【摘要】：目的:探討人生存素(survivin)抑制劑YM155{4,9-二氫-1-(2-甲氧基乙基)-2-甲基-4,9-二氧代-3-(2-吡嗪甲基)-1H-萘并[2,3-d]咪唑摀溴化物}對視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤Y79細(xì)胞凋亡、線粒體膜電位(△ψ_m)和細(xì)胞色素C(Cyt C)的影響,探討其誘導(dǎo)Y79細(xì)胞凋亡的線粒體機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)Y79細(xì)胞,分別以0、0.5、1、2、4、8nmol/L的YM155進(jìn)行處理,采用CCK-8法和溴脫氧尿嘧啶核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)摻入標(biāo)記法檢測YM155對Y79細(xì)胞增殖的抑制作用。Y79細(xì)胞隨機(jī)分為4組:對照組、陽性對照組[加入10nmol/L拓?fù)涮婵?topotecan)]和低劑量(1 nmol/L)、高劑量(2 nmol/L)YM155組。每組設(shè)3個復(fù)孔,處理24h。分別采用TUNEL染色和Annexin V-FITC/PI雙染法檢測凋亡的情況;采用JC-1活細(xì)胞染色檢測△ψ_m的變化;采用免疫熒光分析檢測Cyt C的分布;采用Western blot法檢測survivin和線粒體內(nèi)Cyt C的蛋白表達(dá)。結(jié)果:與對照組比較,YM155對Y79細(xì)胞增殖具有明顯抑制作用,并誘導(dǎo)Y79細(xì)胞凋亡(P0.05);YM155顯著降低Y79細(xì)胞的△ψ_m,促進(jìn)Cyt C由線粒體釋放至胞漿,降低線粒體內(nèi)Cyt C的水平(P0.05)。結(jié)論:YM155對Y79細(xì)胞增殖具有抑制作用,并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡其機(jī)制可能是通過線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑實現(xiàn)的。
[Abstract]:Objective: to investigate the apoptosis of retinoblastoma Y79 cells induced by human survivin (survivin) inhibitor YM155 {4O9-dihydro-1- (2-methoxyethyl) -2-methyl-4-dioxy-9- (2-pyrazinomethyl) -1H-naphthyl [2H- 3-d] imidazolium bromide}. The effects of mitochondrial membrane potential (蠄 M) and cytochrome C (Cyt C) (C (Cyt C) on apoptosis of Y79 cells were investigated. Methods: Y79 cells were cultured in vitro. Y79 cells were treated with YM155 of 0 0. 5, 1, 1, 2, 4 and 4 nmol / L, respectively. The inhibitory effect of YM155 on the proliferation of Y79 cells was detected by CCK-8 assay and bromodeoxyuridine BrdU incorporation method. Y79 cells were randomly divided into 4 groups: control group. Positive control group [10nmol/L topotecan (topotecan)] and low dose (1 nmol/L), high dose (2 nmol/L) YM155 group. Each group was treated with 3 multiple holes for 24 h. TUNEL staining and Annexin V-FITC/PI double staining were used to detect apoptosis; JC-1 living cell staining was used to detect the change of 蠄 m; immunofluorescence assay was used to detect the distribution of Cyt C; Western blot method was used to detect the expression of Cyt C in survivin and mitochondria. Results: compared with the control group, YM155 significantly inhibited the proliferation of Y79 cells, and induced apoptosis of Y79 cells (P0.05). YM155 significantly decreased 蠄 m of Y79 cells, promoted the release of Cyt C from mitochondria to cytoplasm and decreased the level of Cyt C in mitochondria (P0.05). Conclusion the cell proliferation of Y79 cells was inhibited by WYM155, and the mechanism of inducing cell apoptosis may be mediated by mitochondria mediated apoptosis.
【作者單位】： 牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院眼科;牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院放射科;
【基金】：黑龍江省衛(wèi)生計生委科研課題(No.JS215H623)
【分類號】：R739.7

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本文編號：2148348