【摘要】：一、急性原發(fā)性閉角型青光眼患者外周血內(nèi)皮祖細胞數(shù)量變化 目的：觀察急性原發(fā)性閉角型青光眼(acute primary angle-closure glaucoma, APACG)患者外周血內(nèi)皮祖細胞(endothelial progenitor cells, EPCs)數(shù)量的變化規(guī)律,探討EPCs在APACG患者眼壓升高導致視神經(jīng)損傷中的作用。 方法：采用隊列研究設計,試驗為前瞻性研究。選取天津醫(yī)科大學總醫(yī)院眼科確診的APACG患者30例為APACG組,健康體檢者20例為正常對照組。所有入選者取外周靜脈血2ml,經(jīng)反復離心過濾后,通過流式細胞儀鑒定EPCs,觀察APACG患者外周血EPCs數(shù)量的變化,并對其相關(guān)影響因素(視神經(jīng)損害程度、經(jīng)藥物治療后眼壓、空腹血糖、血脂、青光眼病程及有無心血管疾病)進行分析。 結(jié)果：兩組患者間性別、年齡、血管危險因素、血液生化指標的差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05),APACG組患者眼壓明顯高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.001)。外周血EPCs為CD34、CD133雙陽性反應,APACG組及正常對照組外周血EPCs數(shù)量分別為(48±22)個/ml和(65±20)個/ml,兩組間差異有統(tǒng)計學意義(P=0.004)。l期與3期視神經(jīng)損害者外周血EPCs數(shù)量分別為(60±19)個/ml和(34±7)個/ml,差異有統(tǒng)計學意義(Z=-3.015,P=0.002)。APACG組患者外周血EPCs數(shù)量與藥物治療后的平均眼壓在一定范圍內(nèi)呈負相關(guān)(r=-0.835,P0.05),與空腹血糖水平、血脂水平、青光眼病程間均無明顯相關(guān)性(r=0.343,P=0.227：r=-0.203,P=0.419；r=0.198,P=0.610)。APACG組有心血管疾病與無心血管疾病患者間外周血EPCs計數(shù)分別為(56±22)個/ml和(35±15)個／ml,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.005)。 結(jié)論：APACG患者外周血EPCs數(shù)量較正常人明顯減少,提示青光眼發(fā)生發(fā)展的病理因素對外周血EPCs數(shù)量有一定影響。 二、大鼠高眼壓模型視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞凋亡及外周血內(nèi)皮祖細胞數(shù)量的變化 目的：觀察大鼠高眼壓模型外周血EPCs數(shù)量及視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(Retinal ganglion cells, RGCs)凋亡的變化,探索EPCs在高眼壓視神經(jīng)損傷修復中的作用。 方法：采用多波長激光532nm綠光光凝角鞏膜緣靜脈和上鞏膜靜脈的方法建立大鼠高眼壓模型,單眼造模。將100只大鼠隨機分為正常對照組20只、激光對照組(眼壓正常)30只和高眼壓模型組50只。對正常對照組20只、激光對照組制備成功后3天、7天、3周時(每組10只大鼠)及高眼壓模型組大鼠在造模其與EPCs數(shù)量變化的關(guān)系,探討HIF-lα、VEGF-A、SDF-1對EPCs動員、招募的影響以及EPCs對血管內(nèi)皮功能的影響。 方法：將190只大鼠隨機分為正常對照組20只、激光對照組(眼壓正常)20只和高眼壓模型組150只。正常對照組10只、激光對照組10只及高眼壓模型組在造模成功后3天、7天、3周、2月、3月時(每個時間點20只大鼠),行股動脈放血10ml,離心后取血清,ELISA技術(shù)檢測外周血VEGF-A、SDF-1、NO及ET-1水平。正常對照組10只、激光對照組10只及高眼壓模型組在造模成功后3天、7天、3周、2月、3月時(每個時間點10只大鼠),脫頸處死大鼠,摘除眼球取視網(wǎng)膜組織,Western blot技術(shù)檢測視網(wǎng)膜HIF-lα的蛋白水平。 結(jié)果： (1)HIF-1α蛋白在正常視網(wǎng)膜中呈低濃度表達,眼壓升高3天表達明顯上升,7天時達到高峰,隨后有所下降,但仍高于正常對照組。 (2)正常對照組、大鼠高眼壓模型3天、7天、3周、2月、3月組外周血VEGF-A為84.89±4.89ng/L,59.24+6.37ng/L,58.36±5.68ng/L,54.98±5.91ng/L,59.99±5.12ng/L,64.78±5.94ng/L。與正常對照組相比，，眼壓升高外周血VEGF-A均明顯降低(P0.001)。 (3)正常對照組、大鼠高眼壓模型3天、7天、3周、2月、3月組外周血SDF-1為229.43±11.61pg/ml,218.34±11.33pg/ml,298.51±32.02pg/ml,294.16±11.90pg/ml,301.10±14.61pg/ml,307.49±20.46pg/ml。與正常對照組及眼壓升高3天相比,眼壓升高7天、3周、2月、3月外周血SDF-1均明顯升高(P0.001)。 (4)正常對照組、大鼠高眼壓模型3天、7天、3周、2月、3月組外周血NO為36.74±5.19μmol/L,32.87±4.30μmol/L,45.67±4.48μmo1/L,41.29±5.00μmol/L,41.04±5.15μmo1/L,41.45±4.82μmol/L。與正常對照組相比,眼壓升高3天外周血NO顯著降低(P=0.038),眼壓升高7天、3周、2月、3月外周血NO明顯升高(P0.05)。 (5)正常對照組、大鼠高眼壓模型3天、7天、3周、2月、3月組外周血ET-1為72.73±6.41ng/L,57.96±4.42n/L,70.86±12.14n/L,77.37±9.95n/L,76.57±5.85n/L,77.41±7.43n/L。與正常對照組相比,眼壓升高3天外周血ET-1顯著降低(P0.001)。 結(jié)論：眼壓升高使視網(wǎng)膜組織缺血、缺氧,HIF-lα表達升高,促進骨髓EPCs的動員,外周血VEGF-A水平降低,SDF-1水平升高,進而促進EPCs向缺血、缺氧的視網(wǎng)膜組織轉(zhuǎn)移,外周血EPCs、NO及ET-1呈時間依賴性變化。提示HIF-1α、VEGF-A、SDF-1可能通過參與EPCs的動員和遷移,在高眼壓視神經(jīng)損傷修復過程中發(fā)揮作用,并對血管內(nèi)皮功能產(chǎn)生影響。 四、辛伐他汀對大鼠高眼壓模型RGCs凋亡、外周血EPCs數(shù)量及視網(wǎng)膜HIF-lα外周血及視網(wǎng)膜VEGF-A、SDF-1、NO、ET-1的影響 目的：觀察辛伐他汀對大鼠高眼壓模型眼壓、RGCs凋亡、外周血EPCs數(shù)量及視網(wǎng)膜HIF-lα、外周血及視網(wǎng)膜VEGF-A、SDF-1、NO、ET-1的影響,探索辛伐他汀促進EPCs的動員在青光眼視神經(jīng)損傷修復過程中的作用。 方法：將100只大鼠隨機分為正常對照組(CON,10只)、高眼壓模型組(OH,30只)、高眼壓辛伐他汀干預組(SV,30只)和高眼壓生理鹽水組(NS,30只)。高眼壓辛伐他汀干預組為高眼壓造模成功后,隨機選取大鼠30只,以20mg/kg辛伐他汀溶于1ml生理鹽水進行灌胃。高眼壓生理鹽水組為高眼壓造模成功后,隨機選取大30只,以1ml/只／天進行灌胃。SV組于開始藥物干預后3天、7天、3周檢測眼壓1次,行內(nèi)眥靜脈取血1.5ml采用流式細胞儀測定外周血EPCs數(shù)量,3周時脫頸處死后取右眼(6眼)進行視網(wǎng)膜HE染色、凋亡細胞檢測以及免疫組織化學法Bal-2、Bax檢測。NS組于3天、7天、3周檢測眼壓1次,行內(nèi)眥靜脈取血1.5m1測定外周血EPCs數(shù)量。 將160只大鼠隨機分為正常對照組(CON,30只)、高眼壓模型組(OH,50只)、高眼壓辛伐他汀干預組(SV,50只)和高眼壓生理鹽水組(NS,30只)。CON組10只、OH組20只、SV組20只和NS組10只(共60只)于開始藥物干預后3周行股動脈放血10ml,離心后取血清,采用ELISA技術(shù)檢測外周血VEGF-A、SDF-1、NO及ET-1的水平。CON組10只、OH組10只、SV組10只和NS組10只(共40只)于開始藥物干預后3周脫頸處死動物,摘除眼球,采用western blot技術(shù)檢測視網(wǎng)膜HIF-1α蛋白水平。CON組10只、OH組20只、SV組20只和NS組10只(共60只)于開始藥物干預后3周脫頸處死動物,摘除眼球,采用ELISA技術(shù)檢測視網(wǎng)膜VEGF-A、SDF-1、NO及ET-1的水平。 