIF-1α陽性及VEGF陽性細胞,OIR組視網(wǎng)膜可見較多的HIF-1α陽性及VEGF陽性細胞,BMSC組視網(wǎng)膜可見HIF-1α陽性及VEGF陽性細胞,,但明顯少于OIR組。HIF-1αVEGF正常對照組OIR組BMSC組

棕黃色,VEGF表達,免疫組化,視網(wǎng)膜


第19卷第11期2017年11月中國當代兒科雜志ChinJContempPediatrVol.19No.11Nov.2017·1205·2.3各組大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α、VEGF免疫組織化學結(jié)果免疫組織化學結(jié)果示HIF-1α陽性細胞核染為棕黃色,正常對照組視網(wǎng)膜僅見少量HIF-1α陽性細胞;OIR組可見大量HIF-1α陽性細胞,且顯著多于正常對照組(P<0.05);BMSC組HIF-1α陽性細胞數(shù)明顯少于OIR組(P<0.05),但仍多于正常對照組(P<0.05)。見表1,圖2。表1各組大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α陽性與VEGF陽性細胞數(shù)比較(x±s,個/mm2)組別nHIF-1α陽性細胞數(shù)VEGF陽性細胞數(shù)正常對照組89.0±1.325.0±3.2OIR組856.0±2.9a81.0±4.8aBMSC組839.0±2.4a,b53.0±3.9a,bF值858.4388.0P值<0.001<0.001注:a示與正常對照組比較,P<0.05;b示與OIR組比較,P<0.05。視網(wǎng)膜鋪片正常對照組OIR組BMSC組蘇木精-伊紅染色圖1各組大鼠視網(wǎng)膜新生血管形成情況比較各組視網(wǎng)膜鋪片結(jié)果示(×200):正常對照組可見血管密集,分布均勻;OIR組可見毛細血管閉塞,大片無灌注區(qū),血管較雜亂,分布不均勻;BMSC組血管稍迂曲,無灌注區(qū)少于OIR組,新生血管數(shù)少于OIR組,血管排列較OIR組整齊。各組蘇木精-伊紅染色結(jié)果示(×400):正常對照組可見極少量新生血管;OIR組可見較多雜亂的新生血管;BMSC組亦可見新生血管,分布較不均勻,新生血管數(shù)較OIR組明顯減少,分布較OIR組均勻。箭頭所示為新生血管。圖2各組大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α及VEGF表達結(jié)果(免疫組化,×400)HIF-1α陽性細胞核呈棕黃色,VEGF陽性細胞呈棕黃色。正常對照組視網(wǎng)膜偶見極少量HIF-1α陽性及VEGF陽性細胞,OIR組視網(wǎng)膜可見較多的HIF-1α陽性及VEGF陽性細胞,BMSC組視網(wǎng)膜可見HIF-1α陽性及VEGF陽性細胞,但明顯少于OIR組。HI

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6 早報記者 陳斯斯;視網(wǎng)膜病變成早產(chǎn)兒致盲主因[N];東方早報;2012年

7 記者 郭靜 通訊員 盧

本文編號:2562618


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