【摘要】：第一部分微波角膜成形術(shù)相關(guān)參數(shù)屈光效應(yīng)觀察 第一節(jié)器官培養(yǎng)法保存角膜一與前房模型建立 目的：探討器官培養(yǎng)法保存角膜與人工前房應(yīng)用于建立適合微波角膜成形術(shù)研究的角膜材料的可行性。 方法：12片供體人鞏膜角膜片,隨機(jī)分為A、B兩組；A組為實(shí)驗(yàn)組,保存1周,保存條件為37℃,5%C0：,保存液為MEM培養(yǎng)液,加入2%胎牛血清；B組為空白對照組；實(shí)驗(yàn)組于實(shí)驗(yàn)開始時、保存7天時,A超、角膜內(nèi)皮鏡、角膜地形圖分別檢查角膜中央厚度、角膜內(nèi)皮細(xì)胞計數(shù)、角膜內(nèi)皮細(xì)胞面積、差異指數(shù)、角膜前、后表面曲率,計算內(nèi)皮細(xì)胞丟失率。實(shí)驗(yàn)組與對照組分別行細(xì)胞骨架(肌動蛋白)免疫熒光染色、細(xì)胞核吖啶橙免疫熒光染色觀察角膜上皮細(xì)胞以及內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組保存7天時角膜透明。實(shí)驗(yàn)開始時與保存7天時內(nèi)皮細(xì)胞計數(shù)分別為2714±372個／mm2、2562±406個／mm2,內(nèi)皮細(xì)胞面積分別為375±56μ m2、399±61μ m2,差異指數(shù)分別為0.22±0.075、0.26±0.010,內(nèi)皮細(xì)胞丟失率5.60%±4.36,角膜中央厚度分別為538±43μ m、569±31μ m,角膜前表面曲率分別為47.70±2.29D、48.46±2.02D,角膜后表面曲率分別為-(6.76±0.70)D、(6.80±0.45)D。角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度、內(nèi)皮細(xì)胞面積、差異指數(shù)、角膜中央厚度以及角膜前表面曲率差異有統(tǒng)計學(xué)意義。角膜后表面曲率差異無統(tǒng)計學(xué)意義。角膜上皮細(xì)胞及角膜內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)實(shí)驗(yàn)組與對照組無明顯差異。 結(jié)論：建立符合微波角膜成形術(shù)實(shí)驗(yàn)研究要求的角膜材料具有可行性。 第二節(jié)微波角膜成形術(shù)屈光效應(yīng)研究 目的：探索微波角膜成形術(shù)相關(guān)參數(shù)及術(shù)后動態(tài)變化特點(diǎn)。 方法：40片供體人鞏膜角膜片,隨機(jī)分為4組,每組各10片,分別按照A組100W/100ms,B組150W/200SM,C組150W/500ms,D組150W/600ms,行微波角膜成形術(shù)。術(shù)前,術(shù)后7天行角膜地形圖檢查,術(shù)后30min,1天,3天,5天,7天行倒置相差顯微鏡檢查。 結(jié)果：術(shù)后第7天,角膜前表面曲率較術(shù)前變平坦,與術(shù)前差值分別為：A組1.25±0.72D,B組2.07±0.98D,C組5.43±1.22D,D組6.37±3.58D,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。倒置相差顯微鏡觀察可見A組術(shù)后第3天8片角膜完全恢復(fù)透明,第5天10片恢復(fù)透明；B組第3天5片恢復(fù)透明,第5天10片恢復(fù)透明；C組第3天無角膜恢復(fù)透明,第5天9片恢復(fù)透明,第7天仍有1片角膜未能完全恢復(fù)透明；D組第3天無角膜恢復(fù)透明,第5天及第7天均為8片角膜恢復(fù)透明。 結(jié)論：微波角膜成形術(shù)離體最佳參數(shù),在功率100W至150W,作用時間100ms至600ms間,可使角膜前表面變平坦。 第二部分膠原交聯(lián)參數(shù)對角膜細(xì)胞活力的影響 目的：探討核黃素-紫外線交聯(lián)中氣體介質(zhì)、交聯(lián)劑溶液濃度以及紫外線作用參數(shù),包括功率、時長和累積量,對角膜基質(zhì)細(xì)胞、角膜內(nèi)皮細(xì)胞活力的影響。 方法：原代培養(yǎng)人角膜基質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞,MTT法分別測定不同條件下兩種細(xì)胞的活力。 結(jié)果：空氣、氧氣、氮?dú)馊N氣體介質(zhì)對角膜基質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞活力無明顯影響,核黃素溶液不同濃度(空白對照、0.025%、10%)間角膜基質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞活力比較無顯著差異,紫外線累積量獨(dú)立于作用時長、功率影響角膜基質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞活力。 結(jié)論：紫外線累積量在0至4.05mJ/cm2范圍內(nèi),照射功率與照射時間的變化對角膜基質(zhì)細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞活力影響不明顯,氣體介質(zhì)及交聯(lián)劑溶液濃度影響不明顯。
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R779.6

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2528085