結(jié)果： (1)高眼壓模型組于眼壓升高3天、7天、3周的平均眼壓分別為37.4±1.5mmHg,31.8±4.1mmHg,25.9±2.2mmHg;高眼壓辛伐他汀干預組3天、7天、3周的平均眼壓分別為38.0±3.7mmHg,33.9±2.9mmHg,24.9±3.2mmHg.辛伐他汀對大鼠眼壓未表現(xiàn)出顯著影響(P0.05)。 (2)高眼壓模型組于眼壓升高后3天、7天、3周外周血EPCs數(shù)量分別為(121.3±22.4)、(81.3±23.7)、(46.1±15.8)個/ml；高眼壓辛伐他汀干預組3天、7天、3周外周血EPCs數(shù)量分別為(138.5±41.4)、(77.9±22.0)、(65.0±13.6)個/m1。服用辛伐他汀3天和3周外周血EPCs均較高眼壓模型組顯著升高(P0.05)。 (3)辛伐他汀干預組大鼠與高眼壓模型組相比,HE染色視網(wǎng)膜各層形態(tài)稍整齊；Bcl-2陽性細胞數(shù)未見明顯差異,Bax陽性細胞比例降低,TUNEL陽性細胞比例明顯降低。 (4)正常對照組、大鼠高眼壓模型組、高眼壓辛伐他汀干預組、高眼壓生理鹽水組外周血VEGF-A分別為83.75±4.76ng/L、53.47±5.36ng/L、80.35±8.62ng/L、54.29±5.28ng/L。與高眼壓模型組相比,辛伐他汀干預組外周血VEGF-A明顯升高(P0.001)。 正常對照組、大鼠高眼壓模型組、高眼壓辛伐他汀干預組、高眼壓生理鹽水組視網(wǎng)膜VEGF-A分別為43.43±5.33ng/L、23.54±5.38n/L、32.83±5.64ng/L、22.60±5.98ng/L。與高眼壓模型組相比,辛伐他汀干預組視網(wǎng)膜VEGF-A明顯升高(P0.001)。 (5)正常對照組、大鼠高眼壓模型組、高眼壓辛伐他汀干預組、高眼壓生理鹽水組外周血SDF-1分別為230.62±11.27pg/ml、296.28±12.14pg/ml、265.74±39.71pg/ml、291.72±12.21pg/ml。與高眼壓模型組相比,辛伐他汀干預組外周血SDF-1明顯降低(P=0.001)。 正常對照組、大鼠高眼壓模型組、高眼壓辛伐他汀干預組、高眼壓生理鹽水組SDF-1分別為227.41±18.38pg/ml、187.72±19.19pg/ml212.14±23.71pg/ml、185.63±19.26pg/ml。與高眼壓模型組相比,辛伐他汀干預組視網(wǎng)膜SDF-1明顯升高（P0.001)。 (6)正常對照組、大鼠高眼壓模型組、高眼壓辛伐他汀干預組、高眼壓生理鹽水組外周血NO分別為36.26±4.95μmo1/L、41.16±4.97μmol/L、44.31±4.14μmol/L、40.94±4.31μmol/L。與高眼壓模型組相比,辛伐他汀干預組外周血NO明顯升高(P=0.044)。 正常對照組、大鼠高眼壓模型組、高眼壓辛伐他汀干預組、高眼壓生理鹽水組視網(wǎng)膜NO分別為38.54±3.53μmol/L、32.20±3.74μmo1/L、30.52±3.94μmol/L、31.16±3.36μmo1/L。與高眼壓模型組相比,辛伐他汀干預組視網(wǎng)膜NO無顯著變化(P=0.159)。 (7)正常對照組、大鼠高眼壓模型組、高眼壓辛伐他汀干預組、高眼壓生理鹽水組外周血ET-1分別為72.68±6.35n/L、77.84±7.98n/L、87.62±5.49n/L、78.13±7.66ng/L。與高眼壓模型組相比,辛伐他汀干預組外周血ET-1明顯升高(P0.001)。 正常對照組、大鼠高眼壓模型組、高眼壓辛伐他汀干預組、高眼壓生理鹽水組視網(wǎng)膜ET-1分別為53.13±2.07ng/L、28.39±3.33ng/L、39.09±4.81n/L、28.20±2.65ng/L。與高眼壓模型組相比,辛伐他汀干預組視網(wǎng)膜ET-1明顯升高(P0.001)。 結(jié)論：辛伐他汀通過促進視網(wǎng)膜HIF-lα表達,提高外周血及視網(wǎng)膜VEGF-A水平,促進骨髓中EPCs動員入血,增加外周血EPCs數(shù)量；同時升高視網(wǎng)膜SDF-1水平,促進EPCs向缺血、缺氧的視網(wǎng)膜組織轉(zhuǎn)移,促進血管內(nèi)皮修復,減輕視網(wǎng)膜損害,減少視網(wǎng)膜細胞凋亡。提示辛伐他汀通過促進EPCs的動員對高眼壓視神經(jīng)損傷修復具有有益作用,并可能成為青光眼治療新的途徑。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R779.6

