本文選題：PCDH8 + 甲基化�。� 參考：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文

【摘要】：目的：PCDH8（Protocadherin8）基因是部分腫瘤發(fā)展進(jìn)程中的一種腫瘤抑制物，本實驗旨在研究PCDH8的甲基化水平及其在鼻咽癌中的抑癌功能。 方法：采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR），檢測鼻咽癌細(xì)胞系C666-1、CNE1、HK1、HNE1、HONE1，正常的人的鼻咽上皮細(xì)胞系NP69及下咽癌細(xì)胞系Fadu里面PCDH8mRNA的轉(zhuǎn)錄的水平。在細(xì)胞系、41例鼻咽癌組織和16例慢性鼻咽炎組織中PCDH8啟動子的甲基化水平用甲基化特異性PCR（MSP）來進(jìn)行測定。然后再用該基因轉(zhuǎn)染鼻咽癌細(xì)胞CNE1，檢測該基因?qū)υ摷?xì)胞的生理作用。 結(jié)果：在正常鼻咽上皮細(xì)胞系NP69及下咽癌細(xì)胞系Fadu里面，PCDH8基因是穩(wěn)定表達(dá)的。在這些鼻咽癌細(xì)胞系里面，HK1和HNE1細(xì)胞的表達(dá)是下調(diào)的，另三株均的表達(dá)是缺失的。甲基化的分析顯示，PCDH8基因在鼻咽癌細(xì)胞系及Fadu細(xì)胞系中均發(fā)生了甲基化，，鼻咽癌組織中甲基化率為85.3%(35/41)，而在正常鼻咽細(xì)胞系NP69和慢性鼻咽炎組織中均未發(fā)生甲基化。PCDH8基因的啟動子的甲基化的水平與鼻咽癌病人的臨床的病理參數(shù)全部沒有任何的聯(lián)系。用5-氮雜-2'-脫氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine，Aza)和曲古菌素A （trichostatin A，TSA）處理鼻咽癌細(xì)胞后，可恢復(fù)PCDH8的表達(dá)。PCDH8在鼻咽癌細(xì)胞里面的過表達(dá)，抑制了CNE1的生長和移動。 結(jié)論：本實驗第一次研究說明了PCDH8基因在鼻咽癌的細(xì)胞和組織里面都發(fā)生了啟動子的甲基化，它還可以抑制CNE1的生長和移動。所以，PCDH8基因可以作為鼻咽癌的一個候選的抑瘤基因。
[Abstract]:Objective to investigate the methylation level of PCDH8 and its function in nasopharyngeal carcinoma (NPC).Methods: reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to detect the transcription of PCDH8mRNA in nasopharyngeal carcinoma cell line C666-1, normal human nasopharyngeal epithelial cell line NP69 and hypopharyngeal carcinoma cell line Fadu.The methylation level of PCDH8 promoter in 41 nasopharyngeal carcinoma tissues and 16 chronic nasopharyngitis tissues was determined by methylation-specific PCDH8 MSPs.Then the gene was transfected into nasopharyngeal carcinoma cell line CNE 1, and the physiological effect of the gene on CNE 1 cells was detected.Results: in normal nasopharyngeal epithelial cell line NP69 and hypopharyngeal carcinoma cell line Fadu, the expression of pPCDH8 gene was stable.In these nasopharyngeal carcinoma cell lines, the expression of HK1 and HNE1 cells was down-regulated and the other three strains were absent.Methylation analysis showed that the PCDH8 gene was methylated in both nasopharyngeal carcinoma and Fadu cell lines.The methylation rate in nasopharyngeal carcinoma tissues was 85.3% and 35 / 41%, while no methylation level of promoter of methyl.PCDH8 gene was found in normal nasopharyngeal cell line NP69 and chronic nasopharyngitis tissue. There was no correlation between the methylation level and the clinicopathological parameters of nasopharyngeal carcinoma patients.After treated with 5-aza-2-deoxycytidine (Aza) and trichostatin (TSA), the overexpression of PCDH8. PCDH8 in nasopharyngeal carcinoma cells was restored, which inhibited the growth and migration of CNE1.Conclusion: this first study demonstrated that the promoter methylation of PCDH8 gene occurs in nasopharyngeal carcinoma cells and tissues, and it can also inhibit the growth and migration of CNE1.Therefore, PCDH 8 gene can be used as a candidate tumor suppressor gene for nasopharyngeal carcinoma.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R739.63

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