鈣蛋白酶小亞基Capn4在鼻咽癌細胞CNE2中DNA損傷修復(fù)的作用
發(fā)布時間:2018-05-27 10:08
本文選題:Capn + 鼻咽癌��; 參考:《中國臨床解剖學(xué)雜志》2017年03期
【摘要】:目的研究鈣蛋白酶小亞基Capn4對放射所致的鼻咽癌細胞CNE2在DNA損傷修復(fù)中的作用及可能影響的修復(fù)通路。方法選取鼻咽癌細胞CNE2與293T細胞在37℃、5%CO_2條件下培養(yǎng),Western blot法檢測Capn4在不同細胞中蛋白表達水平;構(gòu)建sh RNA下調(diào)Capn4表達的CNE2細胞并以Western blot法驗證;高內(nèi)涵細胞成像分析儀分析γ-H2AX在放射后的CNE2細胞及下調(diào)Capn4表達的CNE2細胞中的平均熒光強度;非同源末端連接(NHEJ)通路特異性的質(zhì)粒EJ5-GFP用Fugen6 HD轉(zhuǎn)入空載的CNE2細胞及下調(diào)Capn4的CNE2細胞,用高內(nèi)涵細胞成像分析儀檢測GFP的陽性率,觀察下調(diào)Capn4對放射誘導(dǎo)的鼻咽癌細胞DNA損傷NHEJ修復(fù)通路的影響。結(jié)果 Capn4在鼻咽癌細胞系中表達明顯高于正常細胞(P0.01);sh RNA確實下調(diào)Capn4在鼻咽癌細胞中的表達;下調(diào)Capn4表達對放射造成的CNE2細胞DNA損傷修復(fù)有抑制作用(P0.01);下調(diào)Capn4表達能夠抑制CNE2細胞DNA損傷后NHEJ通路的修復(fù)(P0.01)。結(jié)論 Capn4在鼻咽癌細胞CNE2中高表達,下調(diào)Capn4的表達能抑制放射所致的DNA損傷修復(fù),這種作用可能是通過抑制NHEJ通路實現(xiàn)的。
[Abstract]:Objective to investigate the role of calpain small subunit Capn4 in the repair of DNA damage in nasopharyngeal carcinoma (NPC) cells induced by radiation and its possible effects on the repair pathway. Methods CNE2 and 293T cells were cultured at 37 鈩,
本文編號:1941577
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