本文選題：角膜緣干細(xì)胞 + 角膜保存液　； 參考：《青島大學(xué)》2012年碩士論文

【摘要】：第一部分ROCK抑制劑在角膜保存中的作用研究 目的 通過在角膜中期保存液中添加ROCK抑制劑Y-27632,觀察其對(duì)保存角膜上皮細(xì)胞活性率、角膜緣干細(xì)胞增殖能力、角膜內(nèi)皮細(xì)胞活性的影響。 方法 新鮮兔角膜15只,4℃保存在含10μM Y-27632的角膜中期保存液中,保存時(shí)間為0、1、4、7、14天,未添加Y-27632的角膜中期保存液作為對(duì)照組。通過檢測(cè)角膜緣上皮細(xì)胞的活性率、干細(xì)胞克隆形成能力,分析Y-27632對(duì)保存的角膜材料中角膜緣干細(xì)胞的影響；同時(shí),使用臺(tái)盤藍(lán)一茜素紅染色觀察中央角膜內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)的變化并計(jì)數(shù)內(nèi)皮細(xì)胞活性數(shù),初步評(píng)估Y-27632對(duì)角膜內(nèi)皮細(xì)胞保存的影響。 結(jié)果 新鮮角膜材料在添加Y-27632的角膜保存液中保存7-14天,分離的角膜緣上皮細(xì)胞仍具有較強(qiáng)的細(xì)胞活性率及克隆形成能力。對(duì)角膜內(nèi)皮行臺(tái)盤藍(lán)一茜素紅染色顯示,在添加Y-27632的角膜中期保存液保存14天后,角膜內(nèi)皮細(xì)胞仍能維持其正常形態(tài),活性無明顯變化。 結(jié)論 初步試驗(yàn)結(jié)果顯示,Y-27632可作為角膜中期保存液的添加物,能夠有效延長(zhǎng)角膜上皮和角膜內(nèi)皮細(xì)胞在體外的保存時(shí)間。 第二部分ROCK抑制劑在角膜緣干細(xì)胞凍存中的作用研究 目的 通過在角膜緣上皮細(xì)胞的體外擴(kuò)增、凍存復(fù)蘇過程中添加ROCK抑制劑Y-27632,觀察其對(duì)角膜緣上皮細(xì)胞活性和干細(xì)胞克隆形成能力的影響。 方法 將新鮮分離的上皮細(xì)胞或經(jīng)過擴(kuò)增的兔角膜緣上皮細(xì)胞凍存,根據(jù)凍存液及培養(yǎng)過程中是否添加Y-27632將細(xì)胞進(jìn)行不同的分組,Y-27632的添加濃度為10μM。觀察各組細(xì)胞凍存、復(fù)蘇后細(xì)胞活性、克隆形成能力等情況,評(píng)價(jià)Y-27632在角膜緣干細(xì)胞低溫凍存、培養(yǎng)中的作用。 結(jié)果 在角膜緣上皮細(xì)胞培養(yǎng)過程中添加Y-27632,可顯著促進(jìn)細(xì)胞增殖,提高角膜緣上皮細(xì)胞的克隆形成能力。將體外擴(kuò)增后的角膜緣上皮細(xì)胞進(jìn)行凍存復(fù)蘇后發(fā)現(xiàn),只在凍存液中添加Y-27632的細(xì)胞,短期凍存復(fù)蘇后的細(xì)胞,在細(xì)胞活性和克隆形成能力未見顯著改變,但中長(zhǎng)期凍存(14天)復(fù)蘇后的角膜緣上皮細(xì)胞,在細(xì)胞活性、增殖和克隆形成能力有明顯提高；在體外擴(kuò)增和凍存復(fù)蘇全程中添加Y-27632時(shí),角膜緣上皮細(xì)胞經(jīng)過凍存、復(fù)蘇后其活性、增殖能力和克隆形成能力與其它組相比均有顯著提高,且其活性和功能與凍存前的水平相當(dāng)。 結(jié)論 Y-27632在低溫凍存、復(fù)蘇培養(yǎng)過程中對(duì)角膜緣干細(xì)胞具有明顯的保護(hù)作用,能夠保持角膜緣干細(xì)胞活性,提高干細(xì)胞增殖和克隆形成能力。
[Abstract]:The role of ROCK inhibitor in Corneal Preservation Purpose The effects of ROCK inhibitor Y-27632 on corneal epithelial cell viability, corneal limbal stem cell proliferation and corneal endothelial cell activity were observed. Method 15 fresh rabbit corneas were stored at 4 鈩，

本文編號(hào)：1841169