發(fā)布時(shí)間：2019-03-21 11:01

【摘要】：目的研究p16蛋白在鼻咽癌和正常鼻咽粘膜中的表達(dá)情況，分析p16基因甲基化與鼻咽癌分化及mRNA表達(dá)之間的關(guān)系。 方法48例鼻咽癌石蠟組織標(biāo)本均由兩位病理科醫(yī)師證實(shí)，正常鼻咽粘膜組織16例作為對照組，，首先通過免疫組織化學(xué)SP法檢測鼻咽癌和正常鼻咽粘膜組織中p16蛋白的表達(dá)情況，SPSS統(tǒng)計(jì)軟件分析鼻咽癌患者中p16蛋白表達(dá)與鼻咽癌的臨床病理特征之間的關(guān)系，研究p16蛋白在鼻咽癌發(fā)生發(fā)展中的作用；4例鼻咽癌活檢組織標(biāo)本和2例正常鼻咽粘膜活檢組織標(biāo)本，提取組織DNA和RNA后，采用甲基化特異性MSP-PCR技術(shù)檢測p16基因的啟動子甲基化狀態(tài)，采用RT-PCR檢測其相應(yīng)的mRNA表達(dá)水平，分析鼻咽癌中的p16基因啟動子甲基化狀態(tài)與其分化及mRNA表達(dá)之間的關(guān)系。 結(jié)果 1)鼻咽癌中p16蛋白表達(dá)的缺失率為70.8%(34/48)，鼻咽正常粘膜上皮中缺失率為37.5%(6/16)，鼻咽癌中p16蛋白缺失率明顯高于鼻咽正常粘膜上皮，差異有顯著性意義(P＜0.05)；p16蛋白表達(dá)缺失率在低分化鱗癌中為75.0%（30/40），在中分化鱗癌中為50.0%（4/8），兩者之間差異有顯著性意義(P＜0.05)。 2）p16蛋白表達(dá)與鼻咽癌臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及是否復(fù)發(fā)有關(guān)(P＜0.05)，而與年齡、性別無關(guān)(P＞0.05)。 3）2例正常鼻咽粘膜組織中，非甲基化MSP引物擴(kuò)增產(chǎn)物表達(dá)水平高，說明啟動子未甲基化（UM），mRNA表達(dá)水平最高；2例中分化鼻咽癌，非甲基化和甲基化MSP引物擴(kuò)增產(chǎn)物均有表達(dá)，說明啟動子為部分甲基化（PM），mRNA表達(dá)水平中等；2例低分化鼻咽癌，甲基化MSP引物擴(kuò)增產(chǎn)物表達(dá)水平高，說明啟動子完全甲基化（TM）， mRNA表達(dá)水平最低或缺失。 結(jié)論 1）鼻咽癌中p16蛋白表達(dá)缺失率明顯高于鼻咽正常粘膜上皮，且p16蛋白表達(dá)與鼻咽癌臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、分化程度及復(fù)發(fā)呈負(fù)相關(guān)。 2）p16基因啟動子高甲基化是鼻咽癌中p16基因表達(dá)缺失或下調(diào)的原因。
[Abstract]:Objective To study the expression of p16 protein in nasopharyngeal carcinoma and normal nasopharyngeal mucosa, and to analyze the relationship between the methylation of p16 gene and the differentiation of nasopharyngeal carcinoma and the expression of mRNA. Methods The expression of p16 protein in nasopharyngeal carcinoma and normal nasopharyngeal mucosa was first detected by immunohistochemical SP method in 48 cases of nasopharyngeal carcinoma. The relationship between the expression of p16 protein and the clinicopathological features of NPC was analyzed by SPSS statistical software. The role of p16 protein in the development of NPC was studied. The methylation status of p16 gene was detected by methylation-specific MSP-PCR, and its corresponding mRNA expression level was detected by RT-PCR. Department. Results 1) The deletion rate of p16 protein was 70.8% (34/48) in NPC and 37.5% (6/16) in the normal mucosa of nasopharyngeal carcinoma. The expression of p16 protein was 75.0% (30/40) in the low-differentiated squamous cell carcinoma and 50.0% (4/8) in the medium-differentiated squamous cell carcinoma (P <0.05). (2) The expression of p16 protein was related to the clinical stage, lymph node metastasis, distant metastasis and the recurrence of nasopharyngeal carcinoma (P <0.05), regardless of age and sex (P <0.05). P> 0.05).3) The expression of non-methylated MSP primer in 2 normal nasopharyngeal mucosa tissues was high, indicating that the promoter was not methylated (UM) and the level of mRNA expression was the highest; in 2 cases, NPC, non-methylated and methylated MSP were differentiated. The results showed that the promoter was partially methylated (PM), the mRNA expression level was medium, and the expression level of the amplified product was high in 2 cases of low-differentiated NPC and methylated MSP primer, indicating that the promoter was completely methylated (TM), mRNA, expression Conclusion 1) The expression of p16 protein in NPC is higher than that of the normal mucosa of the nasopharynx, and the expression of p16 protein is related to the clinical stage, lymph node metastasis and distant metastasis of NPC. Negative correlation between the degree of shift, the degree of differentiation and the recurrence.2) The high methylation of the p16 gene promoter was in NPC.
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R739.63

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6 馬

本文編號：2444874