【摘要】：研究背景翼狀胬肉是常見的眼表疾病之一,國內外文獻關于翼狀胬肉的流行病學研究顯示患病率0.3%-7.46%不等。關于該病的發(fā)病機制目前尚未完全明確,臨床治療以手術切除為主,但術后復發(fā)率較高,可達20%-40%。許多科學家對其發(fā)病機制提出了多種解釋,創(chuàng)立了多種學說,但尚未得到公認。據文獻報道,基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMPs)與翼狀胬肉的發(fā)病機制有關。MMPs是一類能降解細胞外基質(extracellarmatrix, ECM)的酶家族,其生物活性依賴于鈣、鋅離子等微量元素。上海光源同步輻射具有高準直性,高分辨性,其中的三條線站能夠對醫(yī)學標本進行組織微量元素學及形態(tài)學研究。本課題希望通過應用同步輻射方法測定微量元素在翼狀胬肉和結膜組織的中的表達及差異,為翼狀胬肉發(fā)病機制的研究提供一定的理論基礎。 目的建立用同步輻射檢測翼狀胬肉及結膜組織的實驗條件,用同步輻射技術研究翼狀胬肉組織結構特點及微量元素的相對含量和分布,探討MMP-2和MMP-9在翼狀胬肉發(fā)病機制中的作用,為探索翼狀胬肉提供理論依據及新途徑。 方法實驗分三章,研究對象分為胬肉組和結膜組。 第一章：根據上海光源同步輻射BL15U、BL13W、BL16B線站中的檢測參數,設計翼狀胬肉與結膜標本制作的方案。 第二章：用同步輻射微束X射線熒光分析法測定胬肉組織與結膜組織中微量元素相對含量及分布；同軸相襯成像及顯微斷層成像法觀察胬肉三維結構；小角散射法測定胬肉與結組膜內部結構的差異； 第三章：用免疫組織化學方法檢測MMP-2和MMP-9在翼狀胬肉組織及結膜組中的表達并進行分析比較。 結果各章結果如下： 第一章：BL15U中：胬肉組織標本,經100g.l-1中性甲醛固定后,冰凍切片厚度40μm時能得到滿意結果。BL13W中：翼狀胬肉組織標本,經100g.l-1中性甲醛固定后,經嚴格的脫水后能得到滿意結果。 第二章：胬肉組中鈣、銅、鉛等微量元素的相對含量低于結膜組,而鐵、鋅元素高于結膜組,均有顯著性差異(p0.05)。翼狀胬肉組織中鈣元素散在小片集落狀分布；鐵、銅、鋅元素集中,大塊狀集中分布,形狀不規(guī)則；鉛元素密集斑駁狀鑲嵌分布；三維結構示內部結構不均勻,呈蜂窩狀排列。結膜組中鈣、鉛、銅散在、斑駁狀鑲嵌分布,鐵和鋅的分布相對較均勻,小片集中狀分布,呈分散性,內部組織排列均勻。 第三章：MMP-2和MMP-9在胬肉組和結膜組的陽性率分別為75%,85%和40%,25%。兩組MMP-2和MMP-9表達有顯著性差異(p0.01)；MMP-2與MMP-9的相關系數為rs=0.585,p0.007,有統(tǒng)計學意義,MMP-2與MMP-9呈正相關性。 結論各章結果如下： 1、BL15U的胬肉組織標本需要控制切片厚度,在40μm左右,所依附的載體為6μm的Mylar膜。BL13W的翼狀胬肉組織標本需要嚴格脫水,保證組織處于低含水量狀態(tài)。 2、同步輻射可以用于翼狀胬肉微量元素相對含量及分布,三維結構,及內部顆粒結構的研究。 3、MMP-2、MMP-9在翼狀胬肉中的表達上調,兩者表達呈正相關,起協(xié)同作用。
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【學位授予單位】：中南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R779.6

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本文編號：2330590