發(fā)布時(shí)間：2018-10-19 12:22

【摘要】：目的： 通過觀察菩人丹超微粉（Purendan superfine powder，PRD）對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜血管生成素2（Angiopoietin-2，Ang-2）和腫瘤壞死因子α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）表達(dá)的影響，探討PRD對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜微血管病變的保護(hù)作用。 方法： 36只Wistar大鼠按隨機(jī)原則分為3組：正常對(duì)照組、糖尿病模型組和PRD治療組，每組12只大鼠。糖尿病模型組和PRD治療組大鼠均采用2%STZ（25mg/kg·d）連續(xù)腹腔注射3天，建立2型糖尿病大鼠模型。以大鼠血糖≥16.7mmol/L作為成模判定標(biāo)準(zhǔn)。模型成功建立后，PRD治療組大鼠按PRD1.8g/kg·d標(biāo)準(zhǔn)灌胃給藥，糖尿病模型組大鼠按同樣標(biāo)準(zhǔn)給于不含PRD的溶劑灌胃，連續(xù)灌胃12周。正常對(duì)照組大鼠常規(guī)飼養(yǎng)不做處理。采用ONE TOUCH血糖儀檢測(cè)各組大鼠的血糖水平；采用蘇木精-伊紅染色法（hematoxylin-eosin staining，HE）觀察大鼠視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)變化；采用SP免疫組織化學(xué)染色法和Western blot法檢測(cè)大鼠視網(wǎng)膜Ang-2蛋白的表達(dá)；采用Western blot法和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reversetranscription-polymerase chain reaction, RT-PCR）法檢測(cè)大鼠視網(wǎng)膜TNF-α蛋白和mRNA的表達(dá)。 結(jié)果： 1.各組大鼠的血糖水平：糖尿病模型組大鼠血糖為21.63±1.01mmol/L，與正常對(duì)照組大鼠的血糖4.57±0.42mmol/L相比顯著升高（P＜0.01）；PRD治療組大鼠血糖為14.60±0.95mmol/L，明顯低于糖尿病模型組大鼠的血糖（P＜0.01）。 2.各組大鼠視網(wǎng)膜組織病理學(xué)改變：正常對(duì)照組大鼠視網(wǎng)膜層次清晰，結(jié)構(gòu)完整，內(nèi)界膜表面平滑，各級(jí)神經(jīng)細(xì)胞排列整齊有序，，大小均勻。糖尿病模型組大鼠視網(wǎng)膜可見內(nèi)界膜表面粗糙不平，明顯腫脹增厚、部分內(nèi)界膜破裂，偶見突出于內(nèi)界膜的毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞，視網(wǎng)膜層次清晰欠佳，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞數(shù)量減少，可見細(xì)胞空泡樣變、核固縮等現(xiàn)象。PRD治療組視網(wǎng)膜內(nèi)界膜表面粗糙欠平，輕度腫脹增厚、視網(wǎng)膜分層較清晰，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞排列輕度紊亂，細(xì)胞數(shù)量輕度減少。 3.各組大鼠視網(wǎng)膜Ang-2的表達(dá) 3.1SP免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：Ang-2蛋白免疫陽性產(chǎn)物呈棕黃色顆粒狀，表達(dá)位于細(xì)胞漿。Ang-2表達(dá)陽性細(xì)胞主要分布在大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層及內(nèi)核層。與正常對(duì)照組相比糖尿病模型組胞漿Ang-2免疫陽性產(chǎn)物呈深棕黃色；PRD治療組Ang-2免疫陽性產(chǎn)物表達(dá)較糖尿病模型組明顯減弱，胞漿呈棕黃色。 3.2采用MiVnt圖像分析系統(tǒng)對(duì)免疫組化陽性表達(dá)面積進(jìn)行定量分析結(jié)果：與正常對(duì)照組相比糖尿病模型組陽性表達(dá)面積明顯增加（P＜0.01）；PRD治療組與糖尿病模型組相比，陽性表達(dá)面積減少（P＜0.01）。 3.3Western blot法檢測(cè)Ang-2蛋白表達(dá)結(jié)果：與正常對(duì)照組比較，糖尿病模型組大鼠視網(wǎng)膜Ang-2蛋白表達(dá)明顯升高（P＜0.01）；PRD治療組大鼠視網(wǎng)膜Ang-2蛋白的表達(dá)與糖尿病模型組比較明顯降低（P＜0.01）。 4.各組大鼠視網(wǎng)膜TNF-α的表達(dá) 4.1Western blot法檢測(cè)TNF-α蛋白表達(dá)結(jié)果：與正常對(duì)照組比較，糖尿病模型組大鼠視網(wǎng)膜TNF-α蛋白的表達(dá)明顯升高（P＜0.01）；PRD治療組大鼠視網(wǎng)膜TNF-α蛋白的表達(dá)與糖尿病模型組比較明顯降低（P＜0.01）。 4.2RT-PCR檢測(cè)TNF-α mRNA表達(dá)結(jié)果：與正常對(duì)照組比較，糖尿病模型組大鼠視網(wǎng)膜TNF-α mRNA的表達(dá)明顯升高（P＜0.01）；PRD治療組大鼠視網(wǎng)膜TNF-α mRNA的表達(dá)與糖尿病模型組比較明顯降低（P＜0.01）。 結(jié)論： PRD可以改善糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病變，這一作用可能是通過下調(diào)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜Ang-2和TNF-α的表達(dá)，從而減少視網(wǎng)膜微血管滲漏及病理性新生血管生成，發(fā)揮其對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜微血管損傷的保護(hù)作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：承德醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R774.1;R587.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 高玉;吳晉暉;柳林;;鏈脲佐菌素誘發(fā)性糖尿病大鼠早期視網(wǎng)膜病變模型的建立[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2010年10期