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李姝;高眼壓癥和青光眼患者角膜中央厚度的研究[J];中國中醫(yī)眼科雜志;2004年04期

2 陳延光;東洋醫(yī)學對高眼壓癥的研究[J];國外醫(yī)學.中醫(yī)中藥分冊;1997年04期

3 Akarsu C.,Yilmaz S. ,Taner P. ,Ergin A. ,齊翔云;比馬前列素對開角型青光眼或高眼壓癥患者眼部循環(huán)的影響[J];世界核心醫(yī)學期刊文摘.眼科學分冊;2005年04期

4 李超;李維娜;;高眼壓癥患者32例隨訪觀察[J];國際眼科雜志;2010年01期

5 劉義強;杜曉玲;;16例高眼壓癥患者臨床隨訪觀察[J];河南醫(yī)學研究;2011年02期

6 楊樺,蔣幼芹,吳振中;早期原發(fā)性開角型青光眼彩色圖形視網(wǎng)膜電圖的特征[J];中華眼科雜志;1996年04期

7 劉根長,劉寶琴,高素琴;白內(nèi)障后路摘除術(shù)后繼發(fā)高眼壓癥的臨床分析[J];家庭醫(yī)學;1997年08期

8 張文松,宋躍,張巍,楊隆艷,吳荒,周鴻雁,董雅儒;角膜中央厚度對高眼壓癥和開角型青光眼眼內(nèi)壓測量值的影響[J];中國實用眼科雜志;2001年08期

9 王仁容;嵇訓傳;劉淳詩;;高眼壓的視覺對比敏感度[J];眼科新進展;1989年02期

10 張喜成,何延政,李國英,劉勇;肢體缺血大鼠外周血內(nèi)皮祖細胞的培養(yǎng)與鑒定[J];中華實驗外科雜志;2004年07期

相關(guān)會議論文 前10條

1 陳鵬;朱初麟;程江濤;杜廷海;;中醫(yī)藥對內(nèi)皮祖細胞的影響[A];第二屆全國中西醫(yī)結(jié)合心血管病中青年論壇暨第二屆黃河心血管病防治論壇資料匯編[C];2011年

