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基于SERS技術(shù)的結(jié)腸癌與鼻咽癌免疫檢測研究

發(fā)布時間:2018-09-19 12:35
【摘要】:表面增強(qiáng)拉曼散射(surface-enhanced Raman scattering, SERS)技術(shù)作為鑒定生物分子種類最有力的分析工具之一,具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好及檢測條件溫和等優(yōu)點。目前,SERS技術(shù)應(yīng)用于腫瘤病理領(lǐng)域處于起步階段,但已顯現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景和發(fā)展空間。隨著檢測設(shè)備、激光技術(shù)及納米制備技術(shù)的進(jìn)展,可以預(yù)見SERS技術(shù)將會成為臨床病理和實驗室診斷以及病理學(xué)研究中強(qiáng)有力的檢測手段和分析工具,無論是在癌癥的檢測,還是在判斷預(yù)后、監(jiān)控療效等方面都將發(fā)揮重要的作用。 本文應(yīng)用不同活性基底,制備相應(yīng)的SERS免疫探針,對結(jié)腸癌以及鼻咽癌組織、結(jié)腸癌血液樣品進(jìn)行SERS免疫檢測,主要的研究內(nèi)容如下: 首先,采用金核銀殼納米粒子為增強(qiáng)基底,以4-巰基苯甲酸(4-MBA)為SERS標(biāo)記分子,制備CEA-SERS免疫探針,用于檢測結(jié)腸癌組織切片中CEA的表達(dá),并在結(jié)腸癌上皮細(xì)胞上檢測到很好的探針的SERS信號;其次利用銀納米粒子為增強(qiáng)基底,制備結(jié)晶紫(CV)標(biāo)記和4-巰基苯甲酸(4-MBA)標(biāo)記的SERS免疫探針對結(jié)腸癌組織進(jìn)行雙組分免疫檢測;然后又利用4-巰基苯甲酸(4-MBA)標(biāo)記CEA-SERS免疫探針對結(jié)腸癌血液中CEA的值并進(jìn)行定量檢測;最后利用4-巰基苯甲酸(4-MBA)標(biāo)記LPM1-SERS免疫探針對鼻咽癌上皮組織進(jìn)行SERS免疫檢測,并取得較好的結(jié)果。 研究表明,利用SERS探針進(jìn)行免疫檢測的方法具有簡單、快速、易行等優(yōu)點;同時對生物樣品進(jìn)行雙組分免疫檢測,提高了分析效率,可以在較短的時間內(nèi)同時得到多種待測物的分析結(jié)果,從而縮短了檢測的時間,簡化了分析過程,降低了檢測成本,具有較高的應(yīng)用價值。
[Abstract]:Surface enhanced Raman scattering (surface-enhanced Raman scattering, SERS) is one of the most powerful analytical tools for the identification of biomolecules. It has the advantages of high sensitivity, high specificity, good stability and mild detection conditions. The application of SERS technique in tumor pathology is still in its infancy, but it has a good application prospect and developing space. With the development of detection equipment, laser technology and nano-fabrication technology, it can be predicted that SERS technology will become a powerful tool for detection and analysis in clinical pathology and laboratory diagnosis and pathology research, whether in cancer detection. It will also play an important role in judging prognosis and monitoring curative effect. In this paper, using different active substrates, the corresponding SERS immunoprobe was prepared, and the samples of colon cancer, nasopharyngeal carcinoma and colon cancer blood were detected by SERS immunoassay. The main contents of this study were as follows: first, Gold core silver shell nanoparticles were used as enhancement substrate and 4-mercaptobenzoic acid (4-MBA) as SERS labeled molecule to prepare CEA-SERS immunoprobe to detect the expression of CEA in colon cancer tissue sections. The SERS signal of the probe was detected in colon cancer epithelial cells. Secondly, silver nanoparticles were used as the enhancement substrate. Preparation of crystal violet (CV) labeled and 4-mercaptobenzoic acid (4-MBA) labeled SERS immunosorbent probe for the detection of colon cancer tissue two-component immunoassay, and then using 4-mercaptobenzoic acid (4-MBA) labeled CEA-SERS probe to detect the value of CEA in the blood of colon cancer and quantitative detection. Finally, 4-mercaptobenzoic acid (4-MBA) labeled LPM1-SERS immunosorbent probe was used to detect SERS in nasopharyngeal carcinoma (NPC) epithelium, and good results were obtained. The results show that the immunoassay using SERS probe is simple, rapid and easy to carry out, and the two-component immunoassay for biological samples improves the efficiency of analysis. In a short time, the analytical results of a variety of objects to be tested can be obtained simultaneously, thus shortening the detection time, simplifying the analysis process and reducing the detection cost, so it has a higher application value.
【學(xué)位授予單位】:福建師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號】:R735.35;R739.6

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本文編號:2250134

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