2 彭芳,楊遠(yuǎn)華;實(shí)驗(yàn)性糖尿病動(dòng)物模型制備及指標(biāo)測(cè)定評(píng)價(jià)[J];大理學(xué)院學(xué)報(bào);2003年01期

3 陳樺;曾莉;;Ang-1治療大鼠糖尿病視網(wǎng)膜病變的實(shí)驗(yàn)研究[J];南昌大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年02期

4 張華敏;錢秋海;楊培民;于文洲;錢衛(wèi)斌;石捷;;糖視清對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清IL-6和TNF-α水平的影響[J];山東醫(yī)藥;2009年50期

5 路春;朱鴻;施彩虹;;早期糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清相關(guān)細(xì)胞因子的檢測(cè)[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年09期

6 龐宗然;蘇曉慧;劉祖涵;王朝暉;蘇占輝;;菩人丹超微粉對(duì)T2DM大血管病變大鼠骨骼肌組織IRS-1mRNA、GLUT4mRNA表達(dá)的影響[J];上海中醫(yī)藥雜志;2010年10期

7 張勇;王志斌;周霞;許玲;蘆曉磊;黃劍云;;血管生成素Ⅱ在低壓性缺氧成年大鼠視網(wǎng)膜的表達(dá)[J];眼科新進(jìn)展;2007年10期

8 施沃棟;王志良;羅敏;范先群;;鏈脲佐菌素誘發(fā)糖尿病大鼠模型視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)改變的觀察[J];眼科新進(jìn)展;2008年08期

9 馮闖;劉學(xué)政;左中夫;馮月珍;;血管生成素-1對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜毛細(xì)血管超微結(jié)構(gòu)的影響[J];眼科新進(jìn)展;2009年05期

10 宋鄂,董宇,石博,趙生友,吳家祥;STZ糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病變模型的評(píng)價(jià)[J];眼科研究;2004年02期

本文編號(hào)：2281099