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紫外線照射對(duì)SD大鼠晶狀體上皮細(xì)胞p53、Bax、Bcl-2表達(dá)的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-06-22 02:48

  本文選題:紫外線 + 晶狀體上皮細(xì)胞; 參考:《眼科新進(jìn)展》2017年05期


【摘要】:目的探討p53、Bax、Bcl-2基因在紫外線誘導(dǎo)晶狀體上皮細(xì)胞(lens epithelial cell,LEC)凋亡中的作用。方法 6周齡SD大鼠40只隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組,對(duì)照組不做處理,實(shí)驗(yàn)組腹腔注射100 g·L-1水合氯醛(0.35 mL/100 g),以波長(zhǎng)為300~320 nm的紫外線照射眼球15 min,分別于紫外線照射后1、3、5、7 d處死并取出晶狀體。Hoechst33258染色法觀察LEC的形態(tài)變化,實(shí)時(shí)定量PCR及免疫組織化學(xué)檢測(cè)p53、Bax、Bcl-2mRNA和蛋白在LEC中表達(dá)水平。結(jié)果紫外線照射后晶狀體發(fā)生混濁,其LEC發(fā)生凋亡,細(xì)胞排列不規(guī)則、大小不一。實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,紫外線照射后1 d Bax mRNA表達(dá)水平升高(P0.05),照射后3、5、7 d Bax和p53 mRNA表達(dá)水平均升高(均為P0.01);與對(duì)照組相比,Bcl-2 mRNA表達(dá)水平在照射后1 d降低(P0.01),而照射后5 d和7 d則升高(均為P0.01)。紫外線照射后p53與Bax mRNA相對(duì)表達(dá)水平的變化呈正相關(guān)(r=0.952,P0.01)。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,紫外線照射后LEC中p53和Bax蛋白表達(dá)逐漸增強(qiáng),且由細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核轉(zhuǎn)移;相反照射后1 d Bcl-2蛋白表達(dá)降低,而3、5、7 d則逐漸增高。結(jié)論紫外線誘導(dǎo)LEC凋亡與p53介導(dǎo)Bax/Bcl-2的表達(dá)調(diào)控有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the role of p53 Baxfen Bcl-2 gene in ultraviolet induced apoptosis of lens epithelial cells (lens epithelial cells). Methods Forty 6-week-old SD rats were randomly divided into two groups: control group and experimental group. In the experimental group, 100g L-1 chloral hydrate (0.35mL / 100 g),) was injected intraperitoneally into the eyeball for 15 mins with ultraviolet radiation wavelength of 300-320 nm. The rats were killed on the 7th day after ultraviolet irradiation, and the morphologic changes of LEC were observed by Hoechst33258 staining. The expression of Bcl-2 mRNA and protein in LEC was detected by real-time quantitative PCR and immunohistochemistry. Results after ultraviolet irradiation, lens opacity, LEC apoptosis and irregular cell arrangement were observed. The results of real-time quantitative PCR showed that, compared with the control group, The expression of Bax mRNA increased 1 day after ultraviolet irradiation (P0.05), and the expression of Bax and p53 mRNA increased on the 7th day after irradiation (both P0.01), and the expression level of Bcl-2 mRNA decreased at 1 day after irradiation (P0.01), but increased on the 5th and 7th day after irradiation (P0.01). There was a positive correlation between p53 and Bax mRNA expression after UV irradiation (r = 0.952, P 0.01). Immunohistochemical results showed that the expression of p53 and Bax protein in LEC increased gradually after ultraviolet irradiation and transferred from the cytoplasm to the nucleus, whereas the expression of Bcl-2 protein decreased at 1 day after irradiation, but increased gradually on the 7th day after irradiation. Conclusion UV induced apoptosis of LEC is related to p53 mediated Bax-Bcl-2 expression.
【作者單位】: 遵義醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【基金】:貴州省優(yōu)秀科技教育人才省長(zhǎng)專(zhuān)項(xiàng)基金資助項(xiàng)目(2009047)~~
【分類(lèi)號(hào)】:R776.1

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本文編號(hào):2051218

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