【摘要】：目的 探討硫化氫對實驗性大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷（retinalischemi-reperfusioninjury,RIRI)后細(xì)胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的影響。 方法 通過前房灌注升高眼壓的方法，制作大鼠實驗性視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷（RIRI）的模型。以硫氫化鈉（NaHS）作為硫化氫的供體。將54只正常無眼疾的SD大鼠隨機(jī)分為正常組、缺血再灌注模型組（IR組）和硫氫化鈉干預(yù)組（IR+NaHS組）。后兩組再各分為再灌注后6h、24h、48h、72h四個時間段。光鏡觀察視網(wǎng)膜組織形態(tài)學(xué)變化，采用DNA原位末端標(biāo)記（terminal dUTP nick endlabeling,TUNEL）法定位凋亡的視網(wǎng)膜細(xì)胞；免疫組織化學(xué)染色法檢測視網(wǎng)膜組織中Bcl-2、Bax蛋白的表達(dá)變化。 結(jié)果 正常組大鼠視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)清晰完整，，細(xì)胞排列整齊，未見凋亡細(xì)胞。缺血再灌注組隨再灌注時間延長，視網(wǎng)膜的損害逐漸加重，內(nèi)層開始出現(xiàn)水腫、間質(zhì)逐漸變薄并且層次開始不清，RGC層和內(nèi)核層細(xì)胞排列疏松而紊亂。部分細(xì)胞核固縮、溶解、壞死、胞漿空泡樣變，48h后水腫減輕，72h后視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)正常，視網(wǎng)膜較前變薄。IR+NaHS組視網(wǎng)膜組織學(xué)變化趨勢與IR組相似，但視網(wǎng)膜水腫、間質(zhì)變薄程度、細(xì)胞丟失、核固縮及空泡樣變均有明顯改善。TUNEL檢測于再灌注6h可觀察到凋亡細(xì)胞，隨著再灌注時間延長凋亡細(xì)胞逐漸增加，24h細(xì)胞凋亡達(dá)高峰，48h后凋亡細(xì)胞逐漸減少，72h仍然有陽性表達(dá)。Bcl-2、Bax蛋白在正常視網(wǎng)膜組織中幾乎不表達(dá)，Bcl-2蛋白在缺血再灌注6h組視網(wǎng)膜中有較高表達(dá)，全層均可見，再灌注24h表達(dá)明顯下降，再灌注48h表達(dá)繼續(xù)下降，再灌注72h仍有表達(dá)。Bax蛋白在缺血再灌注6h組視網(wǎng)膜中開始表達(dá)，再灌注24h表達(dá)達(dá)到高峰，再灌注48h表達(dá)明顯降低，72h組表達(dá)進(jìn)一步降低，但仍呈現(xiàn)高表達(dá)。硫氫化鈉干預(yù)組，各觀察指標(biāo)變化趨勢基本與缺血再灌注組相似，凋亡指數(shù)及Bax蛋白陽性表達(dá)均較缺血再灌注組明顯下降，Bcl-2蛋白陽性表達(dá)均較缺血再灌注組明顯升高，兩組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論 缺血再灌注過程主要對視網(wǎng)膜內(nèi)層造成損害，Bcl-2和Bax參與了視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的形成，硫化氫可上調(diào)Bcl-2蛋白及下調(diào)Bax蛋白在視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷中的表達(dá)、升高Bcl-2/Bax比值從而抑制細(xì)胞凋亡，來實現(xiàn)對大鼠視網(wǎng)膜缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。
【圖文】：

17圖 2（IR6h 組，視網(wǎng)膜 HE 染色， 圖 6（IR+NaHS6h 組，視網(wǎng)膜 HE 染×400） 色，×400）視網(wǎng)膜水腫，叢狀層疏松增厚，GCL 視網(wǎng)膜水腫程度、空泡樣變較 IR 組有所改善和 INL 細(xì)胞偶有空泡樣變

17圖 2（IR6h 組，視網(wǎng)膜 HE 染色， 圖 6（IR+NaHS6h 組，視網(wǎng)膜 HE 染×400） 色，×400）視網(wǎng)膜水腫，叢狀層疏松增厚，GCL 視網(wǎng)膜水腫程度、空泡樣變較 IR 組有所改善和 INL 細(xì)胞偶有空泡樣變
【學(xué)位授予單位】：遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R774.1

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本文編號：2516361