2 周音頻;黃嵐;宋耀明;武曉靜;晉軍;張坡;宋明寶;;粒細胞集落刺激因子動員骨髓促進損傷血管內(nèi)皮修復[A];中國心臟大會（CHC）2011暨北京國際心血管病論壇論文集[C];2011年

3 蔡紹皙;陳斯佳;于文娟;;針刺,作為物理刺激對內(nèi)皮祖細胞的動員作用[A];第十一次中國生物物理學術(shù)大會暨第九屆全國會員代表大會摘要集[C];2009年

4 李巍;王航;秦浙學;劉潔;黃嵐;;硫化氫對大鼠骨髓源內(nèi)皮祖細胞數(shù)量及生理學特性影響[A];中國心臟大會（CHC）2011暨北京國際心血管病論壇論文集[C];2011年

5 張坡;黃嵐;朱鮮陽;韓秀敏;;辛伐他汀對大鼠平滑肌祖細胞和內(nèi)皮祖細胞遷移的不同影響[A];中國心臟大會（CHC）2011暨北京國際心血管病論壇論文集[C];2011年

6 趙剛;宋明寶;于學軍;朱光旭;于世勇;董紅梅;康華利;黃嵐;;肝細胞生長因子對低密度脂蛋白損傷內(nèi)皮祖細胞功能的影響[A];第十三次全國心血管病學術(shù)會議論文集[C];2011年

7 張坡;黃嵐;朱鮮陽;韓秀敏;;辛伐他汀對大鼠平滑肌祖細胞和內(nèi)皮祖細胞遷移的不同影響[A];第十三次全國心血管病學術(shù)會議論文集[C];2011年

8 趙剛;宋明寶;于學軍;朱光旭;于世勇;董紅梅;康華利;黃嵐;;肝細胞生長因子對低密度脂蛋白損傷內(nèi)皮祖細胞功能的影響[A];中國心臟大會（CHC）2011暨北京國際心血管病論壇論文集[C];2011年

9 李巍;王航;秦浙學;劉潔;黃嵐;;硫化氫對大鼠骨髓源內(nèi)皮祖細胞數(shù)量及生理學特性影響[A];第十三次全國心血管病學術(shù)會議論文集[C];2011年

10 徐小勇;廉姜芳;葛世俊;周建慶;;大鼠骨髓內(nèi)皮祖細胞的中電導鈣離子激活鉀通道與容積敏感性氯離子通道[A];2011年浙江省心電生理與起搏學術(shù)年會論文匯編[C];2011年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 ;臺灣批準治療青光眼及高眼壓癥新藥[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導報;2001年

2 張曉;為什么要測眼壓[N];大眾衛(wèi)生報;2006年

3 陶海;高眼壓并不一定都是青光眼[N];家庭醫(yī)生報;2008年

4 北京大學第三醫(yī)院眼科中心 黃萍;特殊計算器 預測青光眼[N];健康報;2008年

5 高加林;謹防抗青光眼藥眼副作用[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2007年

6 吳楚香;怎樣調(diào)護急性高眼壓病人[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2007年

7 劉潔;Lumigan獲準作為開角型青光眼一線治療藥物[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2006年

8 湖南中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院 張健邋副教授;青光眼病人為何要查視野？[N];大眾衛(wèi)生報;2007年

9 陶海;青光眼患者規(guī)范用藥 減少不良反應[N];中國醫(yī)藥報;2008年

10 武警總醫(yī)院眼科 陶海;珍愛心靈窗戶 遠離青光眼[N];科技日報;2008年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 王s

本文編號：2473447