【摘要】：目的:探討IL-35在變應(yīng)性鼻炎中對(duì)炎癥反應(yīng)和T細(xì)胞反應(yīng)性的作用及其機(jī)制。方法:選取2012年1月至2016年1月間本院收治的37例變應(yīng)性鼻炎患者(觀察組)及35例行變應(yīng)性鼻炎過敏原檢測(cè)后排除變應(yīng)性鼻炎的健康志愿者(對(duì)照組)為研究對(duì)象,采集觀察組和對(duì)照組的外周血液,ELISA檢測(cè)患者血清中IL-35水平。建立小鼠變應(yīng)性鼻炎動(dòng)物模型,收集小鼠外周血液,ELISA檢測(cè)小鼠血清中IL-35及Ig E水平。小鼠鼻切片后組織染色檢測(cè)嗜酸性粒細(xì)胞;分離小鼠脾臟細(xì)胞后加入卵清蛋白抗原,加入或不加入IL-35至培養(yǎng)基中,檢測(cè)卵清蛋白特異性T細(xì)胞反應(yīng)性;ELISA檢測(cè)T細(xì)胞培養(yǎng)上清中細(xì)胞因子IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IL-13,IL-17、IL-23、IL-27以及TNF-α含量;熒光定量PCR(Real-time PCR)檢測(cè)培養(yǎng)T細(xì)胞中IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IL-13、IL-17、IL-23、IL-27以及TNF-αmRNA表達(dá)水平;Western blot檢測(cè)培養(yǎng)T細(xì)胞JNK、Erk1/2及p38信號(hào)途徑的激活水平。結(jié)果:觀察組血清IL-35水平顯著低于對(duì)照組(P0.05);變應(yīng)性鼻炎組小鼠組織染色結(jié)果顯示嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)數(shù)量顯著高于正常組(P0.05),而血清IL-35水平則顯著低于正常小鼠(P0.05);卵清蛋白特異性T細(xì)胞反應(yīng)性檢測(cè)顯示IL-35能顯著抑制其反應(yīng)性;ELISA及Real-time PCR結(jié)果均顯示,IL-35能夠顯著下調(diào)IL-4、IL-5、IL-13、IL-17、IL-23及TNF-α的表達(dá),上調(diào)IL-2、IL-10及IL-27的表達(dá)。Western blot結(jié)果顯示,IL-35能夠顯著抑制卵清蛋白特異性T細(xì)胞中JNK、Erk1/2及p38信號(hào)途徑的激活水平。結(jié)論:IL-35能夠調(diào)控炎癥反應(yīng)中的炎癥因子表達(dá)和T細(xì)胞的反應(yīng)性,從而減輕變應(yīng)性鼻炎,其機(jī)制可能是通過調(diào)控JNK、Erk1/2及p38信號(hào)途徑的激活水平。
【圖文】：

⑾茨?5min×3次)、5%BSA封閉，封閉結(jié)束后洗膜(5min×3次)，孵育單克隆一抗，4℃冰箱過夜，然后再次洗膜(5min×3次)，加入HＲP小鼠抗兔二抗孵育，37℃低速搖床1h，，結(jié)束后洗膜(5min×3次)，然后配置化學(xué)發(fā)光試劑，ECL法曝光。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有實(shí)驗(yàn)均單獨(dú)重復(fù)3次，所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0軟件進(jìn)行分析，組件比較采用單因素方差分析，P＜0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1IL-35在AＲ患者中的表達(dá)AＲ患者外周血液中IL-35的表達(dá)結(jié)果見圖1，結(jié)果顯示，AＲ患者外周血液中IL-35表達(dá)顯著低于正常健康人(P＜0.001)。圖1IL-35在AＲ患者外周血液中的表達(dá)Fig．1ExpressionofIL-35inperipheralbloodofpatientswithAＲNote:*.P＜0.001.圖2AＲ小鼠鼻組織切片中嗜酸性粒細(xì)胞檢測(cè)及外周血液中IgE及IL-35水平檢測(cè)Fig．2DetectionofeosinophilsinnasaltissuesofAＲmice，andexpressionofIgEandIL-35inperiph-eralbloodofAＲmiceNote:*.P＜0.001.·1388·中國(guó)免疫學(xué)雜志2017年第33卷

，加入HＲP小鼠抗兔二抗孵育，37℃低速搖床1h，結(jié)束后洗膜(5min×3次)，然后配置化學(xué)發(fā)光試劑，ECL法曝光。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有實(shí)驗(yàn)均單獨(dú)重復(fù)3次，所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0軟件進(jìn)行分析，組件比較采用單因素方差分析，P＜0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1IL-35在AＲ患者中的表達(dá)AＲ患者外周血液中IL-35的表達(dá)結(jié)果見圖1，結(jié)果顯示，AＲ患者外周血液中IL-35表達(dá)顯著低于正常健康人(P＜0.001)。圖1IL-35在AＲ患者外周血液中的表達(dá)Fig．1ExpressionofIL-35inperipheralbloodofpatientswithAＲNote:*.P＜0.001.圖2AＲ小鼠鼻組織切片中嗜酸性粒細(xì)胞檢測(cè)及外周血液中IgE及IL-35水平檢測(cè)Fig．2DetectionofeosinophilsinnasaltissuesofAＲmice，andexpressionofIgEandIL-35inperiph-eralbloodofAＲmiceNote:*.P＜0.001.·1388·中國(guó)免疫學(xué)雜志2017年第33卷
【作者單位】： 江漢大學(xué)附屬醫(yī)院(武漢市第六醫(yī)院)耳鼻咽喉科;江漢大學(xué)附屬醫(yī)院(武漢市第六醫(yī)院)變態(tài)反應(yīng)科;
【分類號(hào)】：R765.21


本文編號(hào)：2550579