發(fā)布時間：2018-07-15 18:24

【摘要】：目的探討胰島素樣生長因子-1受體(IGF-1R)對甲狀腺相關(guān)眼病(TAO)眼眶成纖維細(xì)胞合成透明質(zhì)酸(HA)的影響及其作用的信號通路。方法體外培養(yǎng)19例(23只眼)TAO患者(TAO組)及5例(5只眼)正常對照(對照組)眼眶成纖維細(xì)胞,并采用免疫熒光染色進行鑒定;細(xì)胞培養(yǎng)液中分別加入不同濃度重組人IGF-1,ELISA檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中HA質(zhì)量濃度;細(xì)胞培養(yǎng)液中分別加入IGF-1受體阻斷劑1H7、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)阻斷劑LY294002或蛋白激酶B(PKB)抑制劑(即Akt抑制劑)Ⅳ對細(xì)胞進行預(yù)處理,再加入重組人IGF-1,ELISA檢測培養(yǎng)上清液中HA質(zhì)量濃度,Western blot檢測PI3K、Akt及p-Akt蛋白表達情況。結(jié)果TAO組HA質(zhì)量濃度在重組人IGF-1 0~5nmol/L處理時逐漸增加,在IGF-1 10nmol/L時達到最大值,隨后在IGF-120~50nmol/L時出現(xiàn)波動。與正常對照組相比,0~50nmol/L重組人IGF-1處理的TAO組HA質(zhì)量濃度均增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。IGF-1受體阻斷劑1H7和Akt抑制劑Ⅳ對細(xì)胞預(yù)處理后,再加入重組人IGF-1,其細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的HA質(zhì)量濃度較對照組降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),PI3K阻斷劑LY294002預(yù)處理后,細(xì)胞培養(yǎng)上清液中HA質(zhì)量濃度約有降低,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.390)。與空白對照組相比,IGF-1處理組細(xì)胞p-Akt蛋白表達水平升高,而對PI3K和總Akt蛋白表達無明顯影響;1H7和LY294002可降低PI3K及p-Akt蛋白的表達水平,對總Akt蛋白表達的抑制作用不明顯;Akt抑制劑Ⅳ處理組,PI3K、Akt及p-Akt蛋白表達水平均較對照組明顯降低。結(jié)論 TAO患者眼眶成纖維細(xì)胞合成HA增加,IGF-1能促進HA合成,且這種促進作用部分通過PI3K/Akt信號通路實現(xiàn)。
[Abstract]:Objective To investigate the effect of insulin - like growth factor - 1 receptor ( IGF - 1R ) on the synthesis of hyaluronic acid ( HA ) in the orbital fibroblasts of thyroid - related eye disease .
【作者單位】： 四川大學(xué)華西醫(yī)院眼科;
【基金】：四川省科技計劃項目(No.2013SZ0029) 成都市科技惠民項目(No.2014-HM01-00142-SF)資助
【分類號】：R581.1;R771.3

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本文編號：2124990