本文選題：microRNA-24 + Sp1��； 參考：《廣西醫(yī)科大學》2016年碩士論文

【摘要】：目的：探討microRNA-24(miR-24)對人鼻咽癌CNE2細胞裸鼠移植瘤放療敏感性的影響及其可能機制。從分子基因學的角度出發(fā),為尋找能增強腫瘤放療敏感性、高效低毒的新型功能性分子提供理論依據。方法：建立人鼻咽癌CNE2細胞裸鼠皮下移植瘤模型,成瘤后將裸鼠隨機分為miR-24 agomir組(實驗組)、miR-24 agomir NC組(陰性對照組)、生理鹽水組(空白對照組)以及DDP組(陽性對照組)共4組.miR-24 agomir組、miR-24 agomir-NC組分別于裸鼠移植瘤瘤腔內注射miR-24 agomir或 miR-24 agomir-NC (10nmol/只,0.1ml/次,1次/4d);DDP組裸鼠移植瘤瘤腔內注射DDP溶液(1.0mg/kg,0.1ml/次,1次/4d);空白對照組給予相同體積的生理鹽水；給藥次數為兩次。第二次給藥結束后立即給予8Gy的60Coγ射線照射,放射后每兩天測量一次移植瘤長徑、短徑,計算腫瘤體積。放射16天后處死裸鼠,取移植瘤,繪制腫瘤生長曲線圖；Real-timePCR法測定組織中Spl基因mRNA的表達;免疫組化法、Western-blot法測定組織中Spl蛋白的表達。結果：放射后的16天內,miR-24 agomir組腫瘤生長速度明顯較miR-24agomir NC組及生理鹽水組慢(P0.05),處死裸鼠后,miR-24 agomir組瘤體(748.9±61.9)mm3,顯著低于miR-24 agomir NC組(1961.2±126.8)mm3和生理鹽水組(2048.0±101.8)Imm3(P0.05),而與DDP組瘤體(597.5±35.0)耐體積相比,無明顯差異(P0.05)；與miR-24 agomir NC組和生理鹽水組比較,miR-24 agomir組中Sp1的mRNA及蛋白的表達量均低于miR-24 agomir NC組和生理鹽水組(P0.05),而與DDP組比較, miR-24 agomir組中Sp1的mRNA及蛋白的表達量高于DDP組(P0.05)。結論：miR-24能增強人鼻咽癌CNE2細胞裸鼠移植瘤的放療敏感性,其機制可能與下調Sp1有關。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of microRNA-24miR-24 on the radiosensitivity of human nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE2 cells in nude mice and its possible mechanism. From the point of view of molecular genetics, this paper provides a theoretical basis for finding new functional molecules that can enhance the sensitivity of tumor radiation therapy and are highly effective and low toxic. Methods: a subcutaneous transplanted tumor model of human nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE2 cells was established in nude mice. After tumorigenesis, nude mice were randomly divided into 4 groups: miR-24 agomir group (experimental group), control group (negative control group), normal saline group (blank control group) and DDP group (positive control group). MiR-24 agomir or miR-24 agomir-NC 10 nmol / L was injected intravenously into the transplanted tumor of nude mice in the same volume of normal saline. DDP solution of 1.0 mg / kg 0.1 ml / time was injected into the tumor cavity of nude mice, and the blank control group was given the same volume of normal saline as the control group, and the control group was given the same volume of normal saline, and the control group was given the same volume of normal saline. The drug was given twice. 8Gy 60Co 緯 -ray irradiation was given immediately after the second administration. The long and short diameter of the transplanted tumor were measured every two days after irradiation, and the tumor volume was calculated. The nude mice were killed 16 days after radiation and the tumor growth curves were plotted to detect the expression of Spl gene mRNA and the expression of Spl protein in tissues by immunohistochemistry and Western-blot. Results: the tumor growth rate of miR-24 agomir group was significantly slower than that of miR-24agomir NC group and normal saline group within 16 days after radiation, and the tumor volume of miR-24 agomir NC group was significantly lower than that of DDP group (597.5 鹵35.0), and the tumor volume of miR-24 agomir NC group was 748.9 鹵61.9 鹵61.9 mm ~ (-3), significantly lower than that of miR-24 agomir NC group (1961.2 鹵126.8)mm3) and saline group (2048.0 鹵101.8 Imm3P0.05). Compared with miR-24 agomir NC group and normal saline group, the expression of mRNA and protein of Sp1 in miR-24 agomir group was lower than that in miR-24 agomir NC group and normal saline group (P 0.05). Compared with DDP group, the expression of Sp1 mRNA and protein in miR-24 agomir group was higher than that in DDP group (P 0.05). Conclusion: 1 miR-24 can enhance the radiosensitivity of human nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE2 cells to xenografts in nude mice, and the mechanism may be related to down-regulation of Sp1.
【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R739.63

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