【摘要】：目的:探討IL-35在變應性鼻炎中對炎癥反應和T細胞反應性的作用及其機制。方法:選取2012年1月至2016年1月間本院收治的37例變應性鼻炎患者(觀察組)及35例行變應性鼻炎過敏原檢測后排除變應性鼻炎的健康志愿者(對照組)為研究對象,采集觀察組和對照組的外周血液,ELISA檢測患者血清中IL-35水平。建立小鼠變應性鼻炎動物模型,收集小鼠外周血液,ELISA檢測小鼠血清中IL-35及Ig E水平。小鼠鼻切片后組織染色檢測嗜酸性粒細胞;分離小鼠脾臟細胞后加入卵清蛋白抗原,加入或不加入IL-35至培養(yǎng)基中,檢測卵清蛋白特異性T細胞反應性;ELISA檢測T細胞培養(yǎng)上清中細胞因子IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IL-13,IL-17、IL-23、IL-27以及TNF-α含量;熒光定量PCR(Real-time PCR)檢測培養(yǎng)T細胞中IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IL-13、IL-17、IL-23、IL-27以及TNF-αmRNA表達水平;Western blot檢測培養(yǎng)T細胞JNK、Erk1/2及p38信號途徑的激活水平。結果:觀察組血清IL-35水平顯著低于對照組(P0.05);變應性鼻炎組小鼠組織染色結果顯示嗜酸性粒細胞浸潤數(shù)量顯著高于正常組(P0.05),而血清IL-35水平則顯著低于正常小鼠(P0.05);卵清蛋白特異性T細胞反應性檢測顯示IL-35能顯著抑制其反應性;ELISA及Real-time PCR結果均顯示,IL-35能夠顯著下調IL-4、IL-5、IL-13、IL-17、IL-23及TNF-α的表達,上調IL-2、IL-10及IL-27的表達。Western blot結果顯示,IL-35能夠顯著抑制卵清蛋白特異性T細胞中JNK、Erk1/2及p38信號途徑的激活水平。結論:IL-35能夠調控炎癥反應中的炎癥因子表達和T細胞的反應性,從而減輕變應性鼻炎,其機制可能是通過調控JNK、Erk1/2及p38信號途徑的激活水平。
【圖文】：

⑾茨?5min×3次)、5%BSA封閉，封閉結束后洗膜(5min×3次)，孵育單克隆一抗，4℃冰箱過夜，然后再次洗膜(5min×3次)，加入HＲP小鼠抗兔二抗孵育，37℃低速搖床1h，，結束后洗膜(5min×3次)，然后配置化學發(fā)光試劑，ECL法曝光。1.3統(tǒng)計學分析所有實驗均單獨重復3次，所得實驗數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0軟件進行分析，組件比較采用單因素方差分析，P＜0.05表示有統(tǒng)計學意義。2結果2.1IL-35在AＲ患者中的表達AＲ患者外周血液中IL-35的表達結果見圖1，結果顯示，AＲ患者外周血液中IL-35表達顯著低于正常健康人(P＜0.001)。圖1IL-35在AＲ患者外周血液中的表達Fig．1ExpressionofIL-35inperipheralbloodofpatientswithAＲNote:*.P＜0.001.圖2AＲ小鼠鼻組織切片中嗜酸性粒細胞檢測及外周血液中IgE及IL-35水平檢測Fig．2DetectionofeosinophilsinnasaltissuesofAＲmice，andexpressionofIgEandIL-35inperiph-eralbloodofAＲmiceNote:*.P＜0.001.·1388·中國免疫學雜志2017年第33卷

，加入HＲP小鼠抗兔二抗孵育，37℃低速搖床1h，結束后洗膜(5min×3次)，然后配置化學發(fā)光試劑，ECL法曝光。1.3統(tǒng)計學分析所有實驗均單獨重復3次，所得實驗數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0軟件進行分析，組件比較采用單因素方差分析，P＜0.05表示有統(tǒng)計學意義。2結果2.1IL-35在AＲ患者中的表達AＲ患者外周血液中IL-35的表達結果見圖1，結果顯示，AＲ患者外周血液中IL-35表達顯著低于正常健康人(P＜0.001)。圖1IL-35在AＲ患者外周血液中的表達Fig．1ExpressionofIL-35inperipheralbloodofpatientswithAＲNote:*.P＜0.001.圖2AＲ小鼠鼻組織切片中嗜酸性粒細胞檢測及外周血液中IgE及IL-35水平檢測Fig．2DetectionofeosinophilsinnasaltissuesofAＲmice，andexpressionofIgEandIL-35inperiph-eralbloodofAＲmiceNote:*.P＜0.001.·1388·中國免疫學雜志2017年第33卷
【作者單位】： 江漢大學附屬醫(yī)院(武漢市第六醫(yī)院)耳鼻咽喉科;江漢大學附屬醫(yī)院(武漢市第六醫(yī)院)變態(tài)反應科;
【分類號】：R765.21


本文編號：2550579