本文選題：和厚樸酚 + 鼻咽癌��； 參考：《西南醫(yī)科大學》2017年碩士論文

【摘要】：目的:制備并驗證葉酸修飾的靶向人鼻咽癌HNE-1細胞的和厚樸酚的納米藥物系統(tǒng),并探討其對鼻咽癌抑制效果和機制。方法:本文使用兩親性三嵌段聚合物:聚己內酯-聚乙二醇-聚己內酯(PCL-PEG-PCL,PCEC)為原材料,采用聚醚酰亞胺(PEI)引入胺基后,與葉酸(Folate,FA)共價結合,制備了目標載體聚合物PCEC-PEI-FA。然后,以PCEC-PEI-FA聚合物為載體材料,通過薄膜分散法自主裝負載和厚樸酚形成具有主動靶向功能的載藥納米粒(ATNH),并使用透射電鏡、激光粒度儀、紅外光譜儀及核磁氫譜考察納米聚合物的形貌、粒徑及結構,溶血實驗考察溶血安全性、透析法考察體外釋藥特性。使用噻唑藍(methylthiazoletetrazolium, -MTT)試驗及熒光顯微鏡分別研究了該納米粒的細胞毒性和主動靶向作用。建立人鼻咽癌裸鼠體內皮下移植瘤模型,并接受主動靶向納米粒的治療。腫瘤再生長延遲時間曲線和中位生存期用于評價載藥納米粒的抗腫瘤療效。18F-脫氧葡萄糖(fluorine-18-deoxyglucose,FDG) PET/CT顯像用于評價腫瘤對載藥納米粒的早期反應。此外,載藥納米粒的抗腫瘤機制研究是通過流式細胞儀檢測細胞周期分布與細胞凋亡和免疫組化檢測血小板-內皮細胞黏附分子(CD 31)反應抗血管生成作用及增殖細胞核抗原(Ki 67)反應抗增殖作用。結果:該研究制備的主動靶向功能的和厚樸酚納米粒(ATNH)呈球形,平均流體動力學直徑為188.34 ±0.54 nm,無明顯的突發(fā)釋放,并呈現(xiàn)出緩慢釋藥的特點,未發(fā)生溶血現(xiàn)象。MTT實驗結果顯示:主動靶向載藥納米粒(ATNH)對腫瘤細胞的細胞毒性明顯高于普通和厚樸酚,其作用機制可能與葉酸受體(folate receptor, FR)介導的細胞內吞作用有關。主動靶向載藥納米(ATNH)組的細胞凋亡指數(shù)為86.07 ±4.95%,明顯高于各對照組(P 0.01).體內研究結果表明,主動靶向載藥納米粒(ATHN)組的腫瘤延遲生長時間及中位生存時間分別為24天及57.5天,明顯高于普通和厚樸酚對照組(腫瘤延遲生長時間及中位生存時間分別為8天及34天)及非主動靶向納米組(腫瘤延遲生長時間及中位生存時間分別為18天及42.5天)(P 0.01 )。小動物PET/CT顯像結果示主動靶向載藥納米粒(ATHN)組的T/M值為1.03±0.42(P0.01)。免疫組化結果顯示:主動靶向載藥納米粒(ATHN)組的Ki 67陽性指數(shù)為37.24 ± 3.89% (P 0.01),CD31陽性指數(shù)為2.16±0.76(P0.01)。與對照組相比,主動靶向載藥納米粒(ATHN)組在G1期的細胞比例升高,為51.24 ± 3.95%,明顯高于對照組(p 0.01)。結論:葉酸修飾的和厚樸酚納米粒具有對鼻咽癌細胞(HNE-1)的主動特異性靶向功能,對鼻咽癌移植瘤具有非常明顯的抗腫瘤作用。其抗癌機制可能與誘導人鼻咽癌細胞凋亡,G1期細胞周期阻滯,抑制腫瘤細胞增殖、腫瘤血管生成,并抑制腫瘤代謝有關。表明該載藥納米粒對于治療鼻咽癌等細胞表面葉酸受體表達豐富的腫瘤具有潛在的運用前景。
[Abstract]:Objective: to prepare and verify the nanoscale drug system of HNE-1 cells and magnolol in human nasopharyngeal carcinoma cells modified by folic acid, and to explore its inhibitory effect and mechanism on nasopharyngeal carcinoma. Methods: This paper uses polyhexyl polyhexyl polyhexyl polyhexyl (PCL-PEG-PCL, PCEC) as the raw material and the introduction of polyether imide (PEI) in the study of the inhibition of nasopharyngeal carcinoma (HNE-1). After the amine group, the target carrier polymer PCEC-PEI-FA. was prepared by covalent binding with folic acid (Folate, FA). Then, the PCEC-PEI-FA polymer was used as the carrier material. The load and the active targeting drug loaded nanoparticles (ATNH) were formed independently by the thin film dispersion method and the magnolol was formed by the thin film dispersion method. The transmission electron microscope, laser particle size meter, infrared spectrometer and nuclear magnetic hydrogen were used. The morphology, particle size and structure of nanoscale, hemolysis safety and drug release in vitro were investigated by hemolytic test. The cytotoxicity and active targeting effect of the nanoparticles were studied by methylthiazoletetrazolium (-MTT) test and fluorescence microscopy. The subcutaneous transplantation tumor in nude mice of human nasopharyngeal carcinoma was established. The model, and the treatment of active targeting nanoparticles. The tumor regrowth delay time curve and the median survival time are used to evaluate the antitumor effect of drug loaded nanoparticles,.18F- deoxyglucose (fluorine-18-deoxyglucose, FDG) PET/CT imaging for the evaluation of the early response of tumor to drug loaded nanoparticles. In addition, the anti-tumor mechanism of drug loaded nanoparticles The study was to detect the anti angiogenesis effect of cell cycle distribution, cell apoptosis and immunohistochemical detection of platelet endothelial cell adhesion molecule (CD 31) in response to angiogenesis and proliferating cell nuclear antigen (Ki 67). Results: the active targeting function and the magnolol nanoparticles (ATNH) were spherical and flat. The average fluid dynamic diameter was 188.34 + 0.54 nm, and there was no obvious burst release and showed the characteristics of slow release. The result of.MTT experiment without hemolysis showed that the cytotoxicity of active target drug loaded nanoparticles (ATNH) to tumor cells was obviously higher than that of common and magnolol. The mechanism of its action may be related to the folic acid receptor (folate receptor, FR). The apoptosis index of the active targeted drug loaded nanoparticles (ATNH) was 86.07 + 4.95%, which was significantly higher than that of the control group (P 0.01). In vivo studies showed that the delayed growth time and the median survival time of the active targeted drug loaded nanoparticles (ATHN) group were 24 days and 57.5 days respectively, which were significantly higher than those of ordinary and Magnolia officinalis. The phenol control group (the delayed growth time and the median survival time of the tumor was 8 and 34 days respectively) and the non active target group (18 days and 42.5 days, respectively, for the delayed growth time and the median survival time of the tumor) (P 0.01). The PET/CT imaging results of the small animals showed that the T/M value of the active targeted drug loaded nanoparticles (ATHN) group was 1.03 + 0.42 (P0.01). The results showed that the positive index of Ki 67 in active targeted drug loaded nanoparticles (ATHN) was 37.24 + 3.89% (P 0.01) and CD31 positive index was 2.16 + 0.76 (P0.01). Compared with the control group, the proportion of active targeted drug loaded nanoparticles (ATHN) in G1 phase increased, which was 51.24 + 3.95%, obviously higher than that of the control group (P 0.01). Conclusion: folic acid modified and Magnolia officinalis. Phenolic nanoparticles have an active specific targeting function to nasopharyngeal carcinoma cells (HNE-1), which have an obvious antitumor effect on nasopharyngeal carcinoma transplantation tumor. Its anticancer mechanism may be related to inducing apoptosis of human nasopharyngeal carcinoma cells, cell cycle arrest in G1 phase, inhibition of tumor cell proliferation, tumor angiogenesis, and inhibition of tumor metabolism. Nanoparticles have potential applications in the treatment of nasopharyngeal carcinoma and other tumor cells with abundant folate receptors.
【學位授予單位】：西南醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R739.63

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本文編號：